4-Activity Conservation and utilization of resources

กิจกรรม อนุรกั ษแ ละใชป ระโยชนทรพั ยากรโครงการอนรุ กั ษพ ันธกุ รรมพชื อันเนื่องมาจากพระราชดำริฯสมเด็จพระเทพรัตนราชสดุ าฯ สยามบรมราชกมุ ารีประจำป 2560 www.rspg.rmutt.ac.th www.facebook.com/RSPG.RMUTT

~ 21 ~ กิจกรรมท่ี 4 : กิจกรรมอนุรักษ์และใชป้ ระโยชน์ทรัพยากร มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลธัญบุรี ได้รับงบประมาณรายจ่ายประจาปี 2560 ให้ดาเนินโครงการวิจัย ภายใต้กจิ กรรมที่ 4: กจิ กรรมอนุรกั ษแ์ ละใช้ประโยชนท์ รัพยากรจานวน 9 โครงการ ไดแ้ ก่1. ชอ่ื โครงการวิจัย : คณุ สมบัติของสารสกดั จากบวั หลวงต่อการทางานของระบบ ภมู ิคมุ้ กนั ของมนุษย์ Property of Lotus extracts on human immune function1. ประเภทเงนิ อดุ หนนุ โครงการวิจัย  โครงการวจิ ยั พื้นฐาน  โครงการวิจัยประยกุ ต์  โครงการวิจัยและพัฒนา2. ผลผลติ งานวจิ ยั  ผลผลติ ผลงานวิจัยเพอื่ สรา้ งองค์ความรู้  ผลผลติ ผลงานวจิ ยั เพ่ือถ่ายทอดเทคโนโลยี3. รายชอื่ ผู้วจิ ัย หัวหนา้ โครงการวจิ ยั ดร.รุง่ นภา ศรานุชิต4. ไดร้ บั จดั สรรงบประมาณ  เงนิ แผ่นดิน  เงินรายได้ ประจาปี 2560 เป็นเงนิ จานวน ...500,000.......-บาท (......ห้าแสนบาทถว้ น....................)5. เริม่ ทาการวิจัยเม่ือ.... 1 ตลุ าคม 2559.... ถงึ 30 กนั ยายน 2560.......รวมระยะเวลาโครงการ 1 ปี6. รายละเอียดเกีย่ วกับผลงานความก้าวหน้าของการวจิ ัย ความสาคัญและทมี่ าของปัญหา บัวหลวง (Nelumbo) เป็นพืชที่พบมากในประเทศไทย รายงานการวิจัยพบว่าองค์ประกอบของบัวหลวงมีสรรพคุณในการบารุงร่างกายและมีสารออกฤทธ์ิท่ีมีคุณสมบั ติทางเคมีในการยับย้ังการเจริญของจุลชีพ ต้านการอักเสบและยับยั้งการแบ่งตัวของเซลล์มะเร็งบางชนิด อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีการศึกษาใดรายงานผลของสารสกัดบัวหลวงต่อการทางานของเซลล์ในระบบภูมิกันของมนุษย์อย่างครอบคลุม การวิจัยนี้มุ่งศึกษาผลของสารสกัดบัวหลวงที่มีต่อการทางานของเซลล์ใน Innate และ Adaptive immune systemการศึกษาน้ีจะทาให้ทราบถึงผลของสารสกัดบัวหลวงต่อการทางานของเซลล์ในระบบภูมิคุ้มกันแบบองค์รวมทราบชนิดของสารสกัดท่ีมีฤทธ์ิส่งเสริมการทางานของระบบภูมิคุ้มกัน รวมถึงความเป็นพิษของสารสกัด บัวหลวงต่อระบบภูมิคุ้มกัน ข้อมูลการศึกษาน้ีจะนาไปสู่การพัฒนาผลิตภัณฑ์เสริมอาหารจากสารสกัดบัวหลวงเพ่อื สง่ เสรมิ การทางานของเซลล์ในระบบภมู คิ ุ้มกันในประชากรไทย 6.1 วัตถุประสงคข์ องโครงการ (พ.ศ.2560-2564) 1. เพอื่ สนองพระราชดาริในโครงการ อพ.สธ. 2. เพอ่ื สกดั สารจากกลีบบัวหลวง และทดสอบคณุ สมบัตทิ างเคมขี องสารสกัดจากกลบี บัวหลวง 3. เพ่ือศึกษาผลของสารสกัดจากกลีบบวั หลวงตอ่ การทางานของเซลลใ์ นระบบภมู คิ ุ้มกนั 4. เพ่ือศึกษากลไกการออกฤทธิ์ของสารสกัดจากกลีบบัวหลวงต่อการทางานของเซลล์ในระบบ ภมู ิคุ้มกัน 5. เพ่ือพัฒนาผลิตภัณฑ์เสริมอาหารต้นแบบจากสารสกัดจากกลีบบัวหลวงท่ีมีคุณสมบัติส่งเสริมการ ทางานของเซลลใ์ นระบบภมู คิ ุ้มกัน

~ 22 ~วัตถุประสงค์ของโครงการวิจัย ปีงบประมาณ 2560 คือ เพ่ือสนองพระราชดาริในโครงการ อพ.สธ.โดยสกดั สารจากกลบี บวั หลวง และทดสอบคุณสมบัติทางเคมีของสารสกัดกลีบบวั หลวง และทดสอบความเป็นพษิ ของสารสกัดกลีบบวั หลวงตอ่ เซลลเ์ มด็ เลือดขาวของมนษุ ย์6.2 การดาเนินงานวิจัยตามท่ีเสนอไวใ้ นโครงการวิจยั กับงานวิจัยท่ีได้ดาเนินการไปแล้ว (ดงั ตาราง)ลาดบั ท่ี แผน การดาเนินการจริง1 ทบทวนวรรณกรรม ดาเนินการแลว้ ร้อยละ 1002 ออกแบบงานวิจยั และจดั ทาแผนวจิ ัย ดาเนินการแล้วรอ้ ยละ 1003 ขอรบั รองจรยิ ธรรมการวจิ ัยในมนษุ ย์ ดาเนนิ การร้อยละ 504 เตรียมสารเคมแี ละอุปกรณ์สาหรับสกัดสารสกดั จากบวั ดาเนินการร้อยละ 100 หลวง5 จัดเตรยี มบวั หลวง สกดั สารรวมและสกดั แยกส่วน ดาเนินการรอ้ ยละ 1006 ศกึ ษาองคป์ ระกอบทางเคมขี องสารสกดั จากบัวหลวง ดาเนนิ การร้อยละ 507 ศึกษาความเป็นพษิ ของสารสกดั จากบวั หลวงตอ่ เซลล์ ดาเนนิ การร้อยละ 508 วเิ คราะหข์ อ้ มูล ดาเนินการร้อยละ 509 จัดทาเอกสารรายงานผลการวิจยั ดาเนินการรอ้ ยละ 306.3 ผลของการดาเนินการวจิ ัยทไ่ี ดด้ าเนนิ การไปแลว้ ผู้วิจัยทาการทบทวนวรรณกรรมตามแผนการดาเนินงานวิจัยเพื่อคัดเลือกส่วนประกอบท่ีเหมาะสมสาหรับนามาทดสอบคุณสมบัติการออกฤทธิ์ต่อเซลล์ในระบบภูมิคุ้มกันของมนุษย์ ผลการทบทวนวรรณกรรมพบว่าส่วนประกอบของบัวหลวง ได้แก่ เกสรบัว เม็ดบัว ดีบัว ใบบัว ก้านใบ ก้านดอก ล้วนมีสารออกฤทธ์ิสาคัญท่ีช่วยบารุงรา่ งกายและรักษาโรค อย่างไรก็ตาม ยังไม่พบว่ามีการนากลีบบัวหลวงมาสกัดเพ่ือศึกษาฤทธิ์ทางเคมีทมี่ ผี ลต่อการทางานของระบบภูมิคุม้ กนั ของร่างกายมนุษย์ ผู้วิจัยจงึ ทาการศึกษาสารออกฤทธข์ิ องกลีบบัวหลวงต่อระบบภูมิคุม้ กันของมนุษยโ์ ดยมีผลการดาเนินงานดงั น้ี5.3.1 การเตรยี มตวั อยา่ งบวั หลวงและการสกดั สารจากกลบี บวั หลวงนากลบี บัวหลวงมาอบที่อุณหภมู ิ 60oC บดหยาบร่อนดว้ ยตะแกรงขนาดช่อง 60 mesh นาผงหยาบท่ีได้ไปสกัดด้วยวิธีต่างๆ ดังนี้ Soxhlet’s extraction, Maceration extraction และ Ultrasound-assistedextractionการสกดั ดว้ ยวธิ ี Soxhlet’s extractionเตรียมตัวอย่างผงหยาบ 10 กรัม สกัดด้วยวิธี Soxhlet’s extraction โดยใช้ n-hexane 100 mlเป็นตัวทาละลาย นาส่วนท่ีเป็นตัวทาละลายไปกรองด้วยกระดาษ จากน้ันระเหยตัวทาละลายออกด้วยเครื่องRotary Evaporator นาสารสกัดที่ได้มาทาการสกัดด้วยข้ันตอนเริ่มต้นอีกคร้ัง โดยทาการทดลองซ้า 3 คร้ังคานวณหาปรมิ าณผลิตผล (% Yield)การสกัดด้วยวธิ ี Maceration extractionเตรียมตัวอย่างผงหยาบ 10 กรัม แช่ใน n-hexane 100 ml เขย่าโดยใช้ water bath shaker ที่อุณหภมู หิ อ้ ง กรองผงหยาบออก นาส่วนทีเ่ ป็นตวั ทาละลายไปกรองอกี ครั้งดว้ ยกระดาษกรอง จากน้ันระเหยตวัทาละลายออกด้วยเครื่อง Rotary Evaporator นาสารสกัดท่ีได้มาทาการสกัดด้วยขั้นตอนเริ่มต้นอีกครั้ง โดยทาการทดลองซา้ 3 ครั้ง คานวณหา % Yieldการสกัดดว้ ยวิธี Ultrasound-assisted extractionเตรียมตัวอย่างผงหยาบ 100 กรัม แช่ใน n-hexane 500 ml นาไปเขย่าโดยใช้คลื่นเสียงที่อุณหภูมิ40oC 40 นาที กรองผงหยาบออก นาส่วนท่ีเป็นตัวทาละลายไปกรองอีกครั้ง จากน้ันระเหยตัวทาละลายออก

