Bab 22 Kuman Tahan Asam

KUMAN TAHAN ASAM Robert Utii dan Hasrul HarunMYCOBACTERIUMKuman golongan Mycobacterium berbentuk cwlosis. Mycobacterium tidak dapat diwarnaibatang yang agak sulit untuk diwarfiai, tetapisekali berhasil diwarnai, sulit untuk dihapus dengan cara Gram, tetapi kalau berhasil makadengan zat asam. Oleh karena itu disebut :'uga hasilnya adalah positif Gram. Dibandingkankuman batang tahan asam (BTA). Kini dikenal dengan kuman lainnya, golongan Mycobacte-empat puluh satu spesies yang diakui oleh ICSB rium. tahan terhadap asam dan alkali sehingga(lnternational Committee on Systematic Bacter io- apabila bahan spesimen mengandung kumanIogy). Sebagian besar adalah saprofit, sebagian lain mudah dapat dibunuh sehingga spesimenkecil patogen untuk manusia di antaranya Myco- menjadi lebih murni. Tetapi harus diperhati- kan kepekatan z^t asam dan alkali karena ter-bacterium tuberculosis, fuly cobacterium leprae danlain-lainnya yang dapat menyebabkan infeksi lalu pekat juga dapat membunuh Mycobac-kronik. Golongan saprofit dikenal juga dengan terium.nama atipik. Sifat tahan asam Mycobacteriumadalah karena sifat dinding sel yang tebal yang Diferensiasiterdiri dari lapisan lilin dan lemak yang terdiridari asam lemak mikolat. Macam-macam Myco- Bagaimana membedakan satu spesies Myco- bacterium dengan yang lainnya dipakai sifat-bacterium berbeda dalam deralat tahan asamnya sifat pertumbuhannya seperti: kecepatan per-seperti fulycobacterium leprae bersifat tahan asam tumbuhan, suhu pertumbuhan, pernbentukan pigmen pada cahaya gelap dan percobaan bio-lemah dibandingkan dengan fuIycobaaerium tuber- kimia. MYCOBACTERIUM TUBFRCULOSTSKuman ini disebut juga basil dari Koch. Kuman tuberkulosis. Tuberkulosis juga disebabkan olehini amat penting karera menyebabkan penyakit Mycobacterium bovis pada lembu.

228 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Collin, Jates dan Granse (1982) membagi kuman akan tumbuh merata pada seluruh me- lima varian untuk Mycobacterium twberculosis dium. Biasanya pada medium cair, pertum- buhan lebih cepat. untuk tujuan epidemiologi: - Perbenihan padat:- M. twberculosis var. buman (tbc manusia)- M. tuberculosis var. bortine (tbc lembu) Lowenstein-Jensen, Medium ini mengandung- M. tu.berculosis aar. burnan Asian (tbc manusia telur, gliserol, garam-garam mineral, hijau Asia) malakhit dan biasanya dicampur penisilin untuk membunuh kuman penyerta lainnya. - IM. twberculosis var. African (M. africanum, Perben.ih an padat asam: Afrika Barat) Lowenstein-Jensen yang diasamkan sehingga -M. tuberculosii ,tar. African 11(M. africanum, ;''::.. ,:,.'::. '. pada suhu kamar. Keuntungan Afrika Timur) medium ini adalah setelah pengolahan dengan Habitat NaOH spesimen tidakperlu dinetralkan dengan asam, tetapi dapat langsung ditanamkan. Mycobacterium tuberculosis biasanya terdapat pada manusia yangsakit tuberkulosis. Penularan Sifat-sifat pertu m buha n te rjadi melalui j alan p ern ap asan. My c o b ac t e r i u m borsis biasanya terdapat pada lembu dan dapat Pertumbuhan secara aerob obligat. Energi di-'pula pada manusia melalui susu. dapat dari oksidasi senyawa karbon yang seder- Morfologi dan fisiologi hana. :.':. r, dapat merangsang pertumbuhan. Mikroskopik: Pertumbuhan lambat, waktu pembelahan seki- Pada jaringan tubuh kuman tuberkulosis ber- tar 20 jam. Suhu pertumbuhan optimum 37\"C. Pada perbenihan, pertumbuhan tampak setelah bentuk batanghalus berukuran .\" .''