Dottavio A.M. et al.: Producción de pollos. Rev. Vet. 30: 1, 43-47, 2019 47 simplificación del esquema de alimentación estableci- 4. Decuypere E. 2007. The endocrine and metabolic inter- do en el protocolo, tanto en Campero Casilda como en face of genotype-nutrition interaction in broilers and broil- Campero INTA, el alimento crecimiento utilizado en er breeders. World´s Poult Sci J 63: 115-128. el manejo tradicional puede ser reemplazado por una combinación de alimentos iniciador y terminador sin 5. Fitzhugh H. 1976. Analysis of growth curves and strate- afectar la proporción de cortes valiosos ni el contenido gies for altering their shape. J Anim Sci 42: 1036-1051. de grasa corporal, si bien con un leve efecto detrimen- tal sobre el rendimiento a la faena. 6. Fumero JE, Godínez O, Arias R. 2010. Prueba compara- tiva de pollos híbridos camperos y comerciales en crianza La evidencia indica que los dos grupos genéticos intensiva. Rev Cubana Ciencia Avíc 34: 29-36. se comportan de manera equivalente en relación a las variables analizadas y que el cambio propuesto en el 7. Havenstein GB, Ferket PR, Qureshi MA. 2003. Growth, manejo de la alimentación, en términos generales, no livability and feed conversion of 1957 versus 2001 broilers afecta a los caracteres productivos evaluados pudien- when fed representative 1957 and 2001 broiler diets. Poult do obviarse la inclusión de la categoría crecimiento en Sci 82: 1509-1518. el esquema, simplificando así su producción dado que estas aves reciben alimento balanceado especialmente 8. N’Dri A, Mignon GS, Sellier N, Tixier BM, Beaumont formulado para pollos Campero. C. 2006. Genetic relationships between feed conversion ratio, growth curve and body composition in slow-grow- Agradecimientos. A los estudiantes de Veterina- ing chickens. Br Poult Sci 47: 273-280. ria de la UNR por colaborar responsablemente en el cuidado de los animales y en el registro de los datos, 9. North MO. 1993. Manual de Producción avícola, Ed. Ma- en particular a Sabina Advínculo, Araceli Martines y nual Moderno, 3ra. ed., México, 829 p. José Librera. 10. Sheridan A. 1990. Genotype x environment interactions. REFERENCIAS In: Poultry breeding and genetics (Crawford RD Ed), El- sevier, New York, p. 897-912. 1. Bonino MF, Canet ZE. 1999. Producción de pollos y hue- vos camperos. Boletín Técnico editado por la Dirección de 11. Terraes JC et al. 2007. Efectos de dos dietas de diferente Comunicaciones INTA Pergamino, 39 p. composición sobre el porcentaje de uniformidad de pollos parrilleros hembras. Anales XXVIII Sesión Comunic. 2. Buxade CC. 1988. El pollo de carne, 2da. ed., Mundi Científ., Fac. Cs. Veterinarias (Corrientes, Argentina), p. Prensa, Madrid, 365 p. 47. 3. Castelló JA. 2002. La industria del pollo para carne. En: 12. Whitehead C, Griffin H. 1984. Development of divergent Producción de carne de pollo (Castelló JA, Cedó R, Cepe- lines of lean and fat broilers using plasma very low density ro R, et al), Ed.Amazon), México, 425 p. lipoprotein concentrations as selection criterion: the first three generations. Br Poult Sci 25: 573-582.
Revista Veterinaria Rev vet 30 (1): 48-53, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Efecto de la fertilización nitrogenada sobre la producción y composición de Cynodon plectostachyus Méndez, R.1; Fernández, J.A.2; Yáñez, E.A.2 1Actividad privada, Chaco, Argentina. 2Profesores Depto. Producción Animal, Fac.Cs.Agrarias, Univ.Nac.del Nordeste, Cabral 2139, Corrientes 3400, Argentina. E-mail: [email protected] Resumen Méndez, R.; Fernández, J.A.; Yáñez, E.A.: Efecto de la fertilización nitrogenada sobre la producción y composición de Cynodon plectostachyus. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019. Con el objetivo de evaluar cómo afecta la aplicación de diferentes dosis de urea sobre la producción de materia seca (MS) y la composición nutricional del “pasto estrella”, se realizó un ensayo aplicando tres niveles de fertilización nitrogenada: T0: testigo (0 kg/N/ha), T1: 40,5 kg/N/ ha, y T2: 81 kg/N/ha. La parcela donde se aplicaron los tratamientos presentaba una pastura de C. plectostachyus (Pilger), con 15 años de implantada y nunca fertilizada, utilizada para pastoreo directo con altas cargas. Se utilizó un diseño en bloques completos al azar, con tres tratamientos y tres repeticiones, aplicando el fertilizante al inicio del trabajo, luego de un corte de emparejamiento. Los cortes se realizaron en el mismo año, los días 23/04, 14/05 y 16/06. A partir de las muestras se obtuvo la producción de MS y en el laboratorio se efectuó la determinación de proteína bruta (PB) y fibra detergente neutro (FDN). La fertilización nitro- genada del “pasto estrella” produjo un aumento de la producción de MS, de hasta el 40% para todo el período analizado, siendo mayor a 25% en el primer corte. La concentración de PB aumentó aproximadamente un 20% con la aplicación de nitrógeno al inicio del otoño, man- teniendo este efecto durante 2 meses, luego de lo cual desapareció. La respuesta fue mayor para T1. La concentración de FDN no fue afectada por la fertilización nitrogenada, aunque se observó menor FDN en el primer corte, para todos los tratamientos. La combinación de mayor concentración de PB y menor de FDN, implica una mejoría en la calidad nutricional de la pastura en el período inicial post-fertilización. Palabras clave: pasto estrella, fertilización nitrogenada, calidad nutricional, rendimiento, proteína, urea. Abstract Méndez, R.; Fernández, J.A.; Yáñez, E.A.: Effects of nitrogen fertilization on the pro- duction and composition of Cynodon plectostachyus. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019. To evalu- ate how the application of different doses of urea affects the production of dry matter (DM) and nutritional composition of star grass, a trial applying three levels of nitrogen fertilization was conducted: T0: control (0 kg/N/ha), T1: 40.5 kg of N/ha, T2: 81 kg of N/ha. The plot where treatments were applied presents a pasture of C. plectostachyus, with 15 years of im- plantation and never fertilized, used for direct grazing with high loads. A complete random blocks design was used, with three treatments and three repetitions, applying the fertilizer at the beginning of the work, after a pairing cut. The cuts were made on 23/04, 14/05 and 16/06. From the samples obtained, the DM production was evaluated and at the laboratory, DM, crude protein (CP) and neutral detergent fiber (NDF) were determined. The nitrogenous fertilization of “star grass” produced an increase in DM production of up to 40% for the whole period analyzed, being more than 25% in the first cut. The CP concentration increases approximately 20% with the application of nitrogen at the beginning of autumn, maintain- ing this effect for 2 months, after which it disappears. The answer was greater for T1. The concentration of NDF was not affected by nitrogen fertilization, although it is observed less NDF in the first cut, for all treatments. The combination of higher concentration of CP and lower NDF, implies an improvement in the nutritional quality of the pasture in the initial post-fertilization period. Key words: star grass, nitrogen fertilization, nutritional quality, yield, protein, urea. Recibido: 11 julio 2018 / Aceptado: 2 noviembre 2018 Trabajo final de graduación del primer autor, FCA, UNNE.
Méndez R. et al.: Fertilización del pasto estrella. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019 49 INTRODUCCIÓN sayos de campo demuestran que se adapta rápidamente a condiciones de aridez y salinidad 14 . El avance de la agricultura en Argentina viene desplazando a la ganadería hacia zonas consideradas Además se caracteriza por su capacidad de soportar marginales del norte del país, donde los pastizales na- errores de manejo, en particular el sobre-pastoreo con turales son la base de la cadena forrajera. Estas pastu- intenso pisoteo en condiciones de humedad, pues con ras, megatérmicas y de crecimiento estival, son de baja un descanso adecuado se produce un excelente rebro- calidad nutritiva. Su digestibilidad rara vez supera el te y recuperación de la cobertura del suelo. A esto se 60% y presentan gran variación durante el año. suma que ante el aumento de temperatura al inicio de la primavera, rápidamente ofrece forraje con abundantes La concentración de proteína bruta (PB) también es hojas verdes. menor comparada con las gramíneas templadas y con las subtropicales implantadas, alcanzando el 8-10% en En relación con la producción de carne, pueden brotes recientes y disminuyendo al 4-6% en plantas lograrse ganancias de peso individual de hasta 640 g/ florecidas y/o durante el invierno. Estos valores de PB animal/día y ganancias de peso anual de 1.538 kg/ha, están en el límite o por debajo de los requerimientos siendo una pastura capaz de resistir altas cargas 7 . nutritivos de los vacunos 14 . Grandes incrementos en la producción de carne Una de las herramientas para mejorar la producción han sido logrados usando fertilizantes nitrogenados de forraje, sería la implantación de nuevas especies de en pastos tropicales, independientemente de la espe- mayor productividad y mejores valores nutritivos, que cie. Frecuentemente los niveles de producción han sido se adapten a la zona y que puedan suplir la disminución superiores a los logrados en mezclas de gramíneas y de alimentos en la época invernal. En las pasturas tro- leguminosas. En Australia distintos autores evaluaron picales, la última premisa se podría lograr a través de la ganancia de peso vivo utilizando pasturas tropicales la henificación o del diferimiento de la producción para (Setaria sp y Gramma sp): aplicando entre 170 y 300 kg su pastoreo en invierno. de nitrógeno, obtuvieron ganancias de peso vivo entre 500 y 820 kg/ha/año 9, 10 . Una alternativa para estas zonas es el “pasto estre- lla” (Cynodon plectostachyus Pilger), planta nativa del Esta investigación tuvo como objetivo evaluar el continente africano (Kenya, Tanzania), muy empleada efecto de la fertilización nitrogenada sobre la produc- para pastoreo y henificación, así como para el control ción de materia seca (MS) y la composición nutricional de la erosión de suelos. Además, es fácilmente adap- del “pasto estrella”. table a diferentes ambientes, con gran capacidad para soportar el manejo inadecuado y el sobre-pastoreo. MATERIAL Y MÉTODOS La introducción de esta planta en la Provincia del La experiencia a campo se realizó en un estableci- Chaco (Argentina) se realizó a través del Instituto Na- miento cercano a la localidad de Colonia Elisa, Depar- cional de Tecnología Agropecuaria (INTA Colonia Be- tamento Sargento Cabral (Chaco, Argentina). El campo nítez), con ejemplares oriundos de una provincia limí- cuenta con una superficie de 2.500 ha y realiza activi- trofe (Corrientes). A su vez, es posible que la introduc- dades agrícolas y de invernada, con suplementación en ción del “pasto estrella” en esta última provincia, fuera pastoreo y -en menor medida- en confinamiento. realizada con material traído de Paraguay 15 . El clima de la región corresponde a un ambiente C. plectostachyus es una gramínea perenne, con subtropical húmedo con estación seca. El registro