~ 23 ~ด้วยเคร่ือง Rotary Evaporator นาสารสกัดที่ได้มาทาการสกัดด้วยขั้นตอนเร่ิมต้นอีกคร้ัง โดยทาการทดลองซา้ 3 ครั้ง คานวณหา % Yield) ผลการทดลองแสดงในภาพที่ 1 การสกัดสารจากกลีบบัวหลวงด้วยวิธี Soxhlet’s extraction,Maceration extraction และ Ultrasound-assisted extraction ในตัวทาละลาย 4 ชนิด โดยเรียงลาดับจากตัวทาลายขั้วต่าสุดไปหาตัวทาละลายที่มีขั้วสูง ได้แก่ n-Hexane <Dichloromethane< Ethylacetate<Ethyl alcohol สารสกัดที่ได้ในข้ันตอนสุดท้ายของทุกวิธีจะถูกนาไปวิเคราะห์คุณสมบัติโดยวิธีการแยกสารแบบ Tin-layer chromatography (TLC ) แ ล ะ ก า ร วิ เ ค ร า ะ ห์ โ ด ย เ ค ร่ื อ ง มื อ High Performance LiquidChromatography (HPLC) ก่อนจะนาไปทดสอบความเป็นพษิ ต่อเซลล์ในระบบภมู คิ ้มุ กนั ต่อไป ภาพที่ 1 แสดงร้อยละสารสกัดกลบี บัวหลวงโดยใช้ตวั ทาละลายต่างๆกันดว้ ยวิธี A) Maceration Extraction; B) Soxhlet Extraction; C) Ultrasonic Extraction 5.3.2 การทดสอบหากล่มุ สารประกอบทางเคมีของสารสกดั กลบี บัวหลวง สารสกัดกลีบบัวหลวงท่ีได้จากการสกัดข้างต้น ถูกนามาวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีได้แก่สารประกอบฟนี อลกิ โดยใช้วิธี Folin-Ciocalteu ผลการทดลองแสดงดังภาพท่ี 2

~ 24 ~ภาพท่ี 2 ปรมิ ารสารประกอบฟีนอลกิ ในสารสกดั กลบี บัวหลวงเมือ่ ทดสอบดว้ ย วธิ ี Folin-Ciocalteu 5.3.3 การทดสอบความเป็นพิษของสารสกัดกลบี บัวหลวงต่อเซลล์เม็ดเลือดขาว งานวิจัยนี้อยู่ระหว่างยื่นขอจริยธรรมการวิจัยในมนุษย์ต่อคณะกรรมการจริยธรรมการวิจัยมหาวิทยาลัยนเรศวร หากได้รับการอนุมัติ จะสามารถดาเนินการทดสอบความเป็นพิษของสารสกัดกลีบบัวหลวงต่อเซลลเ์ ม็ดเลอื ดขาวไดท้ ันที6.4 งบประมาณทีไ่ ด้จา่ ยไปแล้ว แยกตามหมวดรายจา่ ย (สารวจถึง 30 เดอื น กนั ยายน พ.ศ.2560)1. งบประมาณรวมโครงการ ...500,000.00 -บาท2. งบประมาณทีใ่ ชไ้ ป …223,261.70 -บาท2.1 งบบุคลากร … 90,000.00 -บาทค่าตอบแทนนกั วจิ ยั .........-......... .....-บาทค่าตอบแทนผูช้ ่วยวิจยั ..... 90,000.00 -บาท2.2 งบดาเนินการ ....118,267.10 -บาทคา่ ใชจ้ า่ ยในการเดนิ ทาง .........-......... .....-บาทคา่ ใช้จา่ ยในการฝึกอบรม .........-......... .....-บาทคา่ จา้ งพิมพ์เอกสาร .........-......... .....-บาทค่าไปรษณยี ์ โทรเลข ค่าโทรศัพท์ .........-......... .....-บาทค่าวัสดอุ ปุ กรณ์ ....118,267.10 -บาท2.3 งบลงทนุ (ถ้ามี) .........-......... .....-บาทค่าใช้จ่ายในการซอื้ ครภุ ณั ฑ์/ส่ิงก่อสรา้ ง .........-......... .....-บาท2.4 ค่าสาธารณูปโภค ......15,000.00..-บาทจ่ายใหแ้ กห่ น่วยงานในอัตรา 5% ......15,000.00..-บาท3. งบประมาณทเ่ี หลอื ....276,738.30..-บาท6.5 งานทจ่ี ะดาเนนิ การตอ่ ไป และกาหนดเวลาดาเนินการ

~ 25 ~ ศึกษาองค์ประกอบทางเคมีและความเป็นพิษของสารสกัดบัวหลวงต่อเซลล์เม็ดเลือดขาว วิเคราะห์ข้อมลู และจัดทาเอกสารงานวจิ ยั เพื่อตีพิมพ์ 6.6 คาชี้แจงเพิ่มเติม การจัดซ้อื สารมาตรฐานใช้ระยะเวลานานในการจดั ส่งสินคา้ การขอจรยิ ธรรมวจิ ยั ในมนษุ ย์ใช้เวลานานในการพจิ ารณาอนุมัติ ส่งผลทาใหก้ ารทดสอบคุณสมบัตทิ างเคมีและความเป็นพิษของสารสกัดลา่ ช้า ไม่เป็นไปตามแผนงาน นางสาวรุ่งนภา ศรานุชิต หวั หน้าโครงการวิจยั

~ 26 ~2.ชอ่ื โครงการวิจัย: ฤทธท์ิ างชวี ภาพดา้ นสรรพคณุ ทางยาของสายพนั ธ์ุบัว (บวั หลวง) Biological activities of medicinal properties of lotus species (Nelumbo nucifera Geartn.)1. ประเภทเงินอุดหนนุ โครงการวจิ ัย  โครงการวจิ ัยพืน้ ฐาน  โครงการวจิ ยั ประยุกต์  โครงการวิจัยและพฒั นา2. ผลผลิตงานวจิ ัย  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพ่อื สรา้ งองค์ความรู้  ผลผลติ ผลงานวิจยั เพอ่ื ถา่ ยทอดเทคโนโลยี3. รายชื่อผู้วิจัย 3.1 หวั หนา้ โครงการวจิ ยั นายวรเชษฐ์ ขอบใจ 3.2 ผรู้ ่วมวจิ ยั นางสาวภัทรานชุ เอกวโรภาส นางสาวเขมจริ า จามกม นางสาวณกันต์วลัย วศิ ิฎศรี4. ไดร้ บั จัดสรรงบประมาณ  งบประมาณรายจ่ายประจาปี 2560  งบประมาณเงนิ รายไดป้ ระจาปี 2560 เปน็ เงนิ จานวน 500,000 บาท ( ห้าแสนบาทถว้ น )5. เริม่ ทาการวิจัยเม่ือ ตลุ าคม 2559 ถงึ กนั ยายน 2560 รวมระยะเวลาโครงการ 1 ปี6. รายละเอียดเกี่ยวกับผลงานความก้าวหน้าของการวิจัย 6.1 วัตถุประสงคข์ องโครงการ 1. ศึกษาฤทธ์ิต้านเชอ้ื แบคทเี รยี และเชื้อราของสารสกัดบัวหลวง 2. ศกึ ษาฤทธิ์ต้านการทางานของเอนไซม์โคลีนเอสเทอเรสของสารสกัดบวั หลวง 3. ศกึ ษาฤทธ์ิตา้ นการทางานของเอนไซม์ไทโรซเิ นสของสารสกัดบัวหลวง 4. ศึกษาฤทธิ์ต้านการอักเสบของสารสกัดบวั หลวง 5. ศกึ ษาฤทธิค์ วามเป็นพิษต่อเซลลข์ องสารสกดั บัวหลวง 6.2 การดาเนินงานวจิ ัยตามท่ีเสนอไวใ้ นโครงการวจิ ัยกบั งานวจิ ยั ที่ไดด้ าเนนิ การไปแล้ว การดาเนินงาน 2559 2560 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.สารวจข้อมลู การเก็บตวั อยา่ งบัวการเตรียมอปุ กรณแ์ ละสารเคมีการเตรียมสารสกดั บวั หลวงทดสอบฤทธสิ์ ารสกดั ทางห้องปฏบิ ตั ิการรวบรวมข้อมลู วิเคราะห์และสรุปผลวิจยันาเสนอผลการวจิ ยั ในการประชุมวชิ าการระดับชาติหรือตีพมิ พ์บทความวจิ ัยในวารสารระดับชาติหรือนานาชาติ

~ 27 ~การดาเนินงาน 2559 2560 ก.ย. ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค.จัดทารายงานฉบับสมบรู ณ์และสง่รายงานฉบับสมบรู ณ์หมายเหตุ : แผน ผล6.3 ผลของการดาเนนิ การวิจัยท่ีไดด้ าเนินการไปแล้ว คิดเป็นร้อยละ 100 ของโครงการ ได้แก่ ขณะน้ีได้ดาเนินการวิจัยในข้ันตอนการเตรียมสารสกัดบัวหลวงสามสายพันธุ์ ได้แก่ สัตตบงกช,สัตตบุษย์ และบุณฑริกเรียบร้อยแลว้ ทดสอบฤทธิ์ทางชวี ภาพเบ้ืองต้น ได้แก่ Total phenolic content และDPPH scavenging assay ศกึ ษาฤทธข์ิ องสารสกัดบวั หลวงต่อการทางานของเอนไซมไ์ ทโรซิเนส, อะซิทิลโคลนีเอสเทอเรส, เช้ือจุลชีพ และทดสอบฤทธติ์ ้านการอักเสบความเปน็ พษิ ต่อเซลลข์ องสารสกัดเรยี บร้อยแล้ว ผลดังแสดงในตารางท่ี 1 และ รูปท่ี 1-8 ซ่ึงอยู่ระหว่างการดาเนินเบิกเงินงบประมาณงวดท่ี 2 และส่งรายงานฉบับสมบรู ณ์ต่อไป แสดงรายละเอยี ดของผลการดาเนินงาน พรอ้ มสรปุ และวเิ คราะห์ผลท่ีได้ดาเนินการไปแล้ว [ท้งั น้ี ให้แนบบทความ ผลงานความก้าวหน้าทางวิชาการของแผนงานวิจัย/โครงการวิจัยระหว่างท่ีทาการวิจัยท่ีเคยพิมพ์ในวารสารทางวชิ าการแลว้ หรือบทความที่จะนาไปเผยแพรท่ างสือ่ มวลชนได้ (ถา้ มี)] จากผลการดาเนินงานการศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดบัวหลวงด้วยเอทานอล พบว่าที่ความเข้มข้นต่างกันของสารสกัดมีแนวโน้มที่มีฤทธ์ิช่วยต้านอนุมูลอิสระและการทางานของเอนไซม์ได้ แสดงดังตารางท่ี 1แสดงผลการศึกษาฟีนอลกิ รวม ฤทธต์ิ า้ นอนมุ ลู อิสระ และฤทธไ์ิ ทโรซิเนสการศึกษาฟีนอลกิ รวม ฤทธ์ติ า้ นอนมุ ลู อสิ ระ และฤทธไ์ิ ทโรซิเนส

~ 28 ~การศึกษาปรมิ าณฟีนอลกิ รวมของสารสกัดบัวการศึกษาฤทธติ์ ้านอนมุ ลู อิสระของสารสกดั บัว 7

~ 29 ~การศึกษาฤทธ์ติ ้านเอนไซมไ์ ทโรซิเนส Figure 3. Tyrosinase inhibition of different parts of Nelumbo nucifera Gaertn.การศกึ ษาฤทธิต์ า้ นการทางานของเอนไซม์อะซทิ ิลโคลนี เอสเทอเรส% Inhibition AChE inhibition Leaf Stem 50 Flow er 40 30 20 10 0 RP AP HL Parts of LotusFigure 4. Acetylcholinesterase inhibition of different parts of Nelumbo nucifera Gaertn.