.,.:; :.;,,, dapat 2-3 minggu. Koloni cembung, kering, kuning juga terlihat seperti berbiji-biji. Pada perbenihan gading. berbentuk kokoid dan berfilamen. Tidak ber- spora dan tidak bersimpai. Pada pewarnaan cara Daya tahan Ziehl-Neelsen atau Tan,Thiam Hok kuman ber- warna merah dengan latar belakang berwarna Dayatahankuman tuberkulosis lebih besar apa- biru. Pada pewarnaan fluorokrom kuman ber- bila dibandingkan dengan kuman lainnyakarena fluoresensi dengan warna kuning oranye. sifat hidrofobik permukaan sel. Hijau malakhit dapat membunuh kuman lain tetapi tidak mem- Kultur: bunuh Mycobacteriunt. tuberculosls, demikian juga asam dan alkali. Dengan fenol 5olo diperlukan - Perbenihan cair: waktu 24 jam untuk membunuh Mycobacteriwm tuberculosis. Pada sputum. kering yang melekat Medium asam oleat-albumin (Dubo$. Pada medium ini yang mengandung Tween-80,

KumanTahanAsam 229pada debu dapat tahan hidup 8-10 hari. Pengaruh - menyebabkan granuloma kronikpemanasan daya tahannya sama dengan kuman - dapat jadi adjuvan imunologiklatnnya, jadi dengan pasteurisasi kuman tuber-kulosis ini sudah dapat dibunuh. Protein Tiap tipe Mycobacterium mengandung bebe-Struktur antigen rapa protein yang menimbulkan reaksi tuber- kulin. Protein yang terikat pada fraksi lilin dapatSebagian besar antigen kuman terdapatpada din- membangkitkan sensitivitas tuberkulin. Jugading sel yang dapat menimbulkan hipersensiti- dapat merangsang pembentukan bermacam-vitas tipe lambat, kekebalan dan menjadi Frewnds macam antibodi.adjuztant. Antigen protoplasma tidak banyak Polisakaridaperananny atetapi dapat menyebabkan hipersen- Mycobacterium mengandung bermacam-macamsitivitas tipe lambat pada binatang yang terin- polisakarida. Peranannya dalam patogenisisfeksi. belum jelas. Dapat merangsang timbulnya hiper- sensitivitas cepat dan dapat mengganggu bebe-Lemak (lipid) rspa reaksi antigen-antibodi in rsitro.Mycobacterium mengandung banyak lemak Patogenesisseperti lemak kompleks, asam lemak dan lilin'Dalam sel, lemak tergabung pada protein dan Infeksi terjadi biasanya melalui debu atau titikpolisakarida. cairan (droplet)yang mengandung kuman tuber- Komponen lemak ini dianggap yangbertang- kulosis dan masuk ke jalan napas. Penyakit tim- gung jawab terhadap reaksi sel jaringan terhadap bul setelah kuman menetap dan berkembangkuman tuberkulosis. Fraksi fosfatida menye- biak dalam paru-paru atau kelenjar getah beningbabkan reaksi tuberkel dengan kaseosa nekrosis regional. Perkembangan penyakit tergantung pada: a. dosis kuman yang masuk pada jarrngan. Lemak iuga berperanan pada sifat b. dayatahan dan hipersensitivitas hospes tahan asam. Apabila lemak kuman tuberkulosis dihilangkan dengan eter, maka sifat tahan asam Ada dua kelainan patologi yangterjadi: akan hilang. Lemak ini bersifat spesies spesifik. 1. Tipe eksudatif: Strain yang virulen dari kuman tuberkulosis Terdiri darr inflamasi yang akut dengan memb entuk s erp ent in c o r d y aitu susunan p aralel edema, sel-se1 leukosit polimorfonuklear dan menyusul kemudian sel-sel monosit yang dari kuman. Pembentukan cord ini dihubung- mengelilingi basil tuberkulosis. Kelainan ini kan dengan virulensi. Ternyata bahwa rumus cordfactor adalah Trehalosa 5.6 dimycolate' Faktor ini mencegah migrasi leukosit (LUI = Leucoqtte Migration Inhibition) :

230 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran terlihat rerutama padajaringanparu dan mirip tubuh. Dapat pula langsung dari proses per- pneumonia bakteri. Penyembuhan dapat kijuan masuk ke vena terus ke aliran darah atau terjadi secara sempurna sehingga seluruh proses perkijuan pecah ke bronkus, disebar ke eksudat diabsorpsi arau dapat berkembang seluruh para-paru atau tertelan ke traktus di- menjadi nekrosis yang luas atau berubah menjadi tipe 2 (tipe produktif). Dalam masa gestivus. eksudatif ini tuberkulin adalah positif. Pertumbuhan intra sel2. Tipe produktif: Mycobacterium tuberculosls tumbuh intra sel