pro- largos estolones de crecimiento rápido, que cubren medio de lluvia para la zona es de 1.200 mm anuales, abundantemente el suelo desnudo formando una densa concentrándose la mayor parte de las lluvias en prima- red. La planta alcanza de 50 a 150 cm de altura. Las ho- vera-verano. Los inviernos son secos y el mes más crí- jas son pilosas, planas, de hasta 20 cm de largo por 3-6 tico es julio 2 , con una media de 30 mm. De acuerdo a mm de ancho. La inflorescencia presenta de 6 a 12 espi- los registros del establecimiento, las precipitaciones en gas que rara vez sobrepasan los 8 cm de largo. Algunas el periodo del ensayo fueron de 341 mm, con casi 300 variedades producen buenas cosechas de semillas en mm llovidos entre la fertilización y el primer corte. zonas de baja humedad, pero en general, la propaga- ción se realiza por métodos vegetativos. Para el ensayo se dispuso de una superficie de 2 ha, sobre suelos de la serie Martina (natrustalf típico), Esta planta es una gramínea de clima subtropical que se encuentran en lomas cerradas y presentan un húmedo, de crecimiento estival, sensible a las heladas horizonte superficial lixiviado, color gris parduzco- y resistente a la sequías, que se adapta fácilmente a una claro, con textura media. El subsuelo es gris oscuro, de gran diversidad de ambientes. A mayor temperatura, textura pesada, con moderado contenido de materia mayor es la producción y a menor temperatura la pro- orgánica, buena a alta capacidad de retención de agua, ducción disminuye, siendo la optima entre 25 y 38ºC 16 . hasta 1,45 m de profundidad. Es fuertemente ácido has- ta los 45 cm y luego neutro; muy rico en calcio, bueno La especie se destaca por su plasticidad con res- en magnesio, rico en potasio, fuertemente sódico, con pecto a las condiciones ambientales. Si bien su buen moderadamente alta capacidad de intercambio catióni- desarrollo ocurre en ambientes cálidos, con un régimen co y porcentaje medio de saturación de base. Es un sue- de abundantes lluvias y sobre suelos de textura franco lo moderadamente profundo, con penetración efectiva a franco-arenoso, sin condiciones de salinidad, los en-
50 Méndez R. et al.: Fertilización del pasto estrella. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019 de raíces hasta alrededor de l metro. Capacidad de uso: Tabla 1. Promedio de producción de materia seca/hec- clase VI 12 . tárea (MS) por corte y total, considerando todos los cortes del ensayo. Este experimento se realizó en el periodo de marzo a junio sobre una pastura bien establecida de pasto es- tratamiento MS p/corte (kg) MS total (kg) trella, con aproximadamente 15 años de implantada, la cual nunca fue fertilizada. T0 1,826 a 5.477 T1 2,355 ab 7.065 El diseño experimental utilizado fue el de bloques T2 2,582 b 7.747 completos al azar, con 3 tratamientos de fertilización nitrogenada (T0= testigo, T1= 40,5 kg de N/ha, T2= 81 Medias con letras distintas difieren estadísticamente kg de N/ha), con 3 repeticiones cada uno. Como fuente (p<0,05). de nitrógeno se utilizó urea granulada, la cual se aplicó en una sola vez al voleo, luego del corte de empareja- Evaluando la producción de MS para todo el perío- miento. El tamaño de la parcela fue de 100 m de largo do (Tabla 1), se puede observar que a medida que au- por 20 m de ancho, totalizando una superficie de 18.000 mentó la cantidad de fertilizante aplicada, aumentó la m2 para el ensayo, respetando los límites del piquete. producción de MS, aunque con diferencias estadísticas solo entre T2 y T0. El mismo comportamiento fue ob- El día cero del ensayo se realizó un corte de empa- servado en un experimento con pasto Siam, que mostró rejamiento (14/03) a toda la parcela (punto cero de ve- diferencias estadísticas en producción de MS a partir getación) y luego la fertilización en sus distintas dosis. de los 75 kg de N/ha 4 . Los cortes de muestreo de la pastura se efectuaron los días 23/04, 14/05 y 16/06. En otro ensayo, fertilizando pasto estrella con dife- rentes fuentes de N y con aplicaciones de 60 kg/ha, los Los sitios de muestreos fueron establecidos eli- autores observaron rendimientos estadísticamente su- minando los bordes de las parcelas (5 m de cada lado), periores al testigo no fertilizado, alcanzando una pro- cosechándose en la parte central, arrojando al azar un ducción de 4.500 kg MS/año. El tratamiento de mayor cuadrado de 50x50 cm y cortando a 10 cm de altura. capacidad productiva, presentó una eficiencia de con- El material obtenido se colocó en bolsas y se llevó al versión fertilizante a MS de 17,51 kg MS/ha/año por laboratorio (Cátedra de Química Analítica y Agrícola, cada kg de nitrógeno aplicado 17 . Facultad de Ciencias Agrarias, UNNE), para realizar los respectivos análisis químicos. La mayor respuesta a la fertilización en los trata- mientos realizados en este ensayo, se puede observar El material verde cortado se llevó a estufa a una en la evaluación de la producción de MS que se produ- temperatura de 65ºC hasta su estabilización, para de- jo en la primera fecha de corte (Figura 1), realizada a terminar MS, y posterior molido hasta pasar por malla principios de otoño, debido a las condiciones de hume- de 1 mm. El rendimiento de cada corte se expresó en dad y temperatura ocurridas en ese periodo, que fueron kg de MS/ha. favorables para el crecimiento y desarrollo de la planta, así como las características del fertilizante utilizado, Del material seco y molido se determinaron los dis- que por tener rápida disponibilidad, permitió que la tintos componentes nutricionales, siguiendo las deter- planta pudiera aprovechar el nutriente en el corto plazo. minaciones que se detallan a continuación: contenido de PB por técnica Kjeldahl (N total x 6,25) 1 y fibra de- A medida que transcurrió el tiempo fue disminu- tergente neutro (FDN) según la técnica de Van Soest 8 . yendo la disponibilidad de humedad del suelo y la tem- peratura del ambiente, determinando una disminución Los resultados obtenidos se analizaron estadística- de la producción de MS en los cortes realizados luego mente mediante análisis de la varianza, empleando el de mediados de otoño. En una experiencia realizada test de Duncan con un nivel de significancia del 5% para comparar las diferencias entre medias 13 . RESULTADOS Y DISCUSIÓN La producción de MS/ha según los diferentes ni- Figura 1. Promedios de producción de materia seca veles de fertilización se puede observar en la Figura (kg MS/ha), según fecha de corte y tratamiento (0-90- 1, con mayor producción de MS en el tratamiento T2, 180 kg de urea/ha). cuyo valor alcanzó los 4.339 kg de MS para el primer corte realizado en el mes de abril, donde la diferencia de producción fue mayor en un 26% con respecto al tratamientos testigo (p<0,05), que tuvo una producción de 3.432 kg de MS/ha. El T1 produjo 4.111 kg de MS/ha y fue un 20% mayor que el T0. En los bloques fertilizados se observó un incre- mento en la producción de MS a medida que aumentó la dosis de nitrógeno, aunque no se evidenciaron dife- rencias significativas entre estos tratamientos.
Méndez R. et al.: Fertilización del pasto estrella. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019 51 Tabla 2. Promedios de concentración de Tabla 3. Producción de materia seca (MS) en el primer corte, con- proteína bruta (PB) considerando todos los sumo animal/día (CA) estimado para un novillo de 300 kg de peso cortes del ensayo. vivo. tratamiento PB (%) media fertilización MS (kg) CA (kg) raciones T0 6,39 a 0 3432 4,83 710 T1 7,92 b 90 4111 4,99 824 T2 7,24 ab 180 4339 5,02 864 Medias con letras distintas difieren estadística- Cantidad de raciones considerando el consumo de acuerdo al nivel de mente (p<0.05) fertilización utilizado. con pasto Pangola (Digitaria eriantha) y Brachiaria porque al tener una mayor producción de MS, en T2 (Brachiaria decumbens), los investigadores concluye- se produce una dilución de la proteína, con menor con- ron que el nutriente que limitó en mayor medida el cre- centración pero mayor producción de kg de PB total/ha, cimiento de estas pasturas fue el nitrógeno 5 . como se expresó anteriormente. Similares resultados se encontraron trabajando con pasto Siam (Brachiaria La concentración de PB fue afectada por la ferti- mutica) fertilizada con 75, 150 y 225 kg de N/ha 4 . lización nitrogenada (Tabla 2), mostrando un compor- tamiento similar a la MS, con mayor concentración en El porcentaje de PB de los diferentes tratamientos T1, diferente estadísticamente de T0 pero similar a T2. disminuyó con la fecha de corte, a medida que avanzó Estos resultados coinciden con los observados en un el otoño, al declinar la temperatura ambiente. Simila- trabajo con cultivares del género Cynodon, que obtu- res efectos se constataron en trabajos de fertilización vieron diferencias significativas de concentración de nitrogenada en pasto clavel 3 . El pasto estrella pre- PB con distintos niveles de fertilización 6 . senta buenos valores de proteína bruta y digestibilidad si es cortado a edades tempranas (30-42 días) y si se En las pasturas megatérmicas suele ocurrir el efec- le aplican altas dosis de fertilizante (+400 kg/ha/año). to “dilución” de la proteína, que consiste en el manteni- En cuanto a la disminución que sufre su calidad con la miento de la concentración de la PB pero con aumento edad, se comporta como la mayoría de las especies de de la producción total de proteína por hectárea, debido gramíneas tropicales 7 . al aumento de la producción de MS. Esto fue explicado por otros autores, quienes detectaron la existencia de En la Figura 3 se puede observar el efecto de la fer- una correlación negativa entre el incremento del rendi- tilización nitrogenada sobre la concentración de FDN miento de un pasto y el contenido de proteína 11 . Los en las diferentes fechas de corte. Los valores obtenidos autores generaron además ecuaciones para determinar en tales ocasiones no presentaron diferencias significa- las concentraciones críticas de N en diversos cultivos y tivas. Al tener una mayor producción de MS en los tra- con ello conocer el estado nutricional de la planta. tamientos con fertilizante T1 y T2 pero sin modificarse la concentración de FDN, no se produce disminución En la Figura 2 se puede observar que en la primer de la calidad de la pastura. fecha de corte existió un efecto directo de la fertiliza- ción nitrogenada sobre el contenido de PB: el T1 con La concentración de fibra detergente neutra aumen- un valor de 10,6%, comparado con el T0 que tuvo un ta al acercarse el invierno disminuyendo la calidad del valor del 8,8%, con diferencias significativas en esa fe- forraje, y los siguientes cortes arrojan valores de FDN cha de corte. El tratamiento T2 con un valor de 9,6% crecientes comparados con el primer corte, pero sin PB, no presentó diferencias significativas con T1 ni con diferencias significativas entre los mismos. Los prome- T0. Los cambios entre los mismos se pueden explicar dios de concentración de FDN -considerando todos los Figura 2. Promedios de concentración de proteína Figura 3. Promedios de concentración de fibra deter- bruta (PB) según fecha de corte y tratamiento (kg de gente neutro (FDN), según fecha de corte y tratamien- urea/ha). to (kg de urea/ha).