~ 30 ~การศกึ ษาฤทธ์ติ ้านเชอ้ื จุลชีพ Figure 5. Antimicrobial activities of different parts of Nelumbo nucifera Gaertn.Cell viability (%)ทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ HEF 350 Control 300 Vehicle 250 RP-leaf 200 RP-stem RP-flower 150 AP-leaf 100 AP-stem 50 AP-flower 0 HL-leaf HL-stem รปู ท่ี 6 ร้อยละการมีชีวิตรอดของเซลล์ HEF

~ 31 ~ Cell viability (%) SH-SY5Y 200 Control Vehicle 150 RP-leaf RP-stem 100 RP-flower AP-leaf 50 AP-stem AP-flower 0 HL-leaf HL-stem รูปที่ 7 ร้อยละการมีชวี ติ รอดของเซลล์ SH-SY5Y Cell viability (%) RAW264.7 150 Control Vehicle RP-leaf 100 RP-stem RP-flower AP-leaf 50 AP-stem AP-flower 0 HL-leaf HL-stem รูปที่ 8 ร้อยละการมชี วี ิตรอดของเซลล์ RAW264.76.4งบประมาณท่ีได้จา่ ยไปแล้ว แยกตามหมวดรายจา่ ย (สารวจถึง 30 กันยายน 2560)1. งบประมาณรวมโครงการ 0 500,000 บาท2. งบประมาณทใ่ี ชไ้ ป 0 290,801.21 บาท 268,301.20 บาท 2.1 งบบุคลากร 22,500 209,198.70 บาท 2.2 งบดาเนนิ การ บาท บาท • ค่าวสั ดอุ ปุ กรณ์ บาท 2.3 คา่ สาธารณูปโภค 5%3. งบประมาณคงเหลือ6.5 งานทจ่ี ะทาตอ่ ไปและกาหนดเวลาดาเนนิ การการดาเนนิ งาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.1. ส่งเลม่ รายงานฉบับสมบูรณ์งานวิจยั6.6 คาช้ีแจงเพม่ิ เติม

~ 32 ~ เน่ืองจากเพิ่งได้รับเงินงบประมาณงวดที่ 2 จึงอยู่ระหว่างการเคลยี ร์เอกสารการเงินงวดที่ 2 จะส่งเล่มรายงานวิจัยฉบับสมบูรณ์ต่อไป จึงขออนุมัติขยายเวลาดาเนินการออกไปอีก 6 เดือน จนถึงวันที่ 31 มีนาคมพ.ศ. 2561 นายวรเชษฐ์ ขอบใจ (หัวหนา้ โครงการ)

~ 33 ~3. ชอ่ื โครงการวิจัย: การศกึ ษาองค์ประกอบทางโภชนาการและการใช้ประโยชน์ทางยาจากขา้ วพนั ธุ์ พนื้ เมืองในจังหวดั ปทุมธานี The studies of nutritional composition and using medical utilization from the native varieties of rice in Pathum Thani province รายงานความกา้ วหน้าของโครงการวจิ ยั1. ประเภทเงนิ อดุ หนุนโครงการวิจยั โครงการวิจยั พืน้ ฐาน  โครงการวิจัยประยกุ ต์  โครงการวจิ ัยและพฒั นา2. ผลผลติ งานวจิ ยั ผลผลติ ผลงานวจิ ัยเพ่ือสร้างองคค์ วามรู้  ผลผลติ ผลงานวจิ ัยเพ่ือถ่ายทอดเทคโนโลยี3. รายชอื่ ผวู้ จิ ัย3.1 หวั หนา้ โครงการวจิ ยั ผศ. ดร. อนิ ทริ า ลจิ นั ทรพ์ ร3.2 ผู้ร่วมวจิ ัย ผศ. ดร. นนั ทช์ นก นันทะไชย3.3 ผรู้ ว่ มวิจัย ผศ. ดร. ปาลดิ า ตั้งอนรุ ตั น์3.4 ผรู้ ว่ มวิจัย ผศ. อญั ชลนิ ทร์ สิงห์คา3.5 ผรู้ ว่ มวิจยั ดร. นวพร ลาภสง่ ผล3.6 ผู้รว่ มวจิ ยั ผศ. ดร.อัญชลี สวาสด์ิธรรม3.7 ผรู้ ่วมวิจัย ผศ.ดร. รัชตา ทนวทิ วู ตั ร3.8 ผู้ร่วมวจิ ัย นายทองมี เหมาะสม4. ไดร้ ับจัดสรรงบประมาณ งบประมาณรายจา่ ยประจาปี 2560  งบประมาณเงินรายได้ประจาปี 2560เป็นเงนิ จานวน……855,000………………บาท (แปดแสนหา้ หมืน่ หา้ พันบาทถว้ น)5. เร่ิมทาการวจิ ัยเม่ือ 1 ตุลาคม 2559 ถงึ 30 กันยายน 2560…..รวมระยะเวลาโครงการ……1…... ปี6. รายละเอียดเกยี่ วกบั ผลงานความกา้ วหนา้ ของการวจิ ัย6.1 วัตถุประสงคข์ องโครงการ 1. เพอื่ สนองพระราชดารใิ นโครงการ อพ.สธ. 2. เพ่ือศึกษาองค์ประกอบทางโภชนาการของข้าวพนั ธ์พุ ้นื เมืองในจังหวดั ปทุมธานี 3. เพื่อศกึ ษาการใช้ประโยชนท์ างยาของข้าวพนั ธ์ุพน้ื เมืองในจังหวดั ปทมุ ธานี6.2 การดาเนนิ งานวิจยั ตามที่เสนอไวใ้ นโครงการวจิ ัยกบั งานวจิ ัยทีไ่ ด้ดาเนินการไปแล้วการดาเนินงาน 2559 2560 ก.ย. ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค.เตรียมอปุ กรณแ์ ละสารเคมีเพาะพันธ์ุข้าวเพอื่ เพ่มิ ปรมิ าณวิเคราะห์คณุ คา่ ทางโภชนาการและประโยชนท์ างยาของขา้ วพนั ธ์ุพื้นเมอื ง จานวน 20 สายพนั ธ์ุเขยี นรายงานและสรปุ ผลเขยี นรายงานฉบับสมบรู ณ์หมายเหตุ : แผน ผล

~ 34 ~6.3 ผลของการดาเนินการวิจัยท่ีได้ดาเนินการไปแล้ว คิดเป็นร้อยละ.........40.....ของโครงการได้แก่1. เตรยี มอปุ กรณ์และสารเคมี2. เพาะพันธุ์ขา้ วเพื่อเพมิ่ ปริมาณ6.4 งบประมาณท่ไี ด้จา่ ยไปแลว้ แยกตามหมวดรายจ่าย (สารวจถงึ 30 กันยายน 2560)4 งบประมาณรวมโครงการ 855,000.00 บาท2. งบประมาณท่ใี ชไ้ ป 417,830.36 บาท2.1 งบบุคลากร 115,500 บาท• คา่ ตอบแทนนักวิจยั 0 บาท• ค่าตอบแทนผู้ช่วยนกั วิจยั 115,500 บาท2.2 งบดาเนินการ 273,755.36 บาท• คา่ จา้ งคนงานดแู ลพืช 49,000 บาท• คา่ วัสดุอปุ กรณ์ 224,755.36 บาท2.3 งบลงทนุ (ถา้ มี) 0 บาท2.4 คา่ สาธารณปู โภค 5% 28,575 บาท3. งบประมาณคงเหลือ 437,169.64 บาท6.5 งานทจ่ี ะทาตอ่ ไปและกาหนดเวลาดาเนินการการดาเนินงาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. ม.ิ ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.เพาะพนั ธข์ุ า้ วเพอ่ื เพ่มิ ปรมิ าณวิเคราะหค์ ณุ คา่ ทางโภชนาการและประโยชน์ทางยาของขา้ วพันธุพ์ ืน้ เมอื งจานวน 20 สายพนั ธุ์เขียนรายงานและสรุปผลเขยี นรายงานฉบบั สมบรู ณ์6.6 คาช้ีแจงเพิ่มเติมเนือ่ งจากไดด้ าเนนิ การขอเมล็ดพนั ธ์จุ ากศนู ย์ข้าวปทุม โดยไดร้ ับเมล็ดพนั ธ์ุข้าวมาทงั้ หมด 67 สายพนั ธ์ุ แต่ละสายพันธ์ุไดร้ บั ประมาณ 5 กรัม จึงไม่พอสาหรับวิเคราะห์คุณค่าทางโภชนาการและทางเคมี จงึ ต้องดาเนินการปลกู ข้าวเพ่ือเพิ่มปรมิ าณใหไ้ ด้ประมาณ 1 กโิ ลกรมั ในแต่ละสายพันธเ์ุ พ่ือใช้ในการวิเคราะห์ และในระหวา่ งการปลูกมีแมลงและหนมู ากัดกนิ ต้นขา้ ว และจากสภาพดนิ ฟ้าอากาศท่ีไมเ่ หมาะสมต่อเมลด็ พันธขุ์ ้าวบางสายพันธุ์ ทาใหบ้ างสายพนั ธ์ไุ มง่ อก จึงทาให้งานวจิ ัยนไี้ ม่สามารถดาเนินการได้ตามแผนทีต่ ้ังไว้ และเพื่อใหบ้ รรลุวตั ถุประสงค์และการดาเนนิ งานเปน็ ไปด้วยความเรียบรอ้ ย จึงไดด้ าเนินการขยายเวลางานวจิ ัยนี้ออกไปอกี 1 ปี ผศ.ดร. อินทิรา ลิจนั ทร์พร (หวั หนา้ โครงการ)