Apabila sudah matang prosesnya lesi ini berbentuk granuloma yang kronik, terdiri pada monosit, sel RES dengan sel raksasa. Lokasi dari tiga zona: intra sel ini menyulitkan pengobatan. Dalam - zona sentral dengan sel raksasa yang hewan yang kebal, multiplikasi kuman intra sel ini dihambat. berinti banyak dan mengandung kuman lnfeksi primer dan tipe reaktivitas tuberkulosis. tuberkulosis -zon tengah yang terdiri dari sel-sel epi Apabila orang kena infeksi dengan kuman tuber- kulosis, maka akan terjadi: teloid yang tersusun radial I. Lesi eksudatif yang cepar menyebar ke -zona luar yang terdiri dari fibroblas, lim- saluran limfe dan kelenjar getah bening. fosit dan monosir. Kelainan ini disebut komplex Gbon. Lesi Lambat laun zona luar akan berubah men- eksudatif pada jaringan cepat sembuh. jadi fibrotik dan zona sentral akan menga- lami perkijuan. Kelainan seperti ini disebut 2. Kelenjar getah bening menjadi perkijuan tuberkel. Tuberkel yang berkiju dapat pecah yang biasanya disusul perkapuran. ke dalam bronkus dan menjadi kaverna. 3. Test tuberkulin jadi positif. Kesembuhan dapat .terjadi melalui proses Infeksi perrama ini biasanya pada usia anak- fibrosis atau perkapuran. anak, tetapi juga dapat terjadi pada usia dewasa.Perjalanan kuman tuberkulosis Infeksi pertaina dapat terjadi dimana saja di paru-dalam tubuh paru tetapi biasanya pada basal paru-paru. Reak- tivasi biasanya terjadi endogen, artinya kumanPerjalanan kuman tuberkulosis dapat langsungmelalui aliran limfe, aliran darah, melalui bron- tuberkulosis yang lolos di infeksi primer dankus dan traktus digestivus. Pada mulanya, kumanmenjalar melalui saluran limfe ke kelenjar getah jarangeksogen atau infeksi baru dari luar. Reak-bening. Selanjutnya melalui ductus thoracicusmasuk ke dalam aliran darah dan terus ke organ tivitasi ditandai oleh lesi jaringan kronik, pem- bentukan tuberkel, perkijuan dan fibrosis. Kelenjar getah bening hanya sedikit terkena

. KumanThhanAsam 231tidak terjadi proses perkijuan. Tipe reaktivasi kuman tuberkulosis pada kaldu gliserin yangbiasanya terjadt. pada apeks paru-paru. Perbe- telah ditumbuhkan selama 6 minggu. Dapat di-daan antara infeksi primer dan reinfeksi diper-lihatkan melalui eksperimen pbenornena Kocb. mengerti kalau OT ini tidak murni ruberku- Apabila seekor marmot disuntik subkutis loprotein, tetapi tercampur dengan bagian lain dari kuman dan juga bahan perbenihan. PPDdengan kuman tuberkulosis virulen, luka tusukanjarum akan sembuh cepat, tetapi akan terbentuk adalah tub erkulop rot ein murni (P wr ifi e d Pr o t e innodul pada tempat suntikan setelah 2 minggu. Deriaatirse) yang didapat dengan cara fraksinasi dari OT. Satuan tuberkulin adalah TU (fuber-Nodul ini kemudian menjadi ulkus dan ulkus ini culin Unit) yang diukur berdasarkan aktivitastidak sembuh-sembuh. Kelenjar getah bening PPD Seibert Lot No. 49608 dengan berar ter-membentuk tuberkel dan terjadi perkijuan. Apa- tentu di dalam buffer rertentu. Semua tuber-bila hewan yang sama kemudian disuntik kulin harus diukur dengan standar PPDS yang dibandingkan pada reaksi kulit yang ditimbul-kuman tuberkulosis di tempat yang berlainan,hasilnya akan berbeda. Terjadi nekrosis yang kan. Kekuatan tuberkulin ada yang'.' j i, I ; ;.,cepat pada kulit dan jaringan tempat suntikan,tetapi ulkus sembuh cepat. Kelenjar getah d2n ' ',. :- ,. '. Dosis tuberkulin biasanya dimulaibening tidak atau lambat laun terkena. dengan yang paling rendah, 1 TU yang disun-Perbedaan ini disebabkan karena : tikkan pada lengan secara intrakutan sebanyak1. kekebalan2. hipersensitivitas :',. , ', Apabila hasil negatif dapat dicoba dengan Kekebalan dan hipersensitivitas adalah dua kekuatan yang lebih