52 Méndez R. et al.: Fertilización del pasto estrella. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019 cortes del ensayo- muestran que sus niveles no fueron Agradecimientos. Al Ing.Agr. Juan Pablo Goujon afectados por la fertilización nitrogenada, con valores por la disposición y colaboración en el ensayo. A la entre 70 y 71%. Empresa Goujon Hnos. por el aporte del predio, ma- quinaria e insumos que hicieron posible la realización Estos resultados son similares a los obtenidos en de este trabajo. pasto siam 4 , donde la fertilización no afectó la fibra, siendo influida su concentración por la frecuencia de REFERENCIAS corte. Esto se explica por la fisiología de la planta, que a medida que aumenta su edad se produce su madurez, 1. Bateman JV. 1970. Nutrición Animal. Manual de métodos con incremento de las fracciones estructurales. analíticos, 1ra ed., Herrero Hermanos, México, 468 p. Los resultados observados pueden atribuirse a que 2. Burgos JJ. 2011. Las heladas en la Argentina, 2da. ed., Ed. al aumentar la disponibilidad de N para el crecimiento Orientación Gráfica, Buenos Aires, 387 p. ISBN 978-987- de las plantas, coincidiendo con suficiente temperatura 9260-90-6. y precipitaciones, se genera un aumento de la propor- ción de hojas, que se manifiesta por la elevación de la 3. Bernardis A et al. 2001. Respuesta de la fertilización ni- concentración de PB y menor FDN en el primer corte. trogenada en la producción de forraje y proteína cruda de Hermanthria altísima en distintas fechas de crecimiento. La calidad de una pastura está determinada por su XXI Congreso Argentino Producción Animal, Rafaela composición química, digestibilidad y consumo volun- Santa Fe, Argentina. http://www.revistacyt.unne.edu.ar/ tario. El consumo está directamente relacionado con la unne/Web/cyt/cyt/2001/5-Agrarias/A-062.pdf disponibilidad de forraje y la proporción de fibra de la pastura. A partir de la composición en FDN podemos 4. Camacho MB. 2011. Productividad, composición quími- estimar el consumo potencial de los bovinos, que de ca y digestibilidad de Brachiaria mutica ecotipo Siam en acuerdo a los resultados presentados, no sería diferen- respuesta al corte y la fertilización nitrogenada. Tesis de te entre los tratamientos aplicados, aunque sí entre las Maestría en Producción Animal Subtropical, FCV, UNNE, diferentes fechas de corte, pues en el primer corte se 78 p. observó mayor proporción de PB y menor de FDN, ade- más de mayor producción de MS. 5. Cameron AG, Ross BJ. 1996. Fertilizer responses of es- tablished grass pastures in the Northern Territory (Dar- La mayor cantidad de MS y PB producidas por hec- win, Australia). Trop Grasslands 30: 426-429. tárea, sumadas al mantenimiento de la digestibilidad, significan un aumento de la oferta de MS digestible que 6. Cecato U, Santos GT, Assis MD. 2001. Avaliação de cul- implica que se podrá alimentar a un mayor número de tivares do gênero Cynodon com e sem nitrogênio. Acta animales, mejorando la productividad/ha, impactando Scientiarum 23: 781-788. directamente sobre el resultado económico del sistema. 7. Finkeros (Finkeros.com: el portal de las fincas). 2013. Esta respuesta inicial a la fertilización (disponibi- lidad de N sumado a temperatura y precipitaciones del Pasto estrella Africana. Disponible en http://abc.finkeros. período), permite inferir que esta estrategia se podría utilizar para aumentar la disponibilidad de forraje y así com/pasto-estrella-africana. diferir la producción de otoño, para que sea pastoreado 8. Goering HK, Van Soest PJ. 1970. Forage fibre analysis: en el invierno. apparatus, reagents, procedures and some applications. Teniendo en cuenta la fórmula para calcular el con- Agric Handbook, Agric.Res.Service, Washington DC, 379 sumo de bovinos a partir del FDN, a saber: consumo p. (kg MS/día) = PV * 1,1 / % FDN y utilizando los datos 9. Jones RM, Evans TR. 1989. Live weight gain from four obtenidos en este trabajo en cuanto a la producción de nitrogen fertilized grasses grazed over the growing sea- MS al primer corte, es dable deducir que se podría au- son in coastal South-East Queensland (Australia). Tropical mentar la cantidad de animales en pastoreo debido a la Grasslands 23: 75-79. fertilización propuesta (Tabla 3). 10. Jones RJ, Jones RM. 1989. Live weight gain from rota- tionally and continuously grazed pastures of Narok setar- En base a los resultados obtenidos se puede con- ia and Samford rhodes grass fertilized with nitrogen in cluir que la fertilización nitrogenada del pasto estrella southeast Queensland. Tropical Grasslands 23: 135-142 incrementó la producción de MS, de hasta el 40% para 11. Juárez HJ, Bolaños ED. 2007. Las curvas de dilución de todo el período analizado. La concentración de PB au- la proteína como alternativa para la evaluación de pastos mentó aproximadamente un 20% con la aplicación de tropicales. Universidad & Ciencia 23: 81-90. Disponible nitrógeno al inicio del otoño, manteniendo este efecto en www.ujat.mx/publicaciones/uciencia durante dos meses, luego de lo cual el mismo desapa- 12. Ledesma LL, Zurita JJ. 1989. Los suelos del departa- rece. mento Sargento Cabral, Provincia del Chaco. Carta de Suelos de la República Argentina. Disponible en https:// También surge que la concentración de FDN no es inta .gob.ar/sites/default/f iles/scr ipt-t mp -inta_ infor me_ afectada por la fertilización nitrogenada. La combina- mapa_ de_ suelo ción de mayor concentración de PB y menor de FDN, 13. Littel RC. 1989. Statistical analysis of experiments with significa una mejoría en la calidad nutricional de la pas- repeated measurements. Hort Sciences 24: 37-40. tura en el período inicial post-fertilización. 14. National Research Council (NRC). 1996. Nutriment re- queriments of beef cattle. Seventh Revised Edition, Nacio- nal Academy Press (Washington, USA), 242 p.
Méndez R. et al.: Fertilización del pasto estrella. Rev. Vet. 30: 1, 48-53, 2019 53 15. Prause J. 1981. El cultivo del Cynodon Plectostachyus 16. Robles SR. 1975. Producción de granos y forrajes, Ed. Li- (k.Shum) Pilger (pasto estrella). Control de la erosión del musa, México, 592 p. suelo y su posibilidad como forrajera. Boletín del Instituto de Ecología, Recursos Naturales y Tecnología, Ministerio 17. Toll VJ, Martín G, Nicosia M. 2011. Pasto estrella en sue- de Economía, Chaco, Argentina, 21 p. los salinos del NOA. Producir XXI 19: 40-44. Disponible en www.produccion-animal.com.ar Revista Veterinaria mantiene su índice de impacto Noticias de Scimago Research Group (Scimago Journals & Country Ranks, Scopus-Elsevier) comunican que la publicación de nuestra casa, Revista Veterinaria, aumentó su índice de impacto. El índice SJR mide la influencia científica (impacto) del artículo de una revista, expresando cuán importante es el “artículo prome- dio” de la publicación en la discusión científica global (sistema Thomson Reuters). Para nuestra revista, tal indicador había sido de 0,03 entre 2008 y 2011, aumentando a 0,05 en 2012, a 0,11 en 2013, a 0,108 en 2015 y a 0,100 en 2017, último período evaluado. Asimismo, surge para nuestra publica- ción un sostenido descenso del indicador que relaciona “citas versus autocitas”, demostrando que los autores de los artículos están abandonando la práctica de citar sus propias publicaciones anteriores. Por último, se advierte que según este portal, nuestra “Revista Veterinaria” continúa siendo la única pu- blicación de esta rama de la ciencia que posee índice de impacto en Argentina. Para el resto del cono sur tal distinción recae en Brasil, Chile, Colombia y Venezuela. En revistas de veterinaria, a nivel mundial el mayor índice de impacto (2,45 puntos) recae en Annual Review of Animal Biosciences (Estados Unidos). Fuente: http://www.scimagojr.com/journalrank.php?area Retrieved November 15, 2017.
Revista Veterinaria Rev vet 30 (1): 54-58, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Molecular genetic diversity and relationship of indigenous sheep breeds of Pakistan based on nuclear microsatellite loci Hussain, T.1; Musthafa, M.M.2; Babar, M.E.1; Shaheen, M.3; Marikar, F.M.4 1Dep. Molec. Biol.Univ. Pakistan, Lahore, Pakistan. 2Inst.Biol.Sci.Univ.Malaya, Kuala Lumpur, Malaysia. 3Univ.Vet.Anim.Sci. Lahore. 4Gen.Sir.J.Kotel.Def.Univ.Sri Lanka. E-mail: [email protected] Abstract Hussain, T.; Musthafa, M.M.; Babar, M.E.; Shaheen, M.; Marikar, F.M.: Molecular ge- netic diversity and relationship of indigenous sheep breeds of Pakistan based on nuclear microsatellite loci. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019. Sheep genetic resources are high in Pakistan with a number of different breeds spread throughout the country. However, the molecular diversity of sheep breeds is poorly understood in Pakistan. Therefore, in the present study 16 microsatellite markers were used in microsatellite on Buchi and Hashtnagri indigenous breeds of Punjab and Balochistan provinces, respectively. Blood samples from 25 unrelated individuals were collected for genetic diversity and relationship investigation. The mean number of alleles on Buchi and Hashtnagri were 3.375±1.455 and 3.50±1.591, respectively. The mean observed heterozygosity for Buchi was 0.878±0.204 while for Hashtnagri it was 0.885±0.218. The mean Shannon Index showed 1.032±0.371 and 1.070±0.412 for Buchi and Hashtnagri respectively. Inbreeding estimates (FIS and FIT) showed negative values while mean gene flow showed 10.09 and mean population difference (FST) showed 2.4%. Accord- ing to these results, Buchi and Hashtnagri indigenous breeds showed considerable amount of genetic diversity. There is a decent scope for conservation, effective improvement, and designing suitable breeding strategies for sheep breeds in near future. Key words: sheep, Buchi, Hashtnagri, genetic diversity, microsatellite markers, Pakistan. Resumen Hussain, T.; Musthafa, M.M.; Babar, M.E.; Shaheen, M.; Marikar, F.M.: Diversidad ge- nética molecular y relación entre ovejas de razas autóctonas de Pakistan basada en locus microsatelitales nucleares. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019. En Pakistán los recursos genéticos ovinos son abundantes, disponiéndose de varias diferentes castas extendidas en todo el país. No obstante, la diversidad molecular de las razas de ovejas es poco conocida en la región. Por ello, en el presente estudio se investigaron 16 marcadores microsatelitales de las razas indí- genas Buchi y Hashtnagri, en las provincias de Pendjab y Balochistan respectivamente. Para indagar la diversidad genética se obtuvieron muestras de sangre de 25 animales de cada raza. El promedio del número de alelos en Buchi y Hashtnagri fue de 3,375±1,455 y 3,50±1,591 respectivamente. Los promedios de heterocigosis registradas fueron de 0,878±0,204 para la raza Buchi y 0,885±0,218 para Hashtnagri. Los índices de Shannon fueron 1,032±0,371 para Buchi y 1,070±0,412 para Hashtnagri, respectivamente. La estimación de los coeficientes de endogamia (FIS y FIT) mostró valores negativos, en tanto que el flujo genético (migración) fue de 10,09 y el promedio de la diferencia poblacional (FST) resultó de 2,4%. En ambas razas, el índice de información polimórfica fue 0,56, indicando el valor del marcador del tablero. Entre las ovejas Buchi y Hashtnagri, la distancia genética estándar de Nei (Ds) fue 0,0218. Según estos resultados, ambas razas mostraron considerable diversidad genética. Los datos obtenidos permiten vislumbrar una promisoria mejoría en el área de la conservación y en el diseño de las estrategias para la cría de ovejas en el futuro cercano. Palabras clave: oveja, Buchi, Hashtnagri, diversidad genética, marcadores microsatelitales, Pakistán. Recibido: 23 noviembre 2017 / Aceptado: 9 marzo 2018