~ 35 ~4. ชือ่ โครงการวิจัย: เครื่องป๊ัมตดั ใบบัวสาหรบั ผลติ ชาใบบัว Die cut for Lotus Leaf Tea Processes1. ประเภทเงนิ อดุ หนนุ โครงการวจิ ัย  โครงการวิจัยพ้ืนฐาน  โครงการวจิ ยั ประยกุ ต์  โครงการวิจัยและพัฒนา2. ผลผลติ งานวจิ ยั ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพือ่ สรา้ งองคค์ วามรู้  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพื่อถ่ายทอดเทคโนโลยี3. รายชื่อผวู้ ิจัย3.1 หัวหน้าโครงการวิจัย ผศ.ดร วรินธร พูลศรี3.2 ผรู้ ว่ มวิจัย ผศ.ดร. เกยี รติศักดิ์ แสงประดษิ ฐ์3.3 ผรู้ ่วมวิจยั ผศ. ภรู ินทร์ อัครกุลธร4. ได้รับจดั สรรงบประมาณ  งบประมาณรายจ่ายประจาปี 2560  งบประมาณเงินรายไดป้ ระจาปี 2560เป็นเงินจานวน……300,000………………บาท (สามแสนบาทถว้ น)5. เรม่ิ ทาการวิจัยเมื่อ 1 ตลุ าคม 2559 ถงึ 30 กนั ยายน 2560…..รวมระยะเวลาโครงการ……1…... ปี6. รายละเอียดเกี่ยวกบั ผลงานความก้าวหนา้ ของการวิจัย6.1 วตั ถุประสงค์ของโครงการ1. ออกแบบและสร้างเครอื่ งปั๊มใบบัว เพ่ือให้มีขนาดท่ีเหมาะสมเพื่อนาไปแปรรูปทาผลติ ภณั ฑ์ จากใบบัว2. ออกแบบและสรา้ งชดุ ควบคุมรวมเครื่องจักรเพื่อให้สามารถใชง้ านได้อย่างแม่นยา3. นาเคร่ืองปั๊มใบบัว ทาการอบรมและสาธิตการใช้งาน พร้อมท้ังให้ความรู้เกี่ยวกับการนา เทคโนโลยีเคร่ืองจักรกลเกษตรสมัยใหม่ เพ่ือช่วยเหลือเกษตรกรที่ปลูกบัวให้สามารถต่อ ยอดผลิตภัณฑ์จากบัวได้6.2 การดาเนนิ งานวจิ ัยตามท่เี สนอไวใ้ นโครงการวจิ ัยกบั งานวจิ ัยที่ได้ดาเนินการไปแลว้ งาน/ขน้ั ตอนการวจิ ยั ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-ม.ี ค. เดือน/พ.ศ. 2559 - 2560 เม.ย.-มิ.ย. ก.ค.-ก.ย. ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค. เม.ย.-ม.ิ ย. ก.ค.-ก.ย.การออกแบบและสร้างชุด การสร้างชดุ แม่พมิ พต์ ัวเมียการออกแบบและสร้างชุดการสรา้ งชุดลาเลยี งผลติ ภณั ฑ์หลงั จากการตดัการออกแบบและสร้างชุดการสรา้ งชดุ ลาเลยี งบัวก่อนเข้าแท่นพมิ พ์6.3 ผลของการดาเนนิ การวจิ ัยท่ไี ด้ดาเนินการไปแล้ว คดิ เป็นรอ้ ยละ 70 ของโครงการ ไดแ้ ก่ท่ี แผน การดาเนนิ การจริง1 สรปุ ผลงานวจิ ัย การออกแบบและสร้างชดุ การสร้างชดุ ลาเลยี งบวั กอ่ นเขา้ แทน่ พมิ พ์

~ 36 ~ รปู ท่ี 11 เครอื่ งปั๊มตดั ใบบัวดาเนินการเรียบร้อย คงเหลอื การสรา้ งชุดลาเลยี งบวั ก่อนเข้าแทน่ พิมพ์ และทาการทดสอบ 6.4 งบประมาณท่ไี ด้จ่ายไปแล้ว แยกตามหมวดรายจา่ ย (สารวจถงึ 30 กันยายน 2560) 1. งบประมาณรวมโครงการ 300,000 บาท 203,500 บาท 2. งบประมาณท่ใี ชไ้ ป บาท 2.1 งบดาเนินการ บาท • การออกแบบและสรา้ งชุดการสรา้ งชดุ ลาเลียง 105,000 บาท ผลิตภณั ฑ์หลกั จากการตัด บาท • การออกแบบและสรา้ งชดุ การสร้างชดุ ลาเลยี งบัว 60,000 บาท กอ่ นเขา้ แท่นพมิ พ์ 96,500 บาท • การออกแบบและสร้างชุดเตรียมบัว 25,000 2.2 ค่าสาธารณูปโภค 5% 13,500 3. งบประมาณคงเหลือ 6.5 งานที่จะทาต่อไปและกาหนดเวลาดาเนินการ งาน/ขน้ั ตอนการวจิ ยั ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-ม.ี ค. เม.ย.-ม.ิ ย. เดือน/พ.ศ. 2560 - 2561 เม.ย.-มิ.ย. ก.ค.-ก.ย. ก.ค.-ก.ย. ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค.การออกแบบและสรา้ งชดุ การสรา้ งชดุ ลาเลยี งบวั ก่อนเข้าแท่นพมิ พ์ทดสอบเครอ่ื ง บนั ทกึ ผลและวเิ คราะหผ์ ลสรุปผล 6.6 คาชี้แจงเพิม่ เติม – ผศ. ดร. วรนิ ธร พูลศรี หวั หน้าโครงการวจิ ยั

~ 37 ~5. ชอื่ โครงการวจิ ัย: การออกแบบและสรา้ งเครื่องสไลดเ์ หงา้ บวั Design and construction of the rhizome slice machine1. ประเภทเงนิ อุดหนนุ โครงการวิจยั โครงการวิจยั พน้ื ฐาน  โครงการวิจยั ประยุกต์  โครงการวจิ ยั และพัฒนา2. ผลผลิตงานวจิ ยั ผลผลติ ผลงานวิจยั เพอื่ สร้างองค์ความรู้  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพือ่ ถ่ายทอดเทคโนโลยี3. รายชือ่ ผวู้ จิ ัยหัวหน้าโครงการวิจยั นายมานพ แยม้ แฟงผรู้ ว่ มวิจัย ผู้ชว่ ยศาสตราจารย์ ภรู ินทร์ อัครกุลธร4. ได้รับจัดสรรงบประมาณ งบประมาณรายจา่ ยประจาปี 2560  งบประมาณเงินรายไดป้ ระจาปี 2560เปน็ เงินจานวน 240,000 บาท (…สองแสนสี่หมนื่ บาทถ้วน..)5. เร่ิมทาการวจิ ัยเม่ือ…1 ตลุ าคม พ.ศ. 2559 ถึง 30 กันยายน พ.ศ. 2560 รวมระยะเวลาโครงการ 1 ปี6. รายละเอียดเกย่ี วกับผลงานความก้าวหนา้ ของการวิจัย6.1 วัตถปุ ระสงคข์ องโครงการ 1. เพื่อออกแบบและสรา้ งเคร่ืองสไลด์เหง้าบวั 2. ทดสอบสมรรถนะเครื่องสไลด์เหง้าบวั 3. นาเครื่องสไลด์เหง้าบัว ทาการอบรมและสาธิตการใช้งาน พร้อมทั้งให้ความรู้เก่ียวกับการ นาเทคโนโลยีเคร่ืองจักรกลเกษตรสมัยใหม่ เพื่อช่วยเหลือเกษตรกรท่ีปลูกบัวให้สามารถ ต่อยอดผลิตภัณฑแ์ ละแปรรูปจากบวั ได้6.2 การดาเนนิ งานวิจัยตามที่เสนอไวใ้ นโครงการวิจยั กบั งานวจิ ัยทไี่ ดด้ าเนินการไปแลว้การดาเนนิ งาน 2559 2560 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.1. ศึกษาข้อมูลและรวบรวมงานวจิ ัยเพื่อนามาใช้ในการออกแบบและสร้างเครอ่ื ง2. ออกแบบและสร้างเครือ่ งสไลด์เหงา้ บวั รวมถงึ การปรับปรงุ แก้ไขเครื่อง3. ทดสอบสมรรถนะและเก็บผลการทดลองของเครอ่ื งทส่ี ร้าง4. วิเคราะห์และสรุปผล5. ถ่ายทอดเทคโนโลยสี ู่เกษตรกรและผทู้ ่สี นใจหมายเหตุ : แผน ผล

~ 38 ~6.3 ผลของการดาเนนิ การวจิ ัยท่ีได้ดาเนนิ การไปแล้ว คดิ เปน็ ร้อยละ 70 ของโครงการ ไดแ้ ก่ 1. ศึกษาข้อมูลและรวบรวมงานวจิ ยั เพ่อื นามาใชใ้ นการออกแบบและสร้างเคร่ือง 2. ออกแบบและสรา้ งเคร่ืองสไลดเ์ หงา้ บัวรวมถึงการปรบั ปรุงแก้ไขเครื่อง6.4 งบประมาณทีไ่ ดจ้ า่ ยไปแล้ว แยกตามหมวดรายจา่ ย (สารวจถงึ 30 กันยายน 2560)3. งบประมาณรวมโครงการ 0 240,000 บาท2. งบประมาณที่ใช้ไป 131,000 บาท 116,000 บาท 2.1 งบบคุ ลากร 0 109,000 บาท 2.2 งบดาเนินการ บาท 15,000 บาท • คา่ วสั ดุอุปกรณ์ทใ่ี ช้ในการสร้างเครื่อง บาท 2.3 งบลงทุน (ถา้ ม)ี บาท 2.4 คา่ สาธารณปู โภค 5%3. งบประมาณคงเหลือ6.5 งานทจ่ี ะทาตอ่ ไปและกาหนดเวลาดาเนนิ การการดาเนินงาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.ทดสอบสมรรถนะและเก็บผลการทดลองของเครือ่ งทีส่ รา้ งวเิ คราะห์และสรปุ ผล6.6 คาชี้แจงเพิม่ เติม - นายมานพ แย้มแฟง (หัวหน้าโครงการ)

~ 39 ~6. ชื่อโครงการวิจัย: การวเิ คราะห์หาสารสาคญั ทางยาของพืชน้าในทุ่งหลวงรังสิตและอ่างเก็บน้า พระราม 9 The analysis of pharmacological activities agent from aquatic plants in Thung Luang Rangsit and Phra Ram 9 basin1. ประเภทเงนิ อดุ หนนุ โครงการวิจยั  โครงการวจิ ยั พืน้ ฐาน ☑ โครงการวิจยั ประยกุ ต์  โครงการวจิ ยั และพฒั นา2. ผลผลิตงานวจิ ัย  ผลผลติ ผลงานวจิ ัยเพอื่ สร้างองค์ความรู้ ☑ ผลผลิตผลงานวิจัยเพือ่ ถา่ ยทอดเทคโนโลยี3. รายช่อื ผูว้ ิจัย 3.1 หัวหน้าโครงการวจิ ยั : สพ.ญ. พชรธร สิมก่ิง 3.2 ผรู้ ่วมวิจัย 1. ผศ.น.สพ. การันต์ ชพี นรุ ัตน์ 2. นางสวุ ดี อิสรายวุ พร 3. น.สพ. สนิ สมุทร แซ่โงว้ 4. สพ.ญ.ดร. ปภาภสั สร์ ศรมี หาคุณาวงศ์ 5. นายอมร อศั ววงศานนท์ 6. ผศ.ดร. อญั ชลี สวาสด์ธิ รรม 7. ผศ.องั คนา ธนกญั ญา 8. ผศ.ดร. ปยิ ะวดี เจริญวฒั นะ 9. น.ส. ปิยะภรณ์ จติ รเอก 10. นายทองมี เหมาะสม4. ได้รับจัดสรรงบประมาณ ☑ งบประมาณรายจ่ายประจาปี 2560  งบประมาณเงนิ รายได้ประจาปี 2560 เปน็ เงนิ จานวน 1,200,000 บาท (หนง่ึ ล้านสองแสนบาทถ้วน)5. เริ่มทาการวิจัยเม่ือ 1 ต.ค. 2559 ถึง 31 ก.ย. 2561. รวมระยะเวลาโครงการ 2 ปี (ขอขยายเวลาเป็นเวลา1 ปี)6. รายละเอียดเกย่ี วกบั ผลงานความก้าวหนา้ ของการวิจัย 6.1 วัตถปุ ระสงคข์ องโครงการ 1. เพื่อศึกษาหาคุณสมบัติท่ีสามารถนามาใช้เป็นยาต่อต้านเช้ือแบคทีเรีย,เช้ือรา, คุณสมบัติ anti-oxidation และต่อตา้ นปรสิตภายนอกของสตั ว์ในพนั ธ์ไม้น้าที่อยู่ในทุ่งหลวงรังสิตและอ่างเก็บน้า พระราม 9 2. เพื่อพัฒนาสารสกัดจากพันธ์ุไม้น้าในท้องถ่ินทุ่งหลวงรังสิตและอ่างเก็บน้าพระราม9เพ่ือใช้ เป็นสารต่อต้านแบคทีเรีย, เชื้อรา, anti-oxidation และปรสิตภายนอกสาหรับใชใ้ นสัตว์เล้ียงทดแทน การใชย้ าหรอื สารเคมี 6.2 การดาเนินงานวจิ ยั ตามทีเ่ สนอไว้ในโครงการวิจัยกบั งานวิจัยทไี่ ด้ดาเนนิ การไปแล้ว