tinggi. Pada survei biasanyaaspek berbe da dari reaksi imunitas seluler. Keke-balan terjadi apabila hospes dapat rnengatasi iangsung disuntikkan 5 TU. Pada hospes yanginfeksi primer. Kekebalan ini terdapat pada sel sangat peka dapat terjadi reaksi lokal dan ne-mononuklear yang dapat menghambat pertum-buhan kuman tuberkulosis, bahkan menghan- krosis dan juga merangsang kambuhnya infeksicurkannya. Hipersensitivitas ditimbulkan olehkuman tuberkulosis utuh atau ruberkuloprotein yanglama. Reaksi tuberkulin akan negatif apa-dan lapisan lilin dan dapat dilihat melalui tes bila orang belum pernah kontak dengan kumankulit tuberkulin. Mycobacterium. Pada orang yang telah kena infeksi primer akan terlihat reaksi setelah 48-72Tes tuberkulin jam berupa kemerahan dan indurasi. Kadang-Tuberkulin yang asli disebut Old Tuberculin(OT) dibuat dari filtrat pekat dari perbenihan kadang nekrosis dan reaksi ini berukuran >10 mm dan ini benahan beberapa hari. Tes tuber- kulin baru positif setelah infeksi 4-6 minggu dengan kuman Mycobacterium. Hasil negarif dapat terjadi selain pada orang sehat juga pada orang sakit tuberkulosis dalam keadaan terrenru seperti:

232 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran- anergi oleh tuberkulosis lanjut lambung, karena pada cairan lambung kadang-- anergi oleh infeksi campak kadang ditemukan basil tahan asam.- anergi oleh penyakit Hodgskin- anergi oleh sarkoidosis Tuberkulosis urogenitalis:- anergi oleh obat-obat imunosupresif Kuman tuberkulosis sampai ke ginjal dan trak- Tes tuberkulin positif dapat konversi jadi tus urogenitaiis melalui saluran darah. Biasanyanegatif setelah pengobatan dengan INH karenakuman tuberkulosis habis. Setelah BCG, tuber- dicurigai apabila pemeriksaan urin menunjuk-kulin positif selama 3-7 tahun. Tuberkulin posi- kan banyak sel leukosit tetapi kultur urintif dapat ditransfer oleh sel monosit dari seorang negatif. Pada stadium lanjut biasanya banyaktuberkulin positif kepada seorang tuberkulin kencing disertai hematuri dan ada panas yangnegarif. hilang timbul. Infeksi tuberkulosis pada traktus urogenitalis dapat menyebabkan infertilitas.lnterpretasi tuberku I i n Tuberkulosis miliaris:Tuberkulin positif hanya menunjukkan orangpernah infeksi dengan Mycobacterium, tetapi Kuman tuberkulosis sampai ke selaput otak mela-pada anak-anak dapat menunjukkan adanya lui saluran darah. Sering terjadi pada bayi danpenyakit tuberkulosis aktif. Orang dewasa anak-anak sebagai komplikasi tuberkulosis primer.dengan hasil tes positif adalah kelompok yangmengandung risiko akan mendapat tuberkulo- Biasanya keadaan penyakit ini berat, disertaisis di kemudian hari karena reaktivasi infeksi demam dan terlihat nodul-nodul yang tersebar pada foto torak. Penting dilakukan pemeriksaanprimer. cairan otak untuk mencari basil tahan asam.Gejala klinik Diagnosis laboratoriumGejala umum adalah rasa letih, lesu, kurus, Diagnosis yang paling pasti dari penyakit tuber-demam. Gejala pada tuberkulosis paru adalah kulosis ialah dengan pemeriksaan mikrobiologibatuk-batuk yang disertai darah, sakit dada, dengan cara mengisolasi kumannya. Bahan spe- simen dapat berupa dahak segar, cairan lam-anemia, keringat malam, LED meningkat karena bung, urine, cairan pleura, cai,ran otak, cairanIgG dan IgA meningkat. Komplikasi tuberkulosis sendi, bahan biopsi dan lain-lainnya.paru adalah pleuritis, atelektasis paru, tbc Mikroskopik Pemeriksaan mikroskopik untuk diagnostikmiliaris dan meningitis. Pada anak-anak lebihsulit untuk didiagnosis karena tidak ada sputum adalah yang termudah, tercepat dan termurah.atau sputum sedikit sehingga sulit untuk peme- Untuk mendapat hasil yang sebaik-baiknya, makariksaan laboratorium. Sebaiknya dilakukan bilas harus dibuat sediaan yang sebaik-baiknya dan