Hussain, T. et al.: Molecular genetic diversity in sheep. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019 55 INTRODUCTION Punjab including Multan and Muzaffargarh districts of the Punjab province, while Hashtnagri is located in Livestock sector of Pakistan has some staggering Mardan, Peshawar, Haripur, Bannu and Kohat districts numbers where it covers more than half of the agri- of Khyber Pakhtunkhwa, Province of Pakistan 34, 36 . cultural gross domestic products and it stands at fifth largest milk producer in the world 1, 4 . Moreover, the Hashtnagri is categorized as fat-tail sheep breed of country is the tenth largest sheep producer in the world; Pakistan and they possess short legs with a small switch endowed with nearly 34 breeds of sheep (Ovis aries) hanging over the fat-tail. Generally Hashtnagri has a and not only forming the backbone of the rural econo- medium-sized and white coated head with a partially or my of poor farmers but also add immense richness to wholly black or tan in body colour. They have some ex- the genetic diversity to the already rich gene pool 5 . cellent abilities in producing carpet quality wool with a fiber diameter of 35 μm 36 . Buchi breeds is described Characterization and evaluation of genetic poly- as compact, medium sized, white coat with black spots morphism among these breeds is necessary for the on body but totally black ones also can be found. It’s a effective utilization of animal genetic resource rich thin tailed type of sheep breed mainly reared for wool Pakistan through suitable breeding and conservation and mutton 34 . strategies. Nevertheless, very limited efforts have been made to document their genetic diversity and conser- The main objective of the study was to characterize vation strategies which may lead to lose of some very and observe genetic variation in sheep breeds through valuable resources 1 . microsatellite markers for making affective strategies for the conservation and proper management of the bio- Genetic diversity is defined as variability of alleles logical resources of Pakistan. in a population 6 . Genetic characterization is the pri- mary step in any conservation of genetic resources 7, 11 . MATERIAL AND METHODS In general, the genetic variation is the core for evolu- tion and giving the ability cope with changing envi- Animal selection and DNA isolation. Blood sam- ronments 12 . Moreover, proper assessment of genetic ples (10 ml) were collected from Buchi and Hashtnagri diversity both within and among populations is key to sheep into 200 µl EDTA containing tubes aseptically formulate management and conservation strategies 13 . from jugular vein puncture. Unrelated Buchi sheep samples (n=25) were collected from Government Live- The animal genetic diversity studies have been ac- stock Experiment Station, Jugaitpeer, District Bha- celerated considerably over the last two decades with walpur, Punjab province and surrounding areas while the application of molecular techniques to evolutionary Hashtnagri sheep samples (n=25) were taken from Dis- studies 14 . Genetic characterization is carried out in live- trict Peshawar and surrounding areas in Khyber Pakh- stock researches using various molecular biology tech- tunkhwa province. Genomic DNA was extracted using niques like restriction fragment length polymorphism, inorganic method of extraction as used by 37 . The final protein polymorphism, randomly amplified polymor- concentration of extracted DNA was brought to 50 ng/ phic DNA, amplified fragment length polymorphismi, µL through spectrophotometry and 0.8% agarose gel Mitochondrial DNA, short tandem repeat (microsatel- electrophoresis. lites) and single nucleotide polymorphism 15, 20 . Table 1. Microsatellite markers used in this study with Microsatellite markers have been widely used as a allele size range and chromosome number. choice of marker over the other markers to analyze the genetic variation in cattle, sheep and goats 21, 26 due to marker ASR chromosome the similarities between their chromosomes 27, 28 . Mi- crosatellite markers are widely used for measuring ge- MAF70 127-188 4 netic distance among closely related populations from OarFCB11 130-161 2 various countries 29 . OarAE101 100-134 6 MAF33 113-147 9 These microsatellites have become widely applied OarFCB128 106-136 2 for several types of studies, due to their advantages OarFCB304 123-201 19 over other markers; the relative ease in obtaining mark- OarHH47 138-177 18 ers, neutrality, high polymorphisms, easy automation OarVH72 122-150 25 of analytical procedure 30 . It detects variation in simple BM0757 138-189 9 nucleotide repeats, random and abundant distribu- INRA32 150-194 11 tion across the genome and co-dominant as well 31, 35 . BM1818 259-313 32 Therefore, the current study was designed to genetical- ILSTS011 300-382 24 ly characterize the selected two sheep breeds of Paki- MM12 93-131 9 stan using microsatellite markers. ETH152 181-236 5 INRA032 194-230 11 Buchi and Hashtnagri breeds of sheep were select- OarFCB48 104-187 17 ed for characterization and this is the first effort of this nature on these indigenous but valuable breeds. Buchi is inhabitant of Cholistan desert i.e. Bahawalpur, Baha- walnagar, Rahim YarKhan, and hot regions of southern
56 Hussain, T. et al.: Molecular genetic diversity in sheep. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019 Markers selection and genotyping. The Interna- ucts were run on 12% non denaturing polyacrylamide tional Society of Animal Genetics described more than gel in 1X TAE buffer at 120 volts for seven hours. 1400 microsatellite markers that have been identified in cattle and out of these, more than 500 markers can be Statistical analysis. Polyacrylamide gel electro- amplified efficiently in sheep 28 . From this list, sixteen phoresis results were analyzed by the relative flow (n=16) microsatellite markers were selected for the am- method. Statistical analysis for calculation of genetic plification in Buchi and Hashtnagri breeds of Pakistan variability measures such as number of alleles, ex- (Table 1). pected and observed heterozygosity, homozygosity and Polymorphic Information Content (PIC) was calcu- All microsatellites were optimized for PCR ampli- lated for all microsatellite markers. Genetic distances fication through BioRad thermo cycler using reaction between the breeds were calculated according to Nei, mixture of 25 µL contained 100 ng DNA, 50 mM KCl, 1973 38 . 10 mM Tris-HCl, 2 mM dNTPs, 1.5 mM MgCl2, 1.25 pmol/ µL of forward and reverse primers and 0.15 µL The unweighted pair group method was used to of 5U Taq polymerase (Frementas, USA). Touch-down make the dendrogram of genetic distance. Popgene PCR was used with the initial denaturing at 95°C for 4 1.31 39 and Power Stat software were used for calcula- minutes, followed by 35 cycles each for 30 seconds at tions. The usual F-statistics parameters were measured 94°C for denaturation, 45 seconds at 64°-54° C for an- for these two breeds using Popgene software. FIS is nealing and 45 seconds at 72°C for extension. Final ex- known as inbreeding co-efficient which is defined as tension was given from 10 minutes at 72°C. The prod- inbreeding co-efficient of an individual (I) relative to Table 2. Summary of genetic variation statistics for 16 loci used in Buchi and Hashtnagri sheep breeds. locus breed Na Ne I Ho He Nei Ave H MAF70 OarFCB11 Buchi 4 2.7115 1.1435 1.0000 0.6441 0.6312 0.6968 OarAE101 Hash. 6 3.4364 1.4410 1.0000 0.7162 0.7090 0.6968 MAF33 OarFCB128 Buchi 3 2.4851 0.9760 0.3600 0.6098 0.5976 0.5976 OarFCB304 Hash. 3 2.4851 0.9760 0.3600 0.6036 0.5976 0.5976 OarHH47 OarVH72 Buchi 2 2.0000 0.6931 1.0000 0.5102 0.5000 0.5000 BM0757 Hash. 2 2.0000 0.6931 1.0000 0.5051 0.5000 0.5000 INRA32 BM1818 Buchi 2 2.0000 0.6931 1.0000 0.5102 0.5000 0.4676 ILSTS011 Hash. 2 1.9372 0.6769 0.8200 0.4887 0.4838 0.4676 MM12 ETH152 Buchi 2 1.8142 0.6410 0.6800 0.4580 0.4488 0.4488 INRA032 Hash. 2 1.8142 0.6410 0.6800 0.4533 0.4488 0.4488 OarFCB48 Mean Buchi 4 3.9432 1.3791 1.0000 0.7616 0.7464 0.7384 St. Dev Hash. 4 3.9746 1.3831 1.0000 0.7560 0.7484 0.7384 Buchi 2 1.8546 0.6534 0.7200 0.4702 0.4608 0.4804 Hash. 2 1.9616 0.6833 0.8600 0.4952 0.4902 0.4804 Buchi 5 3.2300 1.3354 1.0000 0.7045 0.6904 0.7080 Hash. 5 3.7341 1.4466 1.0000 0.7396 0.7322 0.7080 Buchi 2 2.0000 0.6931 1.0000 0.5102 0.5000 0.5000 Hash. 2 2.0000 0.6931 1.0000 0.5051 0.5000 0.5000 Buchi 6 5.7604 1.7700 1.0000 0.8433 0.8264 0.8068 Hash. 6 5.6497 1.7585 0.8600 0.8313 0.8230 0.8068 Buchi 2 1.8546 0.6534 0.7200 0.4702 0.4608 0.4608 Hash. 2 2.0000 0.6931 0.7200 0.5051 0.5000 0.4608 Buchi 4 2.9274 1.1885 1.0000 0.6718 0.6584 0.6584 Hash. 4 2.9274 1.1885 1.0000 0.6651 0.6584 0.6584 Buchi 4 3.9432 1.3791 1.0000 0.7616 0.7464 0.7464 Hash. 4 3.9432 1.3791 1.0000 0.7539 0.7464 0.7464 Buchi 4 3.3512 1.2861 1.0000 0.7151 0.7016 0.7016 Hash. 4 4.0000 1.3863 1.0000 0.7576 0.7500 0.7016 Buchi 2 1.7705 0.6269 0.5600 0.4441 0.4352 0.3076 Hash. 2 1.4966 0.5140 0.3800 0.3352 0.3318 0.3076 Buchi 6 3.4626 1.4009 1.0000 0.7257 0.7112 0.7384 Hash. 6 4.4405 1.5663 1.0000 0.7826 0.7748 0.7384 Buchi a 2.8193 1.0320 0.8775 0.6132 0.6010 0.5974 Hash. b 2.9875 1.0700 0.8550 0.6183 0.6121 0.5974 Buchi c 1.1004 0.3712 0.2037 0.1312 0.1286 0.1453 Hash. d 1.2057 0.4115 0.2176 0.1491 0.1476 0.1453 Hash.: Hashtnagri. Observed number of alleles (Na), expected number of alleles (Ne), Shannon’s information index (I), observed (Ho) and expected (He) heterozygosities per locus (Nei’s 1973), expected heterozygosity per locus in Buchi and Hashtnagri sheep breeds. a:3.375, b:3.500, c:1.4549, d:1.5916
Hussain, T. et al.: Molecular genetic diversity in sheep. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019 57 Table 3. Summary of F-statistics and gene flow for all loci in Buchi and 1.070±0.4112 for Buchi and Hashtnagi Hashtnagri sheep breeds. breeds respectively. The average PIC locus Buchi FIS Hashtnagri FIS FIT FST Nm value for both of sheep populations -0.3116 -0.5843 -0.3116 0.0172 14.2787 were 0.53 (Buchi) and 0.59 (Hasht- MAF70 0.3976 0.3976 0.3976 0.0000 nagri). OarFCB11 -1.0000 -1.0000 -1.0000 0.0000 **** OarAE101 -0.4706 -1.0000 -0.4706 0.0335 **** The FIS (inter-individual), FIT MAF33 -0.5152 -0.5152 -0.5152 0.0000 7.216 (total population) and FST (subpopu- OarFCB128 -0.3691 -0.3398 -0.3691 0.0134 **** lations) values tabulated on Table 3 OarFCB304 -1.0000 -0.5625 -1.0000 0.0200 18.46 where, only FST displayed positive OarHH47 -0.3782 -0.4484 -0.3782 0.0331 12.2551 values in terms of means. INRA32 OarVH72 -1.0000 -1.0000 -1.0000 0.0000 7.314 and OarFCB11 markers were showed BM0757 0.0854 -0.2101 0.0854 0.0197 **** positive values on FIS for Buchi breed INRA32 -0.5625 -0.5625 -0.5625 0.0784 12.4506 while only OarFCB11 showed posi- BM1818 -0.5188 -0.5188 -0.5188 0.0000 2.9388 tive values in Hashtnagi. ILSTS011 -0.3398 -0.3398 -0.3398 0.0000 **** MM12 -0.4253 -0.4253 -0.4253 0.0645 **** The mean FST value was 0.0242 ETH152 -0.1111 -0.2868 -0.1111 0.0729 3.6240 reflecting the genetic differentiation INRA032 -0.3062 -0.4061 -0.3062 0.0470 3.1777 estimates. Based on the FST values OarFCB48 -0.4021 -0.4602 -0.4021 0.0242 5.0714 mean gene migration (or flow) (Nm) mean 10.0904 showed 10.09 between these breeds. The dendrogram based on Nei’s genetic distance using UPGMA method indicated the close genetic the subpopulation (S) and FIT is measured as a co-ef- relationship between Buchi and Hashtnagri sheep ficient of an individual (I) in relation to the population. breeds 43 . Both sheep populations showed low genetic FIS displays value between -1 and +1, where positive distance from each other (Figure 1) it was calculated as values indicate heterozygote deficiency (inbreeding) 0.0612 while genetic identity of Buchi and Hashtnagri and negative values depicts heterozygosity excess (out sheep breeds was 0.9406 (Table 4) 43 . breeding) 40 . FST is a measure of the effect of popula- tion subdivision, which is the reduction in subpopula- DISCUSSION tion heterozygosity due to genetic drift 41 . Unlike the other F-estimates, FST always shows A very limited study on genetic characterization of positive values, ranging between 0 and 1. FST is widely goat and sheep has been done in Pakistan, even though used to calculate gene flow in population genetic stud- presence of more than 34 breeds of sheep and 30 breeds ies: 0.25*(1-FST)/FST. This highly versatile parameter is of goats has been reported 5, 37, 44 . Most of these breed even used as a genetic distance measure between two documentation has been carried out mainly based on populations instead of a fixation index among many morphological characters rather than the molecular ba- populations 42 . sis. Genetic characterization is the foremost step to- RESULTS wards utilizing the valuable animal resources effec- A total of 54 and 56 alleles were found in the 16 Buchi loci tested on Buchi and Hashtnagri breed respectively (Table 2). Hashtnagri Number of alleles per locus ranged from 2 (Oar- Figure 1. Dendrogram based Nei’s (1978). Genetic AE101, MAF33, OarFCB128, OarHH47, BM1818 distance: method = UPGMA modified from Neighbor and INRA032) to 6 (MAF70, INRA32, ETH152 and procedure of Phylip version 3.5. OarFCB48) mean number of alleles (MNA) for Bu- chi and Hashtnagi populations were 3.375±1.455 and Table 4. Nei’s unbiased measures of genetic identity 3.500±1.592 respectively. and genetic distance (Nei 1978). The observed heterozygosities in studied breeds population ID Buchi Hashtnagri ranged from 0.360 (OarFCB11) to 1.000 (MAF70, OarF- Buchi 0.9406 CB304, OarVH72, ILSTS011, MM12, ETH152, OarF- Hashtnagri **** **** CB48) with an average of 0.878±0.204; while expected 0.0612 heterozygosities throughout all the breeds ranked be- tween 0.458 (OarFCB128) and 0.843 (INRA32), and Nei’s genetic identity (above diagonal) and genetic distance the mean was 0.613±0.131 for Buchi breed. (below diagonal). All the loci displayed higher observed heterozygos- ity for both breeds except OarFCB11. Mean Shannon information index (I) varied between 1.032±0.371 and