~ 40 ~ การดาเนนิ งาน 2559 2560 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.การทบทวนเอกสารวชิ าการที่เกยี่ วขอ้ งต่างๆการออกสารวจพน้ื ท่ที ี่เปน็แหลง่ น้าเพ่ือกาหนดพน้ื ท่แี หล่งน้าศึกษาหมายเหตุ : แผน ผล6.3 ผลของการดาเนินการวจิ ยั ทีไ่ ดด้ าเนินการไปแล้ว คิดเป็นร้อยละ. 30..ของโครงการ ไดแ้ ก่ 1. การรวบรวมตรวจเอกสารวิชาการเก่ียวกับการตรวจหาสารสกัดต่างๆจากพืชน้าที่เคยมี การศึกษาในประเทศไทยหรือต่างประเทศ(แต่เป็นสายพันธุ์พืชน้าที่มีการพบเหมือนใน ประเทศไทย) เพ่ือเตรียมเป็นแนวทางในการเตรียมวธิ ีการศึกษาทดลองที่เหมาะสมและ มีประสิทธิภาพสาหรับการศึกษาทดลองครัง้ น้ี 2. การศึกษาพืน้ ท่ีภาคสนาม (survey) ทงั้ ในส่วนอา่ งเก็บนา้ พระรามเก้าและพ้นื ท่ีคลอง หนอง และบงึ หรือพ้ืนทล่ี ่มุ นา้ ในเขตอาเภอธญั บรุ เี พ่ือกาหนดเป็นพน้ื ท่เี ก็บตัวอยา่ งพชื น้า ทจี่ ะนามาศึกษา ท้งั น้ีได้มีการเตรียมกาหนดจุดพืน้ ที่ศึกษาเปน็ แผนทเ่ี ก็บตัวอยา่ งศึกษา6.4 งบประมาณที่ได้จ่ายไปแล้ว แยกตามหมวดรายจ่าย (สารวจถึง 30 กันยายน 2560) 1. งบประมาณรวมโครงการ 1,200,000 บาท 2. งบประมาณที่ใช้ไป 0 บาท บาท 2.1 งบบุคลากร 0 บาท 2.2 งบดาเนนิ การ 0 บาท 2.3 งบลงทุน (ถ้าม)ี 0 บาท 2.4 คา่ สาธารณูปโภค 5% 0 บาท 3. งบประมาณคงเหลือ 1,200,0006.5 งานท่จี ะทาตอ่ ไปและกาหนดเวลาดาเนินการการดาเนินงาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. ม.ิ ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.กาหนดจดุ พ้นื ทเี่ ก็บตวั อยา่ งศกึ ษาโดยจดั ทาเปน็ แผนทพี่ ิกัดจดุ จดั เกบ็ตัวอยา่ งพชื นา้เก็บตัวอยา่ งพชื น้าพรอ้ มท้งั ระบุสายพนั ธ์ขุ องพืชนา้ ท่ที าการศกึ ษาเพอื่ระบแุ ผนท่คี วามหลากหลายของสายพันธ์พุ ชื น้าในพน้ื ท่ีท่ีทาการศึกษาทาการสกัด crude extract จากพชื น้าสายพันธ์ุต่างๆ

~ 41 ~การดาเนนิ งาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. ม.ิ ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.ทดสอบคณุ สมบตั ิของสารcrude extract ของพืชน้าแตล่ ะสายพนั ธุ์วเิ คราะห์และสรุปผล จากนั้นทาการตีพิมพเ์ ผยแพร่ข้อมลูการศกึ ษา6.6 คาชี้แจงเพมิ่ เติมความล่าช้าในการเก็บตัวอย่างและสารวจพื้นที่เกิดเน่ืองจากก่อนหน้าน้ีในบางพ้ืนที่สภาพภูมิอากาศเกิดความแห้งแล้งไม่สามารถระบุพ้ืนที่ท่ีมีแหล่งน้ามากพอให้พืชน้าเจริญเติบโตได้ อีกท้ังพืชน้าหลายชนิดอยู่ในสภาพไม่เหมาะสมที่จะนามาเพาะขยายพันธ์ุในโรงเรือนได้ทาให้ไม่สามารถได้ปริมาณพืชน้าที่มากพอจะนามาสกัดสารcrude extract ที่จะนามาใช้ในการศึกษาหาคุณสมบัติทางยา อย่างไรก็ตามทางคณะผู้วิจัยไม่ได้น่ิงนอนใจในการเกิดปัญหาดังกล่าวจึงได้ทาการออกสารวจพื้นที่หาพื้นที่ท่ีมีความสามารถเป็นแหล่งน้าอย่างแท้จริงโดยมีน้าขังตลอดท้ังปีและมีพันธ์ุพืชน้าข้ึนอยู่ตลอดอย่างน้อย 1 ชนิดขึ้นไป ซ่ึงในการตรวจสอบพื้นท่ีลักษณะดังกล่าวผู้ทาการวิจัยจะทาการจัดทาเป็นแผนที่ข้อมูลความหลากหลายของพืชพันธุ์ไม้น้าในพ้ืนที่ศึกษาเพื่อประโยชน์ในการศึกษาและการติดตามขอ้ มูลในการทดลองครัง้ ตอ่ ๆไปในอนาคตส่วนปัญหาในการเบิกจ่ายล่าช้าน้ันเกิดจากในระหว่างการดาเนินการในปีแรกของการศึกษา(ปีงบประมาณ 2560) ทางคณะผู้วิจัยได้มีการเปลี่ยนแปลงหัวหน้าโครงการวิจัยทาให้มีความล่าช้าในการจัดทาเอกสารขอเบิกงบประมาณโครงการวิจัย ท้ังนี้การเบิกงบการศึกษางวดแรกคาดว่าจะแล้วเสร็จภายในเดือนพฤศจกิ ายน พ.ศ. 2560 โดยเมอื่ ทาการเบิกจ่ายได้อย่างเสร็จสมบรู ณท์ างคณะผวู้ ิจัยจะเร่งจัดทาการวจิ ัยให้เป็นไปตามกระบวนการและเสร็จสิ้นตามระยะเวลาที่ทาการขออนุมัติขยายระยะเวลาการศึกษาวิจัย(ภายในเดือนกันยายน ปพี .ศ. 2561) สพ.ญ. พชรธร สมิ กงิ่ (หวั หน้าโครงการ)

~ 42 ~7. ชอื่ โครงการวิจัย: บัวหลวงสกัดบาบัดเบาหวานบารุงร่างกาย Nelumbo nucifera Gaertn. extract for diabetes remedies and supplemented for health1. ประเภทเงินอดุ หนนุ โครงการวจิ ัย  โครงการวิจัยพื้นฐาน  โครงการวิจยั ประยุกต์  โครงการวจิ ยั และพฒั นา2. ผลผลติ งานวิจยั  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพ่ือสร้างองคค์ วามรู้  ผลผลิตผลงานวิจัยเพอ่ื ถา่ ยทอดเทคโนโลยี3. รายชอ่ื ผวู้ จิ ัย 3.1 หัวหน้าโครงการวิจยั ผชู้ ว่ ยศาสตราจารย์ ดร. นพรัตน์ พทุ ธกาล 3.2 ผรู้ ว่ มวจิ ัย ดร.เสาวณยี ์ บวั โทน ดร.ณัฐต์ณิชา สุขเกษม ดร.ปิยะภรณ์ รัตนนิลสรวง ผศ.ภรู ินทร์ อัครกลุ ธร4. ไดร้ ับจดั สรรงบประมาณ  งบประมาณรายจ่ายประจาปี 2560  งบประมาณเงนิ รายได้ประจาปี 2560 เปน็ เงินจานวน 360,800บาท (สามแสนหกหมื่นแปดรอ้ ยบาทถ้วน)5. เริม่ ทาการวจิ ัยเมอื่ 1 ตลุ าคม 2559 ถึง 30 กนั ยายน 2560 รวมระยะเวลาโครงการ…1... ปี (ขยายเวลาอีก 1ปี) ตั้งแต่ วันท่ี 1 ตลุ าคม 2560 ถึง วนั ที่ 30 กันยายน 25616. รายละเอียดเก่ียวกบั ผลงานความก้าวหน้าของการวิจัย 6.1 วัตถุประสงคข์ องโครงการ 1. ทดสอบฤทธ์ิของสารสกัดดอกบัวหลวงต่อระดับน้าตาลกลโู คสในเลือดหนูขาว 2. ทดสอบความเป็นพิษของสารสกดั ดอกบัวหลวงตอ่ หนูขาว 3. ทดสอบประสทิ ธิภาพของสารสกดั ตอ่ การทาหนา้ ทขี่ องเม็ดเลอื ดขาว 4. เพอ่ื เป็นแนวทางในการพัฒนาบวั หลวงสกัดเปน็ สมุนไพรในการบาบดั โรคเบาหวานและบารงุ ร่างกาย 6.2 การดาเนนิ งานวจิ ัยตามทเี่ สนอไว้ในโครงการวจิ ัยกับงานวจิ ยั ทไ่ี ด้ดาเนนิ การไปแลว้การดาเนนิ งาน 2559 2560 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.1. เตรยี มวสั ดุ อุปกรณก์ ารทดลอง /คน้ คว้าวารสารที่เกยี่ วขอ้ ง/2. ศกึ ษาทดลองถงึ ความเปน็ ไปไดใ้ นระยะแรก3. การสกัดสารจากดอกบวัหลวง