KumanTahanAsam 233diwarnai dengan caraTanThiam Hok (IGnyoun- 3. Auramin-Phenol Fluorokrom:Gabbett) ata:u cara Ziehl-Neelsen. Pada pewar-naan tahan asam akan terlihat kuman ber- - Kuman difiksasi pada gelas alaswarna merah danlatar belakang berwarna biru. - Auramin fenol 10 menitHasil positif ditentukan oleh jumlah kuman - cuci dengan air - Asam alkohol Io/o 5 menrti.,*'ri.,;r- li:,i,i;*\"irli bahan. Dapat kita mengerti - cuci dengan air - KMnOa 0,1% 10 detikbahwa hasil negatif belum tentu tidak ada kuman. - cuci dengan air Daya mikroskop cahaya biasa sangat terbatas - keringkanuntuk dapat mendeteksi jumlah kuman yang Hasil positif dilaporkan secara kuantitatif,sedikit. Dengan mikroskop fluoresens daya me- biasanya digunakan skala Bronkhorst, yaitu:lihat diperbesar sedikit dengan luas pandanganyang lebih besar karena lensa obyektif yang lebih + apabila terdapat 10 kuman setelahbesar dan gambar yang terlihat cukup jelas karena pemeriksaan 15 menitberfluoresensi zat warna auramin rhodamin. + + apabila terdapat sampai 20 kumanHasil positif secara mikroskop tentu.saja tidakberarti diagnosa definitif. Harus dipastikan dengan +++ dalam L0 lapangan penglihatan.cara perbenihan atau percobaan hewan' apabila terdapat sampai 60 kumanCara pewarnaan ++++ dalam 10 lapangan penglihatan. apabrlaterdapat sampai 120 kuman1. Ziehl-Neelsen: - kuman difiksasi pada gelas aias dalam 10 lapangan penglihatan. - tuangkan fuksin karbol - panaskan sampai keluar uap 5 menit + + + + + apabila terdapat lebih dari 120 ku- - cuci dengan air - asam alkohol 3olo 5 menit man dalam l0lapangan penglihatan. - biru metilen 0,5o/o l-2 menit - keringkan Dengan Skala Bronkhorst ini didapatkan ada korelasi dengan kelainan yang rcrdapat pada2. Tan Thiam Hok (Kinyoun-Gabbett): paru-paru. Makin banyak kuman yang ditemu- - kuman difiksasi pada gelas alas - kinyoun 3 menit kan besar kemungkinan didapatkan adanyaka- - cuci dengan air verna dalam paru-paru. Hasil negatif mikrosko- - Gabbett 1 menit - cuci dengan air pik pada bahan dahak dapat diperbaiki dengan - keringkan cara homogenisasi dan sentrifugasi. Cara homo- genisasi yang sering digunakan adalah cara Kubica yang dilakukan dengan mencampurkan i,..,:r .: : :,\"',:,. Caranya ialah sebagai berikut: Dahak merah fenol (indikator). Setelah dikocok dengan

234 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokterantangan sebentar, lalu dikocok dengan mesin tumbuh setelah 2-3 minggu dengan koloni yang timbul dari permukaan berwarna kuning susupengguncang selama L0 menit. Kemudian disen-trifugasi selama 15 mer.rit pada 3000 putaran per atau cream.menit. Cairan supernatan dibuang dan endap- Percobaan hewanannya diteteskan L-2 tetes HCI 2N sampaiwarna kuning, lalu dititrasi kembali dengan Sebagian dari hasil homogenisasi yang telah di-NaOH 4o/o tetes demi tetes sehingga larutan netralisasi disuntikkan subkutis pada hewan mar- mot pada lipat paha dan setiap minggu diperiksaberwarna merah muda seperti semula. ada tidaknya pembesaran kelenjar lipat paha.Dengan cara sentrifugasi didapatkan tidak semuakuman mengendap, sebagian besar masih ada di Apabila terabakelenjar sebesar biji jagung, makacairan supernatan. Banyak laboratorium tidak dilakukan otopsi dan diperiksa makrosopik dan mikroskopik kelenjar limfa, hati, paru-paru danlagi melakukan sentrifugasi, tetapi langsung lain-lain. Apabila marmot mati dalam waktu 10 hari dan pemeriksaan makroskopik dan mikros-menanam dahak yang telah dihomogenisasi kedalam Lozuenstein-Jensen yang telah diasamkan. kopik tidak menunjukkan hasil positif makaCara ini disebut cara langsung,yangmudah danmurah karena tidak perlu