58 Hussain, T. et al.: Molecular genetic diversity in sheep. Rev. Vet. 30: 1, 54-58, 2019 tively and efficiently. Moreover, genetic diversity stud- studies. In this study the average PIC value of 16 loci ies have significant role in constructing the breeding was 0.53 in Buchi and 0.59 in Hashtnagri sheep which strategies on economically important animal species 45 . was lower than Indian domestic goat (0.60) 60 , Chinese Therefore, this effort is one of the important steps to- (0.62) and Saanen (0.57) goat breeds but greater than wards characterizing Pakistani sheep breeds. Korean goat (0.35) 61 . Most of the selected microsatellite markers showed The high average PIC values of panel of microsatel- polymorphism indicating their usefulness. All loci lites used for all the breeds supported the appropriate- displayed at least two alleles which is a good indicator ness of the markers for genetic diversity analysis in the for the genetic variability among these breeds. Based Pakistan sheep breeds, since the mean value is >0.5 62 . on the number of alleles observed in all analyzed loci, However, allelic richness also depends on sample size considerable amount of genetic variability reported on and number of observed alleles. When the sample size these two breeds (>2) 46 . Allelic richness is considered is increased the presence of unique alleles within popu- to play an effective role in conservation genetics due to lations, which occurs in low frequencies, tends to in- the marker assisted selection methods for optimizing crease. the number of alleles conserved in populations 47, 48 . In population diversity studies Shannon index is The average heterozygosity of both Pakistani sheep the most widely used which considers the abundance breeds is lower than Chinese goat populations 0.677 to and evenness of the species studied 63 . The Shannon 0.737 49 and 0.77 to 0.821 50 and higher then some of the index information also showed the mean value around Indian goat and sheep breed values 0.426 and 0.501 9, 51 . one for both breeds, depicting the richness and also The observed heterozygosity in Buchi and Hashtnagri relatively low species richness and evenness of these sheep (0.832, 0.877) breeds was higher than expected breeds since the index showed less than 3.5 which is heterozygosity values of some other sheep breeds stud- the mark set for high species evenness and richness 64 . ied indicating no overall loss in heterozygosity (allele This might be due to the management system rather fixation) in the studied breeds 52 reports on gene diver- than the un-connected with the level of heterozygosity sities of Balkhi (0.547), Hashtnagri (0.533) and Michni deficiency observed among the population. (0.561) sheep populations of Pakistan, where this study reports slightly higher genetic diversity when com- From this study it can be concluded that Pakistani pared to the Hashtnagri population. sheep breeds showed a high genetic diversity and the genotyping through microsatellites is an effective tool Kail sheep population of Pakistan showed slightly for the genetic evaluation of different breeds. This mi- lower numbers for heterozygosity measurements in crosatellite panel can be used on other domestic and comparison to the Buchi and Hashtnagri sheep popula- wild sheep breeds of Pakistan. The difference in the tions reported here 53 . Inbreeding measurements also values of this study with other reports may be due to linked to selection within and across breeds where, FST the difference of markers, breeding plans, laboratory used to indicate subdivisions in population. A value of techniques and sample size. FST around 0.05 depicts moderate differentiation and <0.05 indicate lower differentiation between popula- The results will help the future researchers as ba- tions/breeds 54 . Mean values of FIS (heterozygote defi- sic guide for better understanding of genetic relation- cit) were -0.515 for goat breeds and -0.431 for sheep ships and breed differences in sheep and goat breeds for breeds are low representing low inbreeding coefficient making future breeding policies and conservation plan between breeds which is obvious from the home track to protect any loss in allelic variation in goat and sheep distance of the studied breeds in contrast to the positive breeds in the country. FIS values (high level of inbreeding) in Italian sheep breeds 55 . Acknowledgements. We would like to thank High- er Education Commission of Pakistan for funding the Significant amount of inbreeding has been ob- sheep and goat genetic diversity project (Nº 20-872) served on sheep and goat diversity project in marginal and Livestock and Dairy Development Departments areas carried out by Eu-Econogene project 56, 57 . Gen- of the Punjab and Khyber Pakhtunkhwa for helping in erally marginal areas are characterized by small herds sample collection. and improper breeding strategies lead to the high in- breeding, ultimately pave way to the fragmentation References. El artículo incluye 64 citas bibliográ- and isolation at the different breed levels 58 . In general, ficas que no se insertaron por su larga extensión. Los low level of inbreeding (<0.10) can be a result of lower interesados pueden solicitarlas a faiz.marikar@ful- levels of mating between closely related individuals in brightmail.org field conditions 59 . Polymorphism information content (PIC) is anoth- er good indicator of the efficiency of marker for genetic
Revista Veterinaria Rev vet 30 (1): 59-62, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Prevalencia de coccidios en pollos de traspatio de Salamanca (Guanajuato, México) Ramos, D.F.; Sahagún, C.A.; Avila, R.A. División de Ciencias de la Vida , Departamento de Veterinaria y Zootecnia, Universidad de Guanajuato, Campus Irapuato-Salamanca, México. E-mail: [email protected] Resumen Ramos, D.F.; Sahagún, C.A.; Avila, R.A.: Prevalencia de coccidios en pollos de traspatio de Salamanca (Guanajuato, México). Rev. Vet. 30: 1, 59-62, 2019. El objetivo de la inves- tigación fue determinar la prevalencia de coccidios en pollos de un municipio mexicano. Se tomaron muestras de 97 aves en 17 localidades y se recabaron datos para conocer la cantidad de aves por unidad, el tipo de alimentación, la causa de muerte, la época de mayor mortali- dad y la realización de controles antiparasitarios en las 40 unidades visitadas. Se confirmó la presencia de ooquistes de Eimeria sp en 65 muestras, con prevalencia del 67,01% y niveles de infestación bajos, medios y altos (46, 10 y 9 casos). Hubo correlación entre hembras versus control de parásitos (p≤0,05), nivel de infestación versus causa de muerte (p≤0,05) y machos versus época de muerte (p≤0,05). El odds ratio indicó que las hembras son más susceptibles que los machos a contraer coccidios (1,87, p=0,1883). Se concluye que la prevalencia del protozoario en aves de unidades de traspatios en Salamanca es alta y está relacionada con el control parasitario, la época del año y el sexo de las aves. Además, comparadas con los machos, las hembras fueron más susceptibles a contraer coccidios. Palabras clave: pollo, Eimeria sp, prevalencia, control parasitario. Abstract Ramos, D.F.; Sahagún, C.A.; Avila, R.A.: Prevalence of coccidia in backyard chickens of Salamanca (Guanajuato, México). Rev. Vet. 30: 1, 59-62, 2019. The aim of this research was to determine the prevalence of coccidia in chickens from a Mexican municipality. Samples from 97 birds were collected in 17 locations and data regarding number of chickens per lo- cation, feeding type, cause of death, seasonal concentration of deaths, and parasitic control of the 40 units visited. The presence of Eimeria sp oocysts was detected in 65 samples with a prevalence of 67.01%, with low, medium and high infestation levels (46, 10 and 9 cases). There was correlation between females versus parasite control (p≤0.05), levels of oocysts vs cause of death (p≤0.05), and male vs period of death (p≤0.05). Odds ratio indicates that females were more susceptible than the males to get coccidia (1.87, p=0.1883). It can be con- cluded that the prevalence of coccidia in chickens of backyard units in Salamanca is high, and that it is related to the control of parasites, time of the year, and sex of the birds. In addi- tion, females were more susceptible to infestation compared to males. Key words: chicken, Eimeria sp, prevalence, parasite control. INTRODUCCIÓN intestino de las aves (un solo huésped), donde desarro- lla su ciclo biológico. Las aves se infectan al ingerir En las unidades de traspatio se obtienen productos ooquistes del suelo, que invaden su intestino como alimenticios para consumo humano y animal. Los ex- ooquistes, especialmente en las criptas de Lieberkühn. cedentes se venden para ayudar al sustento familiar 10 . Los signos clínicos dependen de la cantidad de ooquis- Las características que las distinguen son carencia de tes ingeridos, así como del estado de salud de las aves, infraestructura y manejo deficiente de los animales. que en los casos severos pueden morir 12, 16, 17 . Como resultado, las condiciones de higiene son preca- rias y las enfermedades proliferan 5 . Diferentes estudios se han realizado para estable- cer la prevalencia de Eimeria sp en aves domésticas La coccidiosis es una enfermedad parasitaria cau- de varias regiones del mundo, con resultados variables. sada por un protozoario cosmopolita de la familia Ei- Sucesivamente fueron reportadas prevalencias en Chi- meriidae, género Eimeria 18 . Este parásito vive en el le (76,5%) 2 , México (53%) 17 , Nigeria (33,3%) 7 y Ve- nezuela (17%) 4 . Los investigadores indicaron que los Recibido: 20 noviembre 2018 / Aceptado: 8 febrero 2019
60 Ramos, D.F. et al.: Coccidios en aves. Rev. Vet. 30: 1, 59-62, 2019 resultados varían de acuerdo a la temperatura ambiente, taobjetos, observándose la preparación a 100 aumentos humedad relativa y lugar de estudio. para identificar presencia o ausencia de ooquistes. México es un país privilegiado debido a su biodi- Técnica de McMaster. A las muestras positivas a versidad, la cual se debe a su posición biogeográfica, Eimeria sp se les determinó la cantidad de ooquistes tipo de territorio y variedad climática 15, 17 . Tales ca- por gramo con la técnica de McMaster 3 . Dos gramos racterísticas son ideales para desarrollar e incrementar de heces se colocaron en 28 ml de solución salina sa- la diversidad biológica, aunque también posibilita la turada, mezclándose y luego filtrándose través de un aparición de enfermedades. El suelo, la humedad y la colador plástico. Con una muestra (1 ml) de la parte temperatura ambiente son factores que pueden aumen- superior de la solución se llenaron los compartimientos tar el desarrollo de parásitos. de la cámara de McMaster. La muestra se dejó reposar durante 5 minutos, examinándose a 100 aumentos para El objetivo de la investigación fue determinar la contar los ooquistes presentes en cada carril y determi- prevalencia de Eimeria sp en aves de traspatio en el nar la cantidad de ooquistes totales 3, 20 . Municipio de Salamanca (Guanajuato, México). Análisis estadístico. Se determinó la prevalencia MATERIAL Y MÉTODOS de individuos positivos de la población estudiada, en el periodo de tiempo (un año). La información obtenida Área de estudio. La investigación se realizó en en las encuestas se correlacionó usando una escala no- el municipio de Salamanca (Guanajuato, México), el minal, considerando el nivel de significancia de p<0,05. cual posee una extensión territorial de 744 km2 dis- El odds ratio se obtuvo por el método convencional. tribuida en 256 localidades, ubicado en 20°34′13″N, 101°11′50″W, a 1,721 msnm. La temperatura promedio RESULTADOS Y DISCUSIÓN anual de la región es de 19°C con precipitación pluvial anual de 750 mm. Tamaño de la muestra. El tamaño de la muestra Presencia de ooquistes