~ 43 ~การดาเนินงาน 2559 2560 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.4. การชักนาใหห้ นูขาวเกดิภาวะน้าตาลในเลือดสงู และทดสอบฤทธ์ิของสารสกดั ในการลดระดับนา้ ตาลในเลอื ด5. การวิเคราะหห์ าองค์ประกอบทางเคมขี องสารสกัดดอกบัวหลวง6. ทดสอบความเปน็ พษิ ของสารสกัดดอกบัวหลวงตอ่ หนูขาว (ก่อนทาผลิตภณั ฑ์)7. การทดสอบฤทธิ์ประสทิ ธภิ าพของสารสกัดตอ่การทาหนา้ ที่ของเมด็ เลอื ดขาว8. สรุปผลการทดลอง และวิเคราะห์ข้อมูล9. จัดทารูปเล่มรายงาน10. นาเสนอผลงานทางวชิ าการหมายเหตุ : แผน ผล6.3 ผลของการดาเนนิ การวิจยั ทไ่ี ดด้ าเนินการไปแล้ว คดิ เป็นรอ้ ยละ......80......ของโครงการ ได้แก่ 1. การสกดั สารจากดอกบัวหลวงและวิเคราะห์หาองค์ประกอบทางเคมีของสารสกดั บวั หลวง 2. ทดสอบความเป็นพิษของสารสกดั ดอกบวั หลวงต่อหนูขาว (กอ่ นทาผลติ ภัณฑ์) 3. การทดสอบฤทธข์ิ องสารสกดั ในการลดระดับนา้ ตาลในเลอื ด6.4 งบประมาณท่ไี ดจ้ ่ายไปแลว้ แยกตามหมวดรายจ่าย (สารวจถึง 30 กนั ยายน 2560)1. งบประมาณรวมโครงการ 0 360,800 บาท2. งบประมาณทใ่ี ชไ้ ป 305,484 321,720 บาท 2.1 งบบุคลากร 3,000 บาท 2.2 งบดาเนินการ บาท 16,236 บาท • ค่าจา้ งพิมพ์เอกสาร บาท 2.3 งบลงทนุ (ถา้ ม)ี บาท 2.4 ค่าสาธารณปู โภค 5% 36,080 บาท3. งบประมาณคงเหลือ

~ 44 ~6.5 งานทจี่ ะทาตอ่ ไปและกาหนดเวลาดาเนินการการดาเนินงาน 2560 2561 ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. มี.ค. เม.ย. พ.ค. ม.ิ ย. ก.ค. ส.ค. ก.ย.1. การทดสอบฤทธ์ิประสทิ ธภิ าพของสารสกดั ต่อการทาหน้าทีข่ องเม็ดเลือดขาว2. สรปุ ผลการทดลอง และวเิ คราะหข์ ้อมลู3. จดั ทารูปเล่มรายงาน4. นาเสนอผลงานทางวชิ าการ 6.6 คาชแ้ี จงเพิม่ เติมขณะน้ีอยู่ระหวา่ งการวิเคราะหข์ ้อมลู ในของการทดสอบฤทธข์ิ องสารสกดั ต่อการทาหน้าทขี่ องเมด็ เลือดขาว และส่วนของรายงาน การจัดทารูปเล่ม การเผยแพรผ่ ลงาน ผศ.ดร.นพรตั น์ พุทธกาล (หัวหนา้ โครงการ)

~ 45 ~8. ชือ่ โครงการวจิ ัย: เครอ่ื งอบแห้งผลิตภัณฑ์จากบัว A mechanical rotary tea dryer for Lotus product1. ประเภทเงนิ อดุ หนนุ โครงการวิจยั  โครงการวจิ ยั พน้ื ฐาน  โครงการวจิ ยั ประยุกต์  โครงการวิจยั และพฒั นา2. ผลผลิตงานวิจยั  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพอื่ สร้างองค์ความรู้  ผลผลิตผลงานวจิ ยั เพือ่ ถ่ายทอดเทคโนโลยี3. รายช่อื ผู้วิจัย 3.1 หวั หน้าโครงการวิจยั ผศ.ดร วรนิ ธร พูลศรี 3.2 ผรู้ ว่ มวจิ ัย ผศ.ดร. เกยี รตศิ ักดิ์ แสงประดิษฐ์ ผศ. ภูรินทร์ อคั รกลุ ธร4. ได้รบั จัดสรรงบประมาณ  เงนิ แผน่ ดนิ  เงินรายได้ ประจาปี 2560 เปน็ เงินจานวน ...600,000.......-บาท (......หกแสนบาทถว้ น....................)5. เร่ิมทาการวิจัยเม่ือ.... 1 ตลุ าคม 2559.... ถงึ 30 กนั ยายน 2560.......รวมระยะเวลาโครงการ 1 ปี6. รายละเอียดเกยี่ วกบั ผลงานความก้าวหนา้ ของการวิจัย 6.1 วตั ถุประสงคข์ องโครงการ 1. การออกแบบและพฒั นาเครื่องอบแห้งขนาดเลก็ เพอื่ ใช้ในนิคมอุตสาหกรรมขนาดเล็ก และขนาดกลางโดยมีกาลงั ผลิตสงู สดุ 100 กโิ ลกรัมต่อวนั (ผลผลิตทแี่ ห้งแลว้ ) 2. ควบคมุ ระบบทาความร้อนและการใช้พลังงานเพ่ือใหใ้ ช้พลังงานทตี่ า่ และได้ประสิทธิภาพ สูงควบคุมฟังก์ชนั่ ของระบบการหมนุ และเวลาเพ่ือคุณภาพของผลติ ภัณฑ์ 3. ออกแบบและพฒั นาเครอื่ งลดความช้นื หลังการอบ เพ่อื ใหไ้ ด้ผลิตภัณฑ์ท่แี ห้งและมี คณุ ภาพ 6.2 การดาเนนิ งานวิจัยตามท่เี สนอไว้ในโครงการวจิ ัยกบั งานวจิ ยั ท่ีได้ดาเนนิ การไปแล้วงาน/ขั้นตอนการวิจัย เดือน/พ.ศ. 2559-2560 ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค. เม.ย.-ม.ิ ย. ก.ค.-ก.ย. ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค. เม.ย.-มิ.ย. ก.ค.-ก.ย.1.การออกแบบและสร้างชุดอบแหง้2.การออกแบบและสร้างชุดลดความช้ืนหลังการอบแหง้3.การออกแบบและสร้างชดุ ส่งกาลงั เครอื่ งอบแห้งการดาเนินงานวจิ ยั ตามที่เสนอไวใ้ นโครงการวจิ ยั กับงานวจิ ยั ที่ได้ดาเนินการไปแลว้ (ดงั ตาราง)ลาดับที่ แผน การดาเนินการจริง1 สรปุ ผลงานวจิ ยั ทดสอบเคร่อื งอบแหง้ บนั ทกึ ผล และวิเคราะห์ผลการทดลอง

~ 46 ~ รูปท่ี12 เคร่ืองอบแหง้ พรอ้ มทาการทดสอบ 6.3 ผลของการดาเนินการวจิ ยั ท่ีได้ดาเนนิ การไปแล้ว คดิ เป็นร้อยละ 90 ของโครงการ ไดแ้ ก่ ขณะนี้ได้ดาเนนิ โครงการดงั กลา่ วไปถึงขั้นตอน ทดสอบเคร่ืองอบแห้ง บนั ทึกผล และวเิ คราะหผ์ ลการทดลอง คงเหลอื อีกสรุปผลการวจิ ยั แตเ่ น่ืองจากมเี หตจุ าเป็นคือ ได้รบั งบประมาณลา่ ช้าทาใหข้ ้นั ตอนดาเนนิ งานต้องเลือ่ นออกไป 6.4 งบประมาณทไี่ ด้จา่ ยไปแล้ว แยกตามหมวดรายจา่ ย (สารวจถงึ 30 กันยายน 2560)1. งบประมาณรวมโครงการ 0 600,000 บาท2. งบประมาณท่ีใชไ้ ป 537,000 บาท 300,000 2.1 งบบุคลากร 100,000 บาท 2.2 งบดาเนินการ บาท 110,000 บาท • คา่ วสั ดุและจา้ เหมาออกแบบโครงสร้างชุดอบแหง้ 0 บาท • คา่ วสั ดุจา้ งเหมาออกแบบโครงสรา้ งชดุ ลดความช้ืน 27,000 บาท หลงั การอบ บาท • คา่ วสั ดแุ ละจ้างเหมาออกแบบโครงสร้างชุดส่งกาลงั บาท 2.3 งบลงทุน (ถ้ามี) 63,000 บาท 2.4 ค่าสาธารณปู โภค 5%3. งบประมาณคงเหลือ6.5 งานที่จะทาต่อไปและกาหนดเวลาดาเนินการ งาน/ขัน้ ตอนการวจิ ัย ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค. เดือน/พ.ศ. 2560-2561 เม.ย.-มิ.ย. ก.ค.-ก.ย. ทดสอบเครื่อง บนั ทกึ ผลและ เม.ย.-มิ.ย. ก.ค.-ก.ย. ต.ค.-ธ.ค. ม.ค.-มี.ค. วิเคราะหผ์ ล สรุปผล ผศ. ดร. วรนิ ธร พลู ศรี หัวหน้าโครงการวจิ ยั6.6 คาชี้แจงเพิ่มเติม -

~ 47 ~ 9. ชอ่ื โครงการวจิ ัย : การศึกษาอณชุ ีวโมเลกุลของเชอื้ ราเอนโดไฟตท์ ีส่ รา้ งสารทุตยิ ภมู ิจากบัวพนั ธ์ุ ม่าเหม่ียวตอ่ เชื้อแบคทเี รยี แกรมลบทกี่ ่อโรคปรทิ ันต์และแบคทีเรียดอ้ื ยา ปฏิชีวนะ Molecular Analysis of Endophytic Fungi Producing-Bioactive Compounds Isolated from Bua Ma Maow Against Gram-Negative Bacteria Causing Periodontal Disease and Resistance Antibiotics Bacteria1. ประเภทเงินอุดหนนุ โครงการวิจยั  โครงการวิจัยพืน้ ฐาน  โครงการวิจัยประยุกต์  โครงการวิจัยและพฒั นา2. ผลผลติ งานวจิ ยั  ผลผลิตผลงานวจิ ัยเพื่อสรา้ งองคค์ วามรู้  ผลผลติ ผลงานวิจยั เพือ่ ถา่ ยทอดเทคโนโลยี3. รายช่ือผู้วจิ ัย 3.1 หัวหน้าโครงการวิจยั นายสรุ ชยั เตชะเอ้ย4. ไดร้ บั จดั สรรงบประมาณ  เงนิ แผ่นดิน  เงนิ รายได้ ประจาปี 2560 เป็นเงินจานวน ...500,000.......-บาท (......หา้ แสนบาทถ้วน....................)5. เรม่ิ ทาการวจิ ัยเม่ือ.... 1 ตลุ าคม 2559.... ถงึ 30 กันยายน 2560.......รวมระยะเวลาโครงการ 1 ปี6. รายละเอียดเก่ยี วกบั ผลงานความก้าวหนา้ ของการวจิ ัย 6.1 วตั ถปุ ระสงค์ของโครงการ 1. เพื่อแยกเช้ือราเอนโดไฟต์จากบัวพันธ์ุมะเหมี่ยวที่สามารถยับย้ังเช้ือแบคทีเรียดื้อยา ปฏิชวี นะและเชื้อก่อโรคปรทิ นั ต์ได้ 2. เพื่อศึกษาค้นพบและบ่งช้ีชนิดของเช้ือราเอนโดไฟต์ท่ีสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ จากบวั พันธ์ุมะเหมยี่ วโดยใชเ้ ทคนิคอณูชีวโมเลกลุ 3. เพ่ือศึกษาประสิทธิภาพการยับยั้งเชื้อแบคทีเรียดื้อยาปฏิชีวนะและเชื้อก่อโรคปริทันต์ จากสารออกฤทธช์ิ ีวภาพกับยาปฏชิ วี นะปัจจุบัน 4. เพอ่ื ศึกษากระบวนการแยกและสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากน้าเลี้ยงเช้ือราเอนโด ไฟต์ 5. เพ่อื การคน้ พบประสิทธิภาพของระยะเวลาต่อความคงตัวของสารออกฤทธชิ์ ีวภาพจาก น้าเลยี้ งเช้อื ราเอนโดไฟต์ 6. เพื่อสนองในพระราชดาริของสมเด็จพระเทพฯ ด้านการอนุรักษ์สมุนไพรไทยและสืบ สานภมู ปิ ญั ญาไทย