sentrifugasi dan ne- kelenjar lipat paha dan limfa digerus secara asep-tralisasi cara Kubica.'pH medium Loruenstein-Jensen yang asam :6,4-6,8 pada suhu kamar. tik, dibuat suspensi lalu disuntik ulang padaPembiakan marmot lain. Apabila hasil negarif setelah 2-3 bulan, maka dilakukan otopsi dan diperiksaAdalah cara yangpaling sensitif untuk mendiag- makroskopik dan mikroskopik kelenj ar-kelenj arnosis tuberkulosis terutama untuk dahak yang di organ. Apabila hasil negatif, maka percobaansedikit kumannya dan sulit ditemukan dengan hewan adalah negatif. Dengan hasil negatif,cara mikroskopik. Pembiakan juga penting untuk diagnosis tuberkulosis belum dapat disingkirkandapat melakukan tes kepekaan kuman terhadap sebab mungkin yang disuntikkan adalah sus-obat-obatan. Hambatannya adalah waktu yang pensi kuman tuberkulosis yang telah mati atau kuman tuberkulosis yang telah resisten terhadapcukup lama untuk menunggu pertumbuhan INH.yaitu sampai 6 minggu dan harus dieramkan Hasil positif adalah kepastian diagnostikpada suhu 35-37\"C. tuberkulosis. Pada hasil kultur positif, langsung dapat ldentifikasi Mycobacteriu mdiperkirakan jenis kuman tahan asam denganmelihat lama pertumbuhan (cepat bila tumbuh Tidak semua kuman tasil tahan asam yang di-dalam 3-4 hari), ada atau tidaknya pigmen dan asingkan di Lozaenstein-Jensen adalah fuIycobac-sebagainya. Kuman Mycobacteriwm tubercwlosis teriurn tuberculosis. Harus dilakukan identifikasi

KumanTahanAsam 235untuk dapat membedakan spesies. Dasar dari Macam-macam tes biokimiapemeriksaan identifikasi adalah waktu pertum-buhan, pembentukan pigmen, tes biokimia dan 1. Merah netral:suhu pertumbuhan. Oleh Runyon (1959) dapat Untuk membedakan antara Mycobacteriwmlangsung dibedakan golongan mycobacteria y angdisebut atipik, hanyaberdasarkan waktu pertum- twberculosis dan Mycobacteriurn bovis terha-buhan dan pembentukan pigmen. Runyon d\"p mycobacterium lainnya. Hasil pada Mycobacterium tuberculosis dan Mycobac-membagi golongan atipik menjadi empat grup. terium boais adalah positif.Runyon grup I: Fotokromogen: 2. Percobaan niasin: Warna koloni menjadi lebih tua bila terkena Hasil positif berani fi[ycobacteriurn tuberculosis. cahaya. Contoh: Mycobacterium kansasii (yellow bacillus), penyebab penyakit pada 3. Nikotinamida paru y ang mirip tuberkulosis. Hasil negatif berartr A4ycobacteriuTTt tuberculosis.Runyon grup II: 4. Arysulfatasa Skotokromogen: Berdasarkan ada tidakny a enzimarysulfatasa \7arna koloni tidak dipengaruhi cahaya. pada kuman. Enzim ini dapat melepaskan Contoh: Mycobacterium scrofulaceum penye- phenolphthalein dari ikatannya pada me- bab adenitis servikalis pada anak-anak. dium yang dapat dideteksi dengan alkali.Runyon grup III: Hasil pada Mycobacterium tubercwlosis adalah Nonfotokromogen: negarif. Koloni kuman tidak berwarna. Contoh: 5. Reduksi nitrat fuIy cobaoerium intracellwlare peny ebab penya- Berdasarkan ada tidaknya enzim nirrat re- kit paru-paru mirip tuberkulosis. duktasa yang dapat mengubah nitrat menjadi nitrit. Adanya nitrit dapat diketahui denganRunyon grup IV: reagen asam sulfanilat. Rapid grozuers: Hasrl pada Mycobateriwm fortuitum dan fuIyco- bacterium kansasii adalah positif, sedangkan Tumbuh cepat (3-7 hari) pada perbenihan fubcobacterium twbercwlosls bisa positif atau sederhana. Contoh: A4ycobacterium fortui- negarif. tum penyebab abses pada manusia dan 6. Hidrolisis Tween-8O selama 10 hari. penyakit paru-paru: Mycobacteriunt srn egmd- Berdasarkan ada atau tidaknya hidrolisis' tis yang terdapat pada alat kelamin secara dilihat dengan indikator merah netral. normal. Hasrl pada Mycobacterium kansasii adalah posi- trt danfulycobaaerium tuberculosis adalah negatif .