de Eimeria sp. En la Ta- se determinó con el método de poblaciones infinitas 1 . bla 1 se presentan, para cada nivel de infestación (hasta Fórmula: N = Z2 x p x q / d2. Donde: N = tamaño de la 10, 11-20 y 21 o más ooquistes) 7 , la cantidad de aves muestra, Z = nivel de confianza (Z = 0.5 = 1.96), p = portadoras de ooquistes de Eimeria sp y la prevalencia probabilidad = 0.5, q = (1-p) y d = nivel de presión: 10% (%) en machos y hembras. La prevalencia total fue de = 0.1. Entonces N = (1.96)2 x 0.5 x 0.5 / (0.1)2 = 97 aves. 67.01% (machos 25.77% y hembras 41.24%). La elevada presencia de coccidios implica posibilidad de pérdidas Muestras biológicas. Para colectar las heces, las económicas debido a la baja productividad de los ani- aves se colocaron en una jaula de 50 x 60 cm con piso males y en casos severos, su muerte. de malla. En la parte inferior se colocó una bolsa plás- Los resultados de la investigación indicaron que tica. Cuando las aves defecaron, las excretas se colecta- en Guanajuato la presencia de coccidios fue mayor que ron para almacenarse con formol al 10% (relación 1:1), la registrada en otras regiones del país, que acusaron rotuladas con la fecha, la localidad de procedencia y el niveles de 17 y 53% 4, 17 . En unidades comerciales se sexo del animal, conservándose en refrigeración hasta reportaron mayores incidencias (75,6 y 92,3%) 2, 11 . La su análisis 6 . Todos los procedimientos descritos en la mayor prevalencia en ejemplares de producción inten- investigación respetan los lineamientos establecidos siva quizás se deba a la mayor cantidad de aves y su ma- para el manejo de los animales. nejo, dadas las condiciones diferentes a las presentadas en aves de traspatio. Recolección de la información. Durante la visita a En la región, el desarrollo de enfermedades para- la unidad productiva se colectó información entrevis- sitarias puede ocurrir por la época del año, debido a tando al encargado para conocer el número de aves, su la modificación de las condiciones ambientales; gene- alimentación; destino comercial, casero o su combina- ralmente se reportan prevalencias bajas en épocas de ción, causa común de muerte de las aves; enfermedad o estiaje (sequía) y altas en épocas de lluvia 4, 8 . descuido, época del año con mayor mortalidad (exceso La alta humedad del ambiente (90%) prolonga la de calor, lluvia o frío) y finalmente se indagó acerca de subsistencia de los ooquistes (52 días), provocando ma- la realización de controles antiparasitarios. yor reinfección de las aves. Con menor humedad (60%) la vida de los ooquistes es menor a 30 días 13 . En la pre- Diagnóstico de ooquistes de Eimeria sp. Para de- sente experiencia, la humedad registró alta incidencia terminar la presencia de ooquistes de Eimeria sp en he- durante los muestreos, incrementando la prevalencia ces se uso la técnica de flotación por centrifugación 3, 18 . de ooquistes en las aves. Dos gramos de heces se colocaron en una solución sali- na sobresaturada, la cual fue centrifugada durante seis Eimeria sp vs unidades de traspatio. En la Tabla minutos a 1.000 rpm. Luego, dos gotas de la parte supe- 2 se muestra la correlación entre aves positivas, nive- rior de la solución obtenida se colocaron sobre un por- les de infestación en hembras y machos con cantidad de aves en la unidad, tipo de alimentación, causa de
Ramos, D.F. et al.: Coccidios en aves. Rev. Vet. 30: 1, 59-62, 2019 61 Tabla 1. Nivel de infestación, aves positivas a ooquistes de Eime- medad 4 . Las aves infectadas eliminan ria sp y prevalencia en machos y hembras. ooquistes continuamente y los ingieren al nivel de machos positivos total prevalencia (%) momento de tomar sus alimentos del suelo infestación contaminado 9 . 20 hembras 46 machos hembras total A 2 26 10 20,62 26,80 47,42 La prevalencia de coccidios se ha rela- B 3 8 9 2,06 8,25 10,31 cionado con el sexo de sus hospederos, con- C 25 6 65 3,09 6,19 9,28 siderando a las hembras más susceptibles 9 total 40 25,77 41,24 67,01 . Además, la humedad favorece la esporula- ción de los ooquistes, por lo cual en época A = 1 a 10 ooquistes, B = 11 a 20 ooquistes, C = 21 o más ooquistes 7 . de lluvias hay mayor infestación de hem- bras y machos, explicando los resultados de Tabla 2. Correlación entre hembras y machos con cantidad de la presente investigación. aves, tipo de alimentación, ocurrencia y época de muerte y con- trol de parásitos. Odds ratio. En la Tabla 3 se presentan niveles cantidad alimentación muerte época control los odds ratio de Eimeria sp en hembras y hembras 0,32417 machos de traspatio. Surge que las hembras -0,23148 0,01906 0,02552 -0,05594 0,0441 poseen más probabilidad de albergar cocci- nivel I dios (1,87) comparada con los machos (chi -0,22621 -0,10564 -0,01375 -0,10616 0,15998 cuadrado = 1,7311, probabilidad = 0,1883, nivel II -0,29395 -0,06757 0,35377 -0,02587 -0,15323 n = 97). nivel III 0,00641 0,03704 0,0271 0,08792 Odds ratio es una medida de asocia- machos -0,07583 -0,00664 0,3296 0,02256 0,07767 nivel I -0,07283 -0,0202 0,0405 0,18428 ción expresada en términos de posibilidad 0,01936 0,33454 de ocurrencia de un evento en individuos 0,0374 que cuentan con el factor de riesgo, compa- -0,19147 0,22503 rado con aquellos que no lo presentan. En las hembras, el sexo está relacionado con la mortalidad causada por diferentes enferme- nivel II -0,00735 0,00772 -0,11658 0,17589 0,16129 dades. Los resultados aquí obtenidos indi- can que las hembras poseen mayor probabi- nivel III 0,02227 0,05266 0,15534 -0,02352 -0,09165 lidad de contraer coccidios, comparada con los machos. Resultados similares han sido Cifras cursivas indican correlación significativa (p≤0,05). Nivel I: aves reportados en diferentes investigaciones 9, 14 . con 1 a 10 ooquistes, Nivel II: con 11 a 20 ooquistes y Nivel III: más de El nivel de infestación en nuestro estudio se 20 ooquistes. puede atribuir al clima de la zona y a la épo- ca del año en que se realizó el estudio 7, 9, 19 . Tabla 3. Odds ratio de prevalencia de Eimeria sp en Se concluye que la prevalencia de coccidios en po- hembras y machos en unidades de traspatio. llos de traspatio de Salamanca (Guanajuato, México) es hembra casos controles IC alta (67,01%) y que las hembras son más susceptibles a macho 40 (61,54%) 24 (75%) 0,2076-1,3699 contraer la enfermedad. Por otra parte, mayor cantidad 25 (38,46%) 8 (25%) 0,1795-1,4799 de machos muere en época de lluvias. total 65 32 REFERENCIAS IC = intervalo de confianza del 95% 1. Aguilar BS. 2005. Fórmulas para el cálculo de la muestra muerte, época de muerte y control de parásitos. Hubo en investigaciones de salud. Salud en Tabasco 11: 333-338. correlación (p<0,05) entre hembras positivas y control 2. Alcaíno H, González JP, Fredes F, Gorman T. 2002. de parásitos, mortalidad en hembras con nivel de in- Coccidias aviares de gallineros industriales de Chile. Pa- festación II y III (p<0,05) y –en machos– correlación rasitol Latinoam 57: 34-39. (p<0,05) con la época de su muerte. 3. Besné MA, Figueroa CJ, Quiroz RH, Ramírez GA, Los datos categóricos se utilizan para medir una Ramos ME. 2011. Manual de prácticas de laboratorio de variable a una escala determinada y permiten clasificar parasitología. Ed. Departamento de Parasitología de la la información en un número limitado de grupos. En UNAM, México, p. 39-45. la presente investigación se compararon los niveles de 4. Brown E, Díaz CD, Moreno L, Gotopo A. 2006. Pre- infestación con las características de la unidad produc- valencia de Eimeria sp en gallinas ponedoras de granjas tiva. Los resultados indicaron mayores prevalencias de pertenecientes a tres municipios del estado Trujillo, Vene- coccidiosis en las unidades de producción que no con- zuela. Rev Cient 16: 579-584. trolaban las parasitosis. 5. Caicedo RE, Garita JL, Paz NM. 2011. Salud animal de Realizar periódicamente el control de parásitos una cuenca lechera bajo el sistema de traspatio, Puebla, puede ayudar a disminuir la prevalencia de la enfer- México. Acta Iberoamer Conserv Anim (AICA) 1: 323-326.
62 Ramos, D.F. et al.: Coccidios en aves. Rev. Vet. 30: 1, 59-62, 2019 6. Coffin DL. 1959. Laboratorio Clínico en Medicina Vete- 14. Oljira D, Melaku A, Bogale B. 2012. Prevalence and rinaria, 3ra. ed., Cornell University, Ithaca (New York), p. risk factors of coccidiosis in poultry farms in and around 23-24. Ambo Town, Western Ethiopia. Am-Euras J Sci Res 7: 146-149. 7. Jatau ID et al. 2014. Prevalence of coccidia infection and preponderance Eimeria species in free range indigenous 15. Ramamoorthy TP, Bye R, Lot AJ. 1998. Diversidad and intensively managed exotic chickens during hot-weet biológica de México: orígenes y distribución, Ed. Instituto season in Zaria, Nigeria. Asian J Poult Sci 6: 79-88. de Biología, Universidad Nacional Autónoma de México, p. 792. 8. Kaboundi K, Umar S, Tanveer MM. 2016. Prevalence of coccidiosis in free-range chiken in Sidi Thabet, Tunisa. 16. Rodríguez VR, Cob LA, Domínguez JL. 2001. Frecuen- Scientifica 1-6. cia de parásitos gastrointestinales en animales domésticos diagnosticados en Yucatán, México. Rev Biomed 12: 19-25. 9. Lawal JR et al. 2016. Dry season prevalence of avian coc- cidia infection in domesticated chickens (Gallus domesti- 17. Sarukhán J et al. 2009. Capital natural de México: cono- cus) in Jere Council, Borno state, Nigeria. J Anim Sci Vet cimiento actual, evaluación y perspectivas de sustentabi- Med 1: 67-73. lidad. Ed. Comisión Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad, México, p.100. 10. López JL, Damián MA, Álvarez F, Parra F, Zuluaga GP. 2018. La economía de traspatio como estrategia de 18. Shapiro LS. 2010. Pathology and parasitology for veteri- supervivencia en San Nicolás de los Ranchos, Puebla, Mé- nary technicians, 2nd edition, Delmar (USA), p. 215-228. xico. Revista de Geografía Agrícola 48: 49-63. 19. Yousuf M, Tak H, Gul N. 2013. Prevalence of eimeriosis 11. Martínes NS, Bohórquez N. 1994. Prevalence and associ- in domestic/free range chickens of South Kashmir, India. ate factors to cocidiosis in broilers. Rev Científica 4: 25-36. Int J Curr Res 5: 1606-1608. 12. Merk KC, Kahn M. 2007. Manual Merck de Veterinaria, 20. Zajac A, Conboy G. 2012. Veterinary Clinical Parasitol- 6ta ed., Océano, Madrid, p. 2169-2171. ogy, 8th ed., Wiley-Blackwel (USA), p. 9-11. 13. Moreno DR, Ibarra VF. 2002. Algunos aspectos de la coccidiosis aviar en la zona de Coatzacualcos, Veracruz, México. Vet Méx 33: 63-71. Asociación Cooperadora de la Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional del Nordeste Personería Jurídica Nº 647/92 y 912/00 Sargento Cabral 2139 3400 Corrientes Argentina La Asociación Cooperadora de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UNNE fue constituida el 10 de diciembre del año 1991 como entidad de bien público, con el objeto de promover y coadyuvar las actividades científicas, educativas y culturales relacionadas con las Ciencias Veterinarias. En tal sentido, implementa acciones para colaborar con la enseñanza, extensión, actualización y difusión científica que realiza dicha casa de estudios. Beneficios que brinda a sus asociados: • Fotocopias con descuentos especiales en la Fotocopiadora Copias.com que funciona dentro del predio de la Facultad de Ciencias Veterinarias. • Descuentos para la adquisición de libros de distintas editoriales. • Descuentos especiales en otros rubros. Tel. (0379) 4425753 interno 186 • Página Web www.vet.unne.edu.ar • E-mail: [email protected]