~ 48 ~6.2 การดาเนนิ งานวจิ ยั ตามทเ่ี สนอไว้ในโครงการวจิ ัยกบั งานวจิ ัยท่ไี ดด้ าเนนิ การไปแล้วขน้ั ตอนการดาเนนิ งาน เดอื น 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121. การสารวจบวั พันธ์มุ ะเหมี่ยว2. การเกบ็ ตวั อยา่ งบัวพนั ธม์ุ ะเหมย่ี ว3. การแยกเชือ้ ราเอนโดไฟตจ์ ากบวัพันธ์มุ ะเหมยี่ ว4. การบง่ ชนดิ เชื้อราเอนโดไฟต์ดว้ ยเทคนิคสณั ฐานวิทยาและชวี โมเลกลุ5. การทดสอบฤทธท์ิ างชีวภาพตอ่เชอ้ื จุลินทรีย์6.การทดสอบความเข้มขน้ ของสารชีวภาพต่อเชื้อก่อโรค7. ตีพิมพผ์ ลงานวิชาการระดับนานาชาติ7. เขียนรายงานวิจัยฉบบั สมบรู ณ์หมายเหตุ ดาเนนิ การเสร็จสิน้ แล้ว กาลงั ดาเนนิ งาน6.3 ผลของการดาเนนิ การวจิ ัยที่ได้ดาเนินการไปแล้ว คดิ เปน็ ร้อยละ.......80.....ของโครงการ ไดแ้ ก่ขณะนี้ได้ดาเนนิ การวิจยั ส่วนการทดลองถงึ ข้นึ ตอนท่ี 5 ตามแผนการทดลอง ปัจจุบนั กาลังทาการทดสอบความเขม้ ข้นของสารออกฤทธท์ิ างชวี ภาพต่อเชื้อก่อโรค โดยนาเสนองานประชมุ วิชาการและตีพิมพ์ในรูปแบบ proceeding แลว้ 1 เร่อื ง และถ่ายทอดเทคโนโลยี 1 ครง้ั และกาลงั อยู่ในขน้ั ตอนการนาเสนอผลงานวิชาการระดบั นานาชาติ 1 เรื่อง ดังน้ี1. โครงการส่งเสริมสุขภาพสาหรับประชาชนปี พ.ศ.2560 ของวิทยาลัยการแพทย์แผนไทยมหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลธญั บรุ ี ในหวั ขอ้ งานวิจยั การศึกษาอณุชีวโมเลกลุ ของเชอ้ื ราเอนโดไฟต์ท่ีสร้างสารทตุ ิยภูมิจากบัวพนั ธ์ุ มะเหมยี่ วต่อเช้ือแบคทีเรยี แกรมลบท่ีก่อโรคปริทันต์และแบคทีเรียด้ือยาปฏิชีวนะ ณชุมชนบา้ นฟา้ ใหม่ อ.ธัญบรุ ี จ.ปทมุ ธานี ในวนั ที่ 3-4 เมษายน 2560 (เสร็จเรยี บร้อย)2. เข้าร่วมงานประชุมวิชาการนานาชาติ The 7th International conference on FermentationTechnology for Value Added Agricultural Products ในวันที่ 25-28 กรกฎาคม 2560 ณ PullmanKhon Kaen Raja Orchid Hotel ในรูปแบบ proceeding โดยมีหัวข้อนาเสนอคือ Screening of aquaticendophytic fungi sources of bioactive compounds: Preliminary characterization of secondarymetabolites produced by submerged culture จังหวดั ขอนแก่น (เสร็จเรียบรอ้ ย)6.3.1 การแยกเชือ้ ราเอนโดไฟต์จากบวับัวพันธ์ุมะเหม่ียวซึ่งเก็บมาจากพิพิธภัณฑ์บัวมหาวิทยาลัยเทคโนโลยีราชมงคลธัญบุรีและที่วิทยาลัยการแพทย์แผนไทย ในช่วงระยะเวลาเดือนกันยายน พ.ศ. 2559 โดยแยกจากส่วนต่างๆ ของบัว คือ ใบ, ก้าน,กลีบดอก, ไหล และรากของบัวมะเหม่ียว ด้วยวิธี surface sterile และวางบนอาหารเล้ียงเชอ้ื PDA ที่ผสมยาปฏิชีวนะความเข้มข้น 200 µg/mL. และบ่มท่ีอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 เดือน พบว่าสามารถแยกเช้ือราเอนโดไฟต์ได้ท้ังหมด 10 ไอโซเลต (ภาพ 1)

~ 49 ~ ภาพ 1 เช้ือราเอนโดไฟต์ที่แยกไดจ้ ากบวั. 6.3.2 การศึกษาลักษณะสณั ฐานวิทยาของบัวพนั ธม์ุ ะเหมยี่ ว จากเช้ือราเอนโดไฟต์จานวน 10 ชนิดพบว่า มีเพียงชนิดเดียวที่สามารถยับยั้งเช้ือแบคทีเรียStaphylococcus aureus (MRSA) ได้ คือเช้ือราไอโซเลต S2 ดังน้ันจึงนามาศึกษาลักษณะการเจริญบนอาหารแข็ง PDA เพื่อดูอตั ราการเจริญและการสรา้ งเสน้ ใยเปน็ เวลา 7 วนั ดงั แสดงในตารางท่ี 1ตารางที่ 1 ลกั ษณะการเจรญิ ของเส้นใยและอตั ราการเจรญิ ของเสน้ ใยเชื้อราเอนโดไฟต์บนอาหารแข็ง PDAจานวนวนั ทีเ่ พาะเลยี้ ง ลักษณะเสน้ ใยท่ีปรากฏ ความกวา้ งโคโลนีเชื้อราวนั ที่ 1 สขี าว เป็นเสน้ ใยบางๆหลายเสน้ -วนั ท่ี 3 ลักษณะเป็นเส้นใยสีขาว ขา้ งออกเปน็ สขี าว ข้าง 2.7 cm. ในออกสเี ขียวหน่อยๆวนั ที่ 5 ข้างในออกเปน็ สีเขียวน้าตาล คลุมไปด้วยเส้นใย 4.5 cm. สขี าวขยายออกไปโดยรอบวันที่ 7 วงข้างในออกเป็นสเี ขยี วชัดเจน วงกลางออกสี 5.5 cm. นา้ ตาลบน วงนอกเปน็ ขาว มีเสน้ ใยคลมุ รอบและเม่ือดูลักษณะของเส้นใยเชื้อราเอนโดไฟต์ S2 ด้วยกล้องจุลทรรศน์ พบว่า ลักษณะของเส้นใยมีผนังกนั้ มีการสร้างสปอร์ (ภาพ 2) ABภาพ 2 ลกั ษณะของเส้นใยเชื้อราเอนโดไฟต์ S2 (A) และสปอร์ของเช้ือราเอนโดไฟต์ S2 (B)

~ 50 ~ 6.3.3 การศกึ ษาอณูชวี โมเลกุลของเชอ้ื ราเอนโดไฟต์ เม่ือนาเช้ือราที่เอนโดไฟต์เล้ียงในอาหาร PDA แล้วบ่มท่ีอุณหภูมิห้อง นาน 4 สัปดาห์ นามาสกัดจีโนมิกดีเอ็นเอ โดยวิธี CTAB และเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอด้วยวธิ ี Polymerase chain reaction (PCR) โดยมีสภาวะท่ีเหมาะสมในการเพ่ิมปริมาณดีเอ็นเอดังตารางท่ี 2 โดยใช้ primer 3 ชนิดเพ่ือยืนยันความถูกต้องของลาดับเบสบนสายดีเอ็นเอ ซึ่งประกอบด้วยยีนในตาแหน่ง ITS (primer ITS4 และ ITS5), SSU (primer NS1, NS3,NS4 และ NS6) และ LSU (primer JS1, LROR, LR5 และ LR7) ตามลาดับดับ จากผลการทา PCR ในสภาวะท่ีเหมาะสม กับเช้ือราเอนโดไฟต์ S2 โดยนาดีเอ็นที่เพ่ิมปริมาณได้ไปตรวจสอบความบริสุทธ์ิ และความเข้มข้นของปริมาณดีเอ็นเอ โดยวิธี Agarose gel electrophoresis พบว่าไอโซเลทท่ี S2 ให้แถบบน agarose gel เมื่อย้อมสีด้วย ethidium bromide ที่ตาแหน่งยีน ITS (lane 2),SSU (lane 8), และ LSU (lane 14) ปรากฏดงั แสดงในภาพที่ 3ตารางที่ 2 สภาวะทีเหมาะสมต่อการเพิ่มปรมิ าณดเี อน็ เอของเช้อื ราเอนโดไฟต์ S2Isolated Denaturation (°C) Annealing (°C) Extension (°C) S2 ITS SSU LSU ITS SSU LSU ITS SSU LSU 94 95 95 50 55 55 72 72 721 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 ITS SSU LSU รูป 3 รปู แบบของปริมาณดเี อ็นเอ หลงั จากทา PCR บน agarose gel ของเชื้อราเอนโดไฟต์ S2 : ITS (lane 2), SSU (lane 8), และ LSU (lane 14) 6.3.4 การหาความสัมพันธเ์ุ ชงิ วฒั นาการ ลาดับเบสจากการทา DNA sequencing แล้ว ได้ทาการศึกษาต่อถึงความสัมพันธ์ทางวิวัฒนาการตลอดจนความคล้ายคลึงของเชื้อราเอนโดไฟต์ ท้ังน้ีเพ่ือระบุชนิด และสายพันธ์ท่ีถูกต้อง โดยนาลาดับเบสที่ได้ไป blast ในฐานขอ้ มลู ของขอ้ มูลนานาชาตขิ องงสหรัฐอเมริกา (NCBI) ปรากฏว่าเช้ือราเอนโดไฟต์มีความคล้าย