236 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran7. Pertumbuhanpada 4 (p)-nitro-benzoic acid rdtio darr proportion method sehingga didapatkan hasil sebagai berikut: -:,. - :,,i.'.:.':'i. Obat anti TB A: B x H37Rv Colo' Mycobacterium tuberculosis tidak tumbuh, B: apabila) 4 x dianggap resisten sedangkan Mycobacterium fortaitum tum- )C: apabila to/o dianggap resisten buh. Tes serologi8. Pertumbuh an pada thracetazone Tes serologi yang dikenal hingga kini yang dapat membantu diagnosa tuberkulosis adalah Tes Mycobacterium tuberculosis tidak tumbuh, Takahashi. Tes ini merupakan reaksi aglutinasi sedangkan fuIycobacterium fortwitwm tum- fosfatida kaolin pada seri pengenceran serum sehingga dapat ditentukan titernya. Titer lebih buh. darr 1.28 dianggap positif, yang berarti proses tuberkulosis masih aktif.Tes resistensi BCGTes resistensi atau kepekaan kuman tuberkulosisterhadap obat-obatan anti tuberkulosis penting Bacillus Calnrette Guerin adalah Mycobacteriumdilakukan untuk pengobatan yar,g tepat. Obat- bovis yang telah dilemahkan dan dipergunakan sebagai vaksin hidup untuk pencegahan penya-obatan yang dicoba termasuk streptomisin, kit tuberkulosis dengan meningkatkan imunitas seluler. Vaksin mati tidak atau sedikit mem-INH, PAS, etambutol, pirazinamrda, rifam- berikan proteksi. Biasanya vaksin BCG tersedia dalam bentuk beku kering ^tau freeze-dried.pisin dan kanamisin yang biasa dipergunakan di Apabila sudah dilarutkan, hanya dapat bertahan 2 jam kar ena diinaktifkan oleh cahay a matahari.klinik. Tes resistensi dapat secara langsungapabila jumlah kuman di dalam dahak cukup H37Rvbanyak yaitu > Bronkhorst III, tetapi umumnya Adalah sejenis Mycobacteriwm tuberculosis yangdilakukan secara tidak langsung yaitu, kuman diasingkan dari penderita di Saranac Lake Sana- torium (1934) dan dapat diperoleh dari Trudeaudiisolasi dahulu sebelum dilakukan tes. Tes resis-tensi ada yang disebut absolut, dimana patokan- Institute Inc. Saranac Lake, New York. Jenis ini virulen dan masih peka terhadap obat-obatnya adalah kadar hambatan minimum kumanterhadap obat tertentu. Apabila kadarnya mele- anti tuberkulosis dan digunakan sebagai kumanbihi KHM berarti resisten. Metode lain adalah pembanding (standar) di laboratorium.resistdnce ratio, yaitu perbandingan dengankuman standar H3ZRv, apabila sama berartisensitif. Metode lain lagi adalah Proportion metbod,di mana dilihat berapa persen populasi kumantelah resisten terhadap obat tertentu. Apabilaproporsi yang resisten rendah, maka obat masihdapat dipergunakan untuk terapi. Cara yanglazim dipakai adalah kombinasi antar^ resisten

KumanTahanAsam 237MYCOBACTERIUM LEPRAEPenyebab penyakit kusta manusia, terutama 2 +: 1-10 kuman dalam 10 lapangan peng-menginfeksi saraf tepi, kulit, mukosa hidung,otot, tulang dan testis. Banyak terdapat di Afrika, lihatanAsia, Amerika Tengah dan Selatan. Penyakit +:3 1-10 kuman dalam 1 lapangan penglihatankusta sejak dahulu dianggap istimewa. Penderita 4 +: 10-100 kuman dalam 1 lapangan peng-kusta biasanya dikucilkan dari masyarakat, danmenimbulkan rasa takut (Leprofobi). lihatan Penyakit kusta dianggap istimewa karena: +:5 100-1000 kuman dalam 1 lapangan peng-1,. Kumannya tumbuh lambat sehingga masa lihatan