Revista Veterinaria Rev vet 30 (1): 63-67, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Riesgos ocupacionales en estudiantes de veterinaria en Argentina Tarabla, H.D.1; Molineri, A.I.2,3; Robin, H.4; Signorini, M.L.1,2 1Fac. Cs. Veterinarias, Univ.Nac.Litoral, Esperanza, Santa Fe, Argentina. 2CONICET, INTA Rafaela, 3UNRaf, 4Consejo Interuniv.Nacional. E-mail: [email protected] Resumen Tarabla, H.D.; Molineri, A.I.; Robin, H.; Signorini, M.L.: Riesgos ocupacionales en estudiantes de veterinaria en Argentina. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019. La práctica vete- rinaria expone a los individuos a una gran variedad de accidentes ocupacionales (AO) y enfermedades profesionales. Los objetivos de este trabajo fueron estimar: a) la frecuencia de AO y zoonosis, b) la percepción de los riesgos ocupacionales (PR), c) el uso de elementos de protección personal (EPP) y d) las asociaciones con potenciales factores de riesgo en es- tudiantes de veterinaria de Argentina. Se efectuó un estudio observacional transversal en n= 778 estudiantes de 13 carreras de Veterinaria ubicadas en nueve provincias argentinas. Los datos fueron recolectados mediante cuestionario estructurado auto-administrado. El análisis estadístico incluyó χ2, t de Student y correlaciones de Pearson y de Spearman. Dos tercios (67,5%) había sufrido AO en la práctica con grandes y pequeños animales, con gran variabi- lidad entre universidades (p= 0,002). Los AO más frecuentes estuvieron vinculados con la exposición solar excesiva, los animales y los elementos punzo-cortantes. Aunque la atención clínica fue percibida como de riesgo medio o bajo, los AO se produjeron mayoritariamente en dichas instancias. Las lesiones (punzaduras, cortes, rasguños y mordeduras) estuvieron localizadas principalmente en extremidades superiores. El 6% de los estudiantes había sido diagnosticado con alguna zoonosis, siendo la dermatofitosis la más frecuente (2,8%). A ma- yor antigüedad como estudiante de veterinaria, mayores fueron las PR (p<0,005) y la fre- cuencia de AO (p<0,034). Los guantes fueron los EPP más utilizados. En algunas prácticas, su uso fue más frecuente en las mujeres (p<0,03). No hubo asociaciones entre la frecuencia de uso de EPP y las PR o los años como estudiantes de veterinaria. Se concluye que los contenidos sobre seguridad ocupacional deberían ser ofrecidos desde los primeros años de la carrera. Esta práctica, unida al esfuerzo de los docentes para que los alumnos observen el cumplimiento de prácticas seguras podrían modificar las actitudes, reduciendo los riesgos de AO y zoonosis entre los estudiantes. Palabras clave: estudiantes, veterinaria, salud ocupacional, exposición, riesgos. Abstract Tarabla, H.D.; Molineri, A.I.; Robin, H.; Signorini, M.L.: Occupational risks in vet- erinary students in Argentina. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019. Veterinary practice exposes individuals to a wide variety of occupational accidents (OA) and occupational diseases. The objectives of this work were to estimate: a) the frequency of OA and zoonoses, b) the percep- tion of occupational risks (RP), c) the use of personal protective equipment (PPE) and d) the association with potential risk factors in veterinary students of Argentina. A cross-sectional observational study was carried out in n=778 students of 13 veterinary careers located in nine Argentine provinces. The data were collected through a structured self-administered questionnaire. Statistical analysis included χ2, Student’s t test and Pearson’s and Spearman’s correlations. Two thirds (67.5%) had suffered OA in large and small animal practice, with great variability among universities (p=0.002). The most frequent accidents were linked to excessive sun exposure, animals and sharp instruments. Although clinical examinations were perceived as medium or low risk activities, OA occurred mostly in these instances. Lesions were located mostly in the upper limbs. Six percent of students had been diagnosed with a zoonosis, being dermatophytosis (2.8%) the most frequent. The higher the number of years as a veterinary student, the higher the RP (p<0.005) and the frequency of OA (p<0.034). Gloves were the most used PPE. In some practices, women used PPE more frequently than men (p<0.03). There were no associations between the frequency of use of PPE and RP or number of years as a veterinary student. It is concluded that occupational safety practices Recibido: 16 abril 2018 / Aceptado: 4 junio 2018
64 Tarabla H.D. et al.: Riesgos en estudiantes de veterinaria. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019 should be offered from the first years of the career. This practice, along with teachers’ efforts to enforce students’ observation of safety practices could modify attitudes, reducing the risks of OA and zoonoses among students. Key words: students, veterinary, occupational health, exposure, risks. INTRODUCCIÓN MATERIAL Y MÉTODOS Los estudiantes de veterinaria se exponen tempra- Se efectuó un estudio observacional transversal en namente a peligros biológicos, físicos, ergonómicos n=778 estudiantes avanzados de 13 carreras de veteri- y radiaciones. Los ingresantes a la carrera tienen, en naria dependientes de universidades estatales y priva- general, bajos niveles de conocimientos sobre zoonosis das, ubicadas en nueve provincias argentinas. y los alumnos cursantes pueden tener hábitos y com- portamientos inapropiados para su prevención 24, 29 . La El tamaño de la muestra se correspondió con una carrera tiene una carga creciente de lecciones prácticas frecuencia esperada del 50%, un nivel de confianza del y la última fase consiste en guardias y trabajos hospi- 99% y un error absoluto del 3,5%. Los datos fueron talarios donde las actividades médicas son efectuadas recolectados mediante cuestionarios estructurados y por los estudiantes. autoadministrados, previamente a la iniciación de jor- nadas de capacitación sobre riesgos laborales en vete- Los accidentes, los brotes de enfermedades y las rinaria. infecciones zoonóticas son frecuentes en los hospita- les-escuela 6, 26 , donde las instalaciones pueden tener En todos los casos, las instituciones sedes de las deficiencias en bioseguridad y las superficies de con- jornadas determinaron las cohortes de estudiantes que tacto pueden estar contaminadas con patógenos zoonó- tenían obligatoriedad de asistencia. Previo a la distri- ticos 5, 20, 45 . bución del cuestionario, se explicó la finalidad e im- portancia de la encuesta, poniéndose énfasis en que el Por otra parte, las actividades realizadas al aire li- interés de las mismas no estaba en las actividades o bre y el incremento de los contactos con los pacientes actitudes de ningún estudiante en particular, sino en las en las etapas avanzadas de la carrera podrían aumentar frecuencias a nivel poblacional, por lo cual las respues- el riesgo de accidentes ocupacionales (AO) y enferme- tas debían ser anónimas. dades profesionales. Se tomaron cuatro características de los encuesta- Con respecto a los AO, los datos publicados en re- dos para relacionarlas con la ocurrencia de zoonosis o vistas indexadas son escasos e involucran la frecuen- AO, la percepción de los riesgos y el uso de elementos cia de accidentes con elementos punzo-cortantes 34, 40 de protección (sexo, edad, antigüedad como estudiante y equinos 33 . Muy diferente es la situación relativa a de veterinaria y facultad donde cursaba). “Percepción las zoonosis. En una extensiva revisión bibliográfica del riesgo” fue definida como “la noción de la probabi- sobre estas enfermedades en estudiantes de veterina- lidad que una actividad pueda causar daño en la salud o ria efectuada recientemente, un 45% de los artículos integridad física” del encuestado (OMS, 2002). describían casos individuales o brotes y el restante 55% resultados de relevamientos serológicos. Estas percepciones y la frecuencia de uso de EPP fueron estimadas mediante escalas ordinales. El análi- Los casos fueron causados por bacterias (63%), pa- sis incluyó χ2, t de Student y correlaciones de Pearson rásitos (19%), virus (15%) y hongos (3%). Aunque las y de Spearman. referencias incluían 24 países en los últimos 55 años, el 66% provenía de países de Europa y América del RESULTADOS Norte 36 . Por otra parte, las publicaciones sobre la fre- cuencia de enfermedades alérgicas también han sido El 52,8% de los entrevistados eran mujeres. En pro- originadas en países europeos 22, 35 . En el resto del con- medio, los estudiantes tenían 23,9±3,2 años de edad y tinente americano, las referencias sobre zoonosis en habían permanecido 6,0±2,5 años en la carrera de vete- estudiantes se limitan a relevamientos serológicos de rinaria. Ambas variables estuvieron altamente correla- anticuerpos contra brucelosis, leptospirosis, toxoplas- cionadas (r=0,77, p<0,001), por lo cual sólo se incluyó mosis y tripanosomiasis 7-9, 19, 21, 24, 27, 31, 32, 41, 42 . la mencionada en segundo término en la búsqueda de asociaciones con otras variables. Dado el alto nivel de enfermedades profesionales y AO registrados en la práctica veterinaria en general No hubo diferencias entre sexos en la cantidad de y en nuestro país en particular 2, 18, se planteó este tra- años transcurridos como estudiantes de la carrera. El bajo con el objetivo de estimar la frecuencia de AO y 67,5% había sufrido AO, con gran variabilidad entre zoonosis, la percepción de riesgos (PR), y el uso de ele- universidades (p=0,002). Los accidentes más frecuen- mentos de protección personal (EPP) en estudiantes de tes estuvieron vinculados con quemaduras y golpes de veterinaria de Argentina, así como las asociaciones con calor por exposición solar excesiva, rasguños y morde- potenciales factores de riesgo. duras de los animales, así como heridas con elementos punzo-cortantes (Figura 1).
Tarabla H.D. et al.: Riesgos en estudiantes de veterinaria. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019 65 Tabla 1. Frecuencia de estudiantes que sufrieron ac- Tabla 2. Percepción de los riesgos ocupacionales en cidentes ocupacionales de acuerdo a la actividad y al estudiantes (n=778). animal involucrado (n=778 estudiantes). percepción del riesgo (%) alto medio bajo actividad animal total especies y actividades evaluadas 23,6 63,8 12,6 bovino equino canino felino otros Bovina cirugía 4,9 3,0 11,6 4,2 0,3 24,0 Equina 30,7 56 13,3 necropsia 5,7 1,90 3,2 0,5 1,4 12,7 especie Porcina 10,5 65,5 24 rev.clínica 9,8 7,7 10,3 8,1 2,8 38,7 Ovina 6,7 55 38,3 vacunación 12,4 1,8 7,8 4,6 0,4 27,0 pequeñas especies 9,0 60,3 30,7 tratamiento 5,0 3,7 6,2 3,1 1,3 19,3 aves de corral 6,2 36,4 57,4 otras 7,7 3,2 2,2 1,0 1,9 16,0 tacto rectal 38,2 50,9 10,9 total 45,5 21,3 41,3 21,5 6,1 * atención de parto 50,8 37,8 11,4 *La frecuencia supera el 100% dado que hubo estudiantes Cirugía 32,7 47,9 19,4 que sufrieron dos o más accidentes con más de una especie. actividad Necropsia 69,0 22,2 8,8 76,0 18,9 5,1 manipulación de aborto Quienes habían sufrido AO habían permanecido vacunación antibrucélica 54,2 32,2 12,6 más años como estudiantes (p=0,034). Los accidentes podología bovina 20,8 45,6 27,6 se produjeron mayoritariamente al trabajar con bovinos y caninos. Aproximadamente cuatro de cada seis estu- nente a la vacunación antibrucélica, fueron mayores en diantes sufrieron AO durante la revisión clínica de los mujeres que en hombres (p<0,01). pacientes (Tabla 1). El uso de EPP “siempre” varió entre actividades, Los varones sufrieron atropellamientos por anima- siendo los guantes los elementos más utilizados (Figu- les con mayor frecuencia que las mujeres (p=0,005), ra 4). Las mujeres usaron “siempre” ropa específica en mientras que ellas padecieron más rasguños, pinchazos, cirugías y partos, así como guantes en cirugías, con contusiones y contracturas (p<0,05). Las lesiones estu- mayor frecuencia que los hombres (p<0,03). vieron localizadas mayoritariamente en extremidades No hubo asociaciones entre la frecuencia de uso de superiores (Figura 2). EPP y las percepciones de los riesgos o los años como El 6% de los estudiantes había sido diagnosticado estudiantes de veterinaria. como positivo a alguna zoonosis (dermatofitosis 2,8%, brucelosis 1,2%, toxoplasmosis 1,2%, sarna sarcóptica DISCUSIÓN 0,9%, carbunco 0,1%). Uno de los encuestados comu- nicó haber padecido dos enfermedades (dermatofitosis Más de dos tercios de los entrevistados había teni- y brucelosis). No hubo asociaciones entre estos diag- do algún AO y, como consecuencia, más de la mitad nósticos y la universidad, el sexo o la antigüedad como había sufrido lesiones. Al igual que en profesionales de estudiante de veterinaria. grandes especies, la exposición solar excesiva fue muy La frecuencia de estudiantes que percibieron una frecuente entre los estudiantes relevados. actividad de riesgo alto fue mayor en la manipulación de abortos y en las necropsias, especialmente en las especies bovina y equina (Tabla 2). Aunque las correlaciones entre las percepciones en las distintas acti- vidades fueron significativas, los coeficientes fueron relativamente bajos. Los valores más altos se encon- traron en la manipulación de abor- tos y la atención de partos (r=0,41), necropsias (r=0,35) y vacunación antibrucélica (r=0,34). A mayor an- tigüedad como estudiante de vete- rinaria, mayores fueron las percep- ciones de los riesgos ocupacionales (p=0,005). Las atenciones clínicas fueron percibidas mayoritariamente como de riesgo medio o bajo (Figura 3). Figura 1. Frecuencia de estudiantes que sufrieron accidentes ocupaciona- Estas percepciones, así como la ati- les y características de los accidentes (n=778 estudiantes).