~ 51 ~กบั เชอื้ ในจนี สั Alternaria ทรี่ ะดับ 99% identity พบวา่ ลาดบั นิวคลโี อทด์ 28S rDNA ของเช้อื ไอโซเลท S2 มีความใกลเ้ คียงกบั Alternaria maritime (99.00%) 6.3.5 การเพาะเลี้ยงเชื้อราเอนโดไฟต์ในอาหารเหลวแบบ Submerged fermentation เพื่อทดสอบการสรา้ งสารออกฤทธ์ิทางชีวภาพ จาการแยกเช้ือราเอนโดไฟต์จากบัว ไอโซเลต S2 ท่ีสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ แล้วนามาศึกษาฤทธ์กิ ารยบั ย้งั เชือ้ แบคทีเรียต่อโดยการนาเช้ือราเอนโดไฟต์ไปเลย้ี งต่อใน flask ขนาด 250 มิลิลติ ร เขย่าในเครื่อง Obital shaker ด้วยความเร็วรอบเท่ากับ 200 rpm./min. ในอุณหภูมิห้อง เป็นเวลา 3 สัปดาห์ จะได้เช้ือราเอนโดไฟต์ที่เจริญเติบโตใน flask คือ ส่วนของเส้นใยเชอื้ ราเอนโดไฟต์จับตัวกันเป็นก้อนเจริญ ติดกับรอบขวดรูปชมพู่ (รปู 4) รปู 4 ลักษณะการเจริญของเสน้ ใยเชื้อราเอนโดไฟตใ์ นอาหารเหลว PDB เป็นเวลา 3 สปั ดาห์ 6.3.6 การทดสอบฤทธ์ิต้านเชื้อจลุ นิ ทรยี ข์ องนา้ เล้ียงเช้ือราเอนเอนโดไฟต์ หลังจากทาการเลี้ยงเช้ือราเอนโดไฟต์ใน flask เป็นเวลา 3 สัปดาห์แล้วนาน้าเล้ียงเชื้อราเอนโดไฟต์ดังกล่าวมาทาการทดสอบการยับยงั้ เพือ่ ดปู ระสิทธิภาพของสารทุติยภมู ิของน้าเลย้ี งเชื้อราเอนโดไฟต์ พบว่านา้เลี้ยงเช้ือราเอนโดไฟต์ใน flask สามารถยับย้ังเชื้อ S. aureus (MRSA), S. epidermidis และ E. coli เช้ือราเอนโดไฟต์ S2 สามารถยับยั้งเช้ือ S. aureus (MRSA), S. epidermidis และ E. coli ได้ โดยค่าเฉลยี่ ของวงใสเท่ากับ 9.33±0.57, 23±2.64, 16.67±2.51 มิลลิเมตร ตามลาดับ ในขณะท่ีใช้ positive control คือAmpicillin ให้ผลการยับยั้งเชื้อ S. aureus (MRSA), S. epidermidis และ E. coli เท่ากับกี่ 20 มิลลิเมตรและ negative control คือ distilled water ไม่เกิดผลการยับยัง้ เชอ้ื แบคทเี รียทดสอบ (ตารางที่ 3)ตารางที่ 3 การยบั ย้งั เชอ้ื แบคทเี รียกอ่ โรคของเช้ือราเอนโดไฟต์ไอโซเลต S2ไอโซ Inhibition zone of bacterial (mm.)เลต E. coli S. epidermis S. aureus (MRSA) 1 2 3 เฉลย่ี SD 1 2 3 เฉลย่ี SD 1 2 3 เฉล่ยี SDS2 10 9 9 9.33 0.5 25 2 2 23 2.6 1 1 1 16.6 2.5 7 0 4 4 974 7 16.3.7 การสกัดน้าเลย้ี งเชื้อราเอนโดไฟต์

~ 52 ~ เมื่อนาน้าเล้ียงเช้ือราเอนโดไฟต์ไอโซเลต ท่ีเลี้ยงใน flask ไปทาการสกัดด้วยตัวทาละลายอินทรีย์จากสารที่มีข้ัวน้อยไปหาสารที่มีขั้วมาก คือ hexane, ethyl acetate และ methanol หลังจากนั้นนาสารสกัดที่ได้ไปทาการระเหยแห้งด้วยเคร่ืองระเหยความดันไอต่า (rotary evaporator) ท่ีอุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส และนาสารสกัดหยาบที่ได้ใส่ในขวดสีชา ก่อนนาไประเหยอีกคร้ังบนเคร่ือง water bath เพ่ือให้น้าหนักของสารสกัดระเหยหมด ก่อนนาไปช่ังหาน้าหนักของสารสกัดที่ได้ด้วยเครื่องช่ังความละเอียด 4ตาแหน่ง ได้นาหนักของสารสกัดหยดคือ 26.0, 375.50, 134.20 mg เม่ือสกัดด้วย hexane, ethyl acetateและ methanol ตามลาดบั 6.3.8 การทดสอบฤทธ์ิต้านเช้ือจุลนิ ทรยี ข์ องสารสกัดหยาบเช้ือราเอนเอนโดไฟต์ S2 การทดสอบฤทธิ์การต้านจุลินทรีย์จากสารสกัดหยาบของเช้ือราเอนโดไฟต์ในตัวทาละลายอินทรีย์hexane, ethyl acetate และ methanol ต่อการยับย้ังเชื้อแบคทีเรีย S. aureus (MRSA) โดยวิธีการ discdiffusion method เพ่ือดูความกว้างของวงใส ซึ่งละลายด้วยด้วย 30% DMSO จากการทดลองพบว่าสารสกัดหยาบของเอนโดไฟต์ไอโซเลท S2 ใหค้ วามกวา้ งของวงใสเทา่ กับ 12.33±0.57 มลิ ลิเมตร 6.3.9 การหาความเข้มขน้ ต่าสุดทสี่ ามารถยับยง้ั เช้ือแบคทเี รีย (Minimum Inhibitory concentration, MIC) เม่ือนาสารสกัดหยาบจากเช้ือราเอนโดไฟต์ไอโซเลต S2 ในตัวทาละลายต่างๆ มาทดสอบหาความเข้มข้นต่าสุดท่ีสามารถยับย้ังเชื้อก่อโรคที่ดื้อต่อยาปฏิชีวนะ Methicillin-resistant Staphylococcusaureus ท่ีแต่ละความเข้มขน้ โดยทาการเจือจางแบบ 2 fold dilution พบวา่ นา้ เลย้ี งเชือ้ ราเอนโดไฟต์สามารถยับย้ังเช้ือแบคทีเรียก่อโรคที่ดื้อยาปฏิชีวนะได้ ณ ความเข้มข้นของสารสกัดหยาบคือ 26.0, 375.50, 134.20mg/ml แสดงให้เหน็ วา่ ความเขม้ ขน้ ดังกลา่ วคือความเขม้ ข้นตา่ สดุ ทส่ี ามารถยับยงั้ เชือ้ จุลินทรยี ์ทดสอบได้ 6.3.10 การทดสอบความมีเสถยี รภาพของสารออกฤทธ์ทิ างชวี ภาพจากเช้อื ราเอนโดไฟต์ไอโซเลต S2 จากผลของการทดสอบฤทธิ์การยับยงั้ เชื้อจุลินทรีย์ของสารสกดั หยาบจากเช้ือราเอนโดไฟต์ ทาให้ทราบค่า MIC ดังนั้นจึงนามาทาการทดสอบหาค่าความเสถียรภาพของสารออกฤทธ์ิทางชีวภาพ โดยศึกษาปัจจัยทางกายภาพ 2 ชนิด ที่มีผลต่อการมีเสถียรภาพของสารสกัดเช้ือราเอนโดไฟต์ คือแสงยูวี และอุณหภูมิเมื่อนาสารสกัดจากเชอ้ื ราเอนโดไฟต์ในสารสกัด ethyl acetate วางภายใต้แสงยูวีเป็นเวลา 30 และ 60 นาทีพบว่าสารสกัดหยาบของเช้ือราเอนโดไฟต์ S2 มีความสามารถในการยับย้ังเชื้อ Methicillin-resistantStaphylococcus aureus โดยใหค้ า่ วงใสเทา่ กับ 11 และ 10 มลิ ลเิ มตร ตามลาดบั ในขณะท่สี ารสกดั หยาบท่ีสกัดด้วย methanol ให้ค่าการยับยั้งของเช้ือเท่ากับ 9 และ 9 มิลลิเมตร ตามลาดับ แสดงให้เห็นว่าสารสกัดหยาบของเช้ือราเอนโดไฟต์ S2 มีความทนทานต่อแสงยูวีเพราะยังคงมีประสิทธภิ าพในการยับยั้งเชื้อก่อโรคได้ในขณะเดียวกันเม่ือศึกษาถึงปัจจัยด้านอุณหภูมิต่างๆ คือ 55, 70 และ 121 °C เป็นเวลา 15 นาที ต่อประสิทธิภาพการยับยั้งเช้ือก่อโรค พบว่าสารสกัดหยาบของสารออกฤทธิ์ชีวภาพเช้ือราเอนโดไฟต์จาก ethylacetate มีความเสถียรภาพต่ออุณหภูมิคือยังคงสามารถมีฤทธ์ิยับยั้งเช้ือก่อโรคได้ โดยให้วงใสเท่ากับ 11, 10และ 8 มลิ ลิเมตร ตามลาดบั นอกจากน้ี สารสกัดหยาบจาก methanol ก็มีความคงตวั ต่ออุณหภูมเิ ช่นเดยี วกันคือให้ค่าวงใสเท่ากับ 9, 9 และ 8 มิลลิเมตรตามลาดับ ณ 55, 70 และ 121°C ดังนั้นจึงสามารถสรุปได้ว่าสารสกดั หยาบจากเชื้อราเอนโดไฟต์ S2 ยังคงมฤี ทธิ์ยบั ยงั้ เชื้อแบคทเี รยี ดื้อยาปฏชิ วี นะได้เมอื่ มีแสงยวู ีและอุณหภูมิสูงถงึ 121°C

~ 53 ~ 6.4 งบประมาณทีไ่ ดจ้ ่ายไปแลว้ แยกตามหมวดรายจ่าย (สารวจถงึ 30 กันยายน 2560)1. งบประมาณรวมโครงการ 0 500,000 บาท 250,000 บาท2. งบประมาณทใ่ี ชไ้ ป 227,500 2.1 งบบุคลากร 0 บาท 2.2 งบดาเนนิ การ 22,500 บาท 2.3 งบลงทุน (ถ้ามี) บาท 2.4 คา่ สาธารณูปโภค 5% บาท3. งบประมาณคงเหลือ 250,000 บาท 6.5 งานทจ่ี ะทาต่อไปและกาหนดเวลาดาเนินการ การดาเนินงาน 2560 2561 ก.ย. ต.ค. พ.ย. ธ.ค. ม.ค. ก.พ. ม.ี ค. เม.ย. พ.ค. มิ.ย. ก.ค. ส.ค.1.การทดสอบความเขม้ ขน้ ของ ดร. สรุ ชยั เตชะเอย้ หวั หนา้ โครงการวิจยัสารชวี ภาพต่อเชือ้ ก่อโรค2. ตีพมิ พ์ผลงานวชิ าการระดบันานาชาติ3. เขียนรายงานวจิ ัยฉบบัสมบูรณ์ 6.6 คาชีแ้ จงเพ่ิมเติม -