inkubasi lama dan perkembangan penyakit 6 +: > 1000 kuman dalam 1 lapangan peng- lama. lihatan2. Kumannya belum dapat ditumbuhkan pada Morpbological Index (MI) adalah jumlah M. perbenihan artifisial lepraeyangberbentuk utuh atau solid per L00 M.3\" Kumannya berpredileksi pada jaringan saraf leprae.4. Infeksi baru dan lama tidak dapat dibedakan M. lepraeyangsolid atauutuh dianggap kuman karena gejala klinis tidak jelas yang hidup, sedangkan yang fragmented atau5. Penyakit kusta hanya terdapatpada manusia nonsolid dianggap kuman yang telah matr. M.6. Spektrum imunologiknya bervariasi dari 0 lErae hidup intrasel (obligat intrasel). Di luar sampai 3 + yang bahkan bersifat merusak tubuh dapat hidup selama 2-9 hari. Masa pem- karena hipersensitivitas belahan atav generation time rata-rata 20 hari.7. Stigma atau fobi terhadap penyakit kusta. Pertumbuhan kuman M. leprae pada mencit Armauer Hansen (1873) adalah orang y^ng berhasii dilakukan oleh Shepard (1960) sehinggapertama menemukan kuman penyebab kusta,yattu Mycobacterium leprae yang bersifat tahan memungkinkan untuk menentukan kumanasam. hidup atau mati dan juga untuk menentukan B acterial Index (BI) adalah j umlah kuantitatif resistensi kuman terhadap obat anti kusta sepertiM.leprae: DDS. Secara imunologik, penyakit kusta di-1 +: 1-10 kuman dalam 100 lapangan peng- kenal dalam berbagai bentuk klinik. Bentuk LL atau Leprom adalah bentuk polar yang stabil, lihatan dan respons selulernya (CMD tidak ada atau nol. Bentuk TT atau tuberkuloid juga bentuk polar yang stabil, tetapi respons selulernya berlebihan sehingga merusak jaringan saraf. Selain kedua bentuk polar tersebut di atas terdapat bentuk BB

238 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran(borderline) yaitu campvran afltara LL dengan Reaksi lepra ini berupa peradangan akut padaTT, dan BT atau BL, tergantung yang manayang bercak-bercak kusta di kulit disertai pembeng-lebih menonjol. Perbedaan bentuk klinik LL kakan, rasa sakit, panas dan juga jaringan sarafdan TT terlihat pada gambar berikut: terkena. Lepromin Merupakan ekstrak leproma, yang dibuat dengan cara menggerus leprom sampai jadi seperti pasta lalu diotoklaf, kemudian disaring dan ditambah- kan larutan fenol0,5%. Tes Lepromin dilakukan dengan suntikan subkutis sebanyak 0,1 ml. LL BL BB BT TT Pembacaan hasil adalah sebagai berikut:Dikutip dari Medicine in Tbe Tropics, Leprosy, edisi 2, 72 jam untuk reaksi Fernandez.hal.2I) 3-4 minggu untuk reaksi Mitsuda Pada LL ditemukan banyak kuman dan tesLepromin negatif. Pada TT ditemukan sedikit + pembengkakan 1-2 mmsekali kuman dan tes Lepromin positif. Sebalik- + pembgngkakan 3-5 mmnya pada LL ditemukan banyak antibodi, ++ pembengkakan 5 mmsedangkan pada TT sedikit. Kelebihan antibodi +++: ulkusini dapat memberikan komplikasi yaitu reaksi Arti Fernandez (+) : baru kena infeksilepra tipe 2 atau ENL (Erythema Nodosun Mitsuda (+) : -baru kena infeksiLeprosun) yang terjadi karena reaksi antigen- -tanda kekebalanantibodi yang membentuk suatu kompleks yangkemudian diendapkan pada jaringan sehingga Tes Lepromin bukan untuk diagnosa tetapiterjadi reaksi radang. untuk melihat ada tidaknya kekebalan. BCG dan TBC tidak selalu membuat reaksi Miisuda menjadi positif.