66 Tarabla H.D. et al.: Riesgos en estudiantes de veterinaria. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019 Estos eventos causaron epi- sodios agudos, pero la exposición crónica a rayos ultravioletas (UV) en veterinarios rurales es un evento aún no abordado. El trabajo al aire libre expone a niveles de UV más altos que los límites recomendados, aumentando el riesgo de cáncer de piel 4, 37 . Esta probabilidad es tan alta, que algunos autores consideran que hay suficiente evidencia para consi- derarla una enfermedad ocupacio- nal 12 . Si bien en este trabajo la ex- posición a rayos UV estuvo asociada a eventos agudos, la alta frecuencia de estudiantes afectados indica au- sencia de prácticas seguras. Aunque quienes trabajan al aire libre consideran que la protección es una responsabilidad de cada in- dividuo 38 , en general, no adoptan medidas preventivas 16, 17 . Coinci- dentemente a lo hallado en la joven Figura 2. Frecuencia de estudiantes que sufrieron accidentes ocupaciona- población encuestada, la ausencia les de acuerdo a la localización de las lesiones (n=778 estudiantes). de cuidados ante las condiciones climáticas en veterinarios de grandes animales es más una relación con el período de exposición. Sin embargo, frecuente entre los profesionales de menor edad. esto no aumentó el uso de EPP, reafirmando que la ex- Un segundo aspecto de importancia fueron las he- periencia no es un factor de protección 43 y que las pre- ridas por elementos punzo-cortantes. Las agujas, los cauciones se suelen tomar a posteriori de la ocurrencia bisturís y los cuchillos son peligros que frecuentemen- del accidente o enfermedad 44 . te ocasionan AO entre los estudiantes 40 . Las heridas Aunque el riesgo de lesiones aumenta con la ex- son causadas principalmente por agujas hipodérmicas posición acumulada, los veterinarios con mayor anti- y se localizan mayoritariamente en las extremidades güedad laboral usan EPP en actividades médicas con superiores 2, 10, 25 . menor frecuencia que los más jóvenes. Los estudios Los estudiantes tienen la tendencia de volver a tapar observacionales transversales no permiten realizar in- la aguja usada 40 utilizando ambas manos 34 . Esta prácti- ferencias sobre causalidad, por lo que su mayor utilidad ca, junto a la carencia de recipientes para su disposición no es la de proveer respuestas sino la de generar nuevas segura, incrementan la probabilidad de heridas 14, 46 . hipótesis. Los AO se produjeron mayoritariamente durante las La posibilidad que las conclusiones sean sesgadas revisiones clínicas en bovinos y caninos. Paradójicamen- por la presencia de factores de confusión o interacción, te, estas actividades son percibidas como de riesgo me- es siempre un evento latente. A modo de ejemplo, la dio o bajo. Las PR más elevadas se observaron en equi- frecuencia de brucelosis estuvo asociada al sexo y la nos (30,7%) y bovinos (23,7%), cifras que descendieron a edad en veterinarios rurales de la Provincia de Santa alrededor del 10% en pequeñas especies y porcinos. Fe 31 , pero en un análisis multivariado se demostró que Las mordeduras y rasguños, sin embargo, estuvie- en realidad, las mujeres eran más jóvenes que los hom- ron entre los AO más frecuentes y los caninos entre las bres y que la asociación se explicaba simplemente por especies más involucradas. Estas frecuencias pueden es- un mayor período de exposición de estos últimos. tar relacionadas a las especies animales a las que se ven En el presente estudio, quienes habían sufrido AO expuestos los estudiantes en las prácticas hospitalarias. habían permanecido más años como estudiantes, exis- Aunque algunos pacientes conllevan un mayor tiendo diferencias en el tipo de accidente entre sexos. riesgo por su agresividad, peso o masa corporal, la La posibilidad de que alguna de ellas haya actuado frecuencia de AO en profesionales argentinos es muy como factor de confusión fue descartada ante la inexis- importante tanto en grandes como en pequeñas espe- tencia de asociación estadística entre permanencia en cies 18 . El manejo brusco por parte de los estudiantes la carrera y sexo. y el dolor en los pacientes, han sido identificados como La gran mayoría de los veterinarios no considera factores de riesgo de mordeduras de perros 43 . que su propia seguridad esté en riesgo en sus prácticas Por otra parte, la mayor permanencia en la carrera, diarias, lo cual puede representar una amenaza en tér- correlaciona con la mayor frecuencia de AO, indicando minos de salud pública 30 . Por su parte, los estudiantes
Tarabla H.D. et al.: Riesgos en estudiantes de veterinaria. Rev. Vet. 30: 1, 63-67, 2019 67 Figura 3. Percepción de los riesgos ocupacionales en dades tuvieron coeficientes relativamente bajos y no se las revisiones clínicas de acuerdo a la especie animal detectaron asociaciones entre el uso de EPP y estas per- (n=778). cepciones. Ambas variables tuvieron valores más altos en mujeres que hombres, dado que estos últimos, en Figura 4. Frecuencia de estudiantes que usaron ele- general tienden a minimizar los riesgos para la salud y mentos de protección personal de acuerdo a la activi- a considerarlos menos problemáticos que las mujeres 3 . dad realizada (n=778). El 6% de los estudiantes había sido diagnosticado pueden tener conocimientos, hábitos y comportamien- con alguna zoonosis, siendo la dermatofitosis la afec- tos personales inadecuados para la prevención de AO y ción más frecuente. Esta es una de las zoonosis más zoonosis 24 . prevalente entre los estudiantes de veterinaria 11 y está asociada a la práctica con pequeñas especies 18 . Por el Algunas prácticas seguras como la vacunación contrario, la frecuencia de brucelosis en Argentina está pre-exposición contra rabia por ejemplo, pueden tener relacionada al trabajo con grandes animales. poca aceptación 29 , resultando en bajos niveles de pro- tección 28 . La práctica de hábitos de trabajo seguro en La prevalencia de anticuerpos anti-brucelosis varió las prácticas hospitalarias puede ser aplicada sólo de entre 1 y 18% de los estudiantes muestreados en dis- manera parcial por los estudiantes. En los hospitales tintas regiones de Argentina, Brasil y Colombia 7, 27, 41 . escuela son frecuentes los brotes de enfermedades y Por su parte, la alta prevalencia de anticuerpos contra las infecciones zoonóticas 6 y las superficies rozadas Toxoplasma gondii entre estudiantes fue demostrada por múltiples personas y pacientes pueden estar conta- en Brasil hace más de 40 años 32 , aunque la importan- minadas por patógenos zoonóticos, aún en períodos no cia relativa de su asociación con la exposición a gatos epidémicos 5, 20, 45 . u otros factores de riesgo como los hábitos alimenta- rios en estudiantes, resulte aún controversial 13, 31 . En La ausencia de prácticas tan simples como la apro- Argentina y Brasil, la seroprevalencia en muestras no piada higiene de manos facilita la ocurrencia de brotes aleatorizadas fue estimada entre el 26 y el 29% 7, 42 . de enfermedades zoonóticas entre los estudiantes 15 . Sin embargo, esto puede ser rápidamente revertido con Los ingresantes a la carrera de Veterinaria y los intervenciones educativas similares a las utilizadas en estudiantes 8 pueden tener un conocimiento insuficien- hospitales humanos 39 . te sobre el impacto de las zoonosis transmitidas por la fauna silvestre, las mascotas y los animales productores Al igual que en los graduados, las correlaciones de alimentos. La bioseguridad es un tema relativamen- entre las percepciones de riesgos en las distintas activi- te reciente entre los veterinarios 23 y, hasta hace pocos años, en las carreras de grado no existía una enseñanza metódica de seguridad e higiene laboral y sólo algunas Facultades tenían programas y comisiones institucio- nales específicas sobre estos temas 1 . Tal perspectiva ha ido cambiando con la actualiza- ción de las legislaciones vigentes y las exigencias de los procesos de acreditación de las carreras por parte de organismos nacionales y multilaterales. Los conte- nidos sobre bioseguridad deberían ser ofrecidos desde los primeros años de la carrera, para poder modificar comportamientos y reducir los riesgos, siendo necesa- rio que los docentes aumenten la observación de prácti- cas seguras entre sus alumnos. Agradecimientos. A la Agencia Nacional de Pro- moción Científica y Tecnológica, por la financiación del trabajo (PICT 14-1665). Referencias. El artículo incluye más de 50 citas bi- bliográficas que no se insertaron por su larga extensión. Los interesados pueden solicitarlas a [email protected]. edu.ar
Revista Veterinaria COMUNICACIÓN BREVE Rev vet 30 (1): 68-69, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Casuística de leishmaniosis visceral canina registrada en Corrientes (Argentina) durante el período 2014-2016 Maidana, H.R.1; P.Gianeselli, M.2; Báez, A.D.1; Cabrera, W.R.1; Llano, E.G.1 1Servicio Diagnóstico de Leishmaniosis Visceral Canina; 2Cátedra de Farmacología y Toxicología, Fac.Cs.Veterinarias, Univ.Nac.Nordeste (UNNE), Corrientes, Argentina. E-mail: [email protected] Resumen Maidana, H.R.; P.Gianeselli, M.; Báez, A.D.; Cabrera, W.R.; Llano, E.G.: Casuística de leishmaniosis visceral canina registrada en Corrientes (Argentina) durante el período 2014-2016. Rev. Vet. 30: 1, 68-69, 2019. Durante los meses de febrero a octubre de los años 2014 a 2016 se investigó el padecimiento de leishmaniosis visceral en caninos atendidos en la Facultad de Ciencias Veterinarias de Corrientes, Argentina. El estudio se efectuó a través del método indirecto (detección de anticuerpos contra el antígeno rK39 en suero de sangre venosa) y la prueba directa (extracción de medula ósea por punción en distal de costillas y observación microscópica de amastigotes). Durante los 3 años se examinaron un total de 409 pacientes. En 2014 (89 muestras) se registraron 22 casos positivos (24,7%); en 2015 (164 muestras) se detectaron 39 casos positivos (23,7%) y en 2016 (156 muestras) se revelaron 56 pacientes positivos (35,8%). En todos los casos los caninos fueron positivos a ambos métodos diagnósticos. En el total de años estudiados, la prevalencia en caninos fue de 28,06%. Se enfatiza que ante los pacientes sospechosos de padecer leishmaniosis visceral, se efectúen conjuntamente los métodos diagnósticos serológico (indirecto) y parasitológico (directo). Palabras clave: canino, leishmaniosis, casuística, métodos diagnósticos. Abstract Maidana, H. R.; P.Gianeselli, M.; Báez, A.D.; Cabrera, W.R.; Llano, E.G.: Casuistry of canine visceral leishmaniosis registered in Corrientes (Argentina) during the period 2014-2016. Rev. Vet. 30: 1, 68-69, 2019. Since the years 2014 to 2016, cases of visceral leish- maniosis were investigated in canines examined at the Faculty of Veterinary Sciences of Corrientes, Argentina. The study was carried out through the indirect method (detection of antibodies against the rk39 antigen in venous blood serum) and the direct test (extraction of bone marrow by ribs puncture and microscopic observation of amastigotes). During these three years, 409 patients were examined. In 2014 there were 22/89 positive cases (24.7%), in 2015 there were 39/164 positive cases (23.7%) and in 2016 there were 56/156 positive patients (35.8%). In all cases, the canines were positive for both methods. The average prevalence of leishmaniosis in canines studied during this period was 28.6%. It is emphasized that in pres- ence of patients suspected of suffering visceral canine leishmaniosis, serological (indirect) and parasitological (direct) diagnostic methods should be performed together. Key words: canine, leishmaniosis, casuistry, diagnostic methods. INTRODUCCIÓN La leishmaniosis es una enfermedad zoonótica de alta prevalencia en diferentes regiones tropicales y sub- La región nordeste de Argentina reúne las condi- tropicales del mundo 1 . En el norte de Argentina se han ciones geográficas y climáticas adecuadas para el asen- detectado casos y epidemias de “leishmaniasis cutánea tamiento y diseminación de la leishmaniosis visceral americana” desde 1916 2, 3 . En áreas endémicas del canina (LVC), problema creciente en la salud pública Nuevo Mundo, la magnitud de la afección ha cambiado debido a que afecta tanto a perros domésticos como a poco en los últimos 50 años 4, 5 . personas. En los caninos su incidencia es elevada, sien- do considerados como el reservorio principal de la en- Los resultados de un relevamiento realizado en fermedad en su ciclo urbano. La sintomatología clínica Corrientes (Argentina), demuestran la expansión del es variada, generando dificultades diagnósticas. vector de la enfermedad hacia el sur del país. Recien- temente tres nuevas provincias (Chaco, Entre Ríos y Recibido: 4 octubre 2018 / Aceptado: 17 diciembre 2018 Santa Fe) se incorporaron como áreas vulnerables de transmisión de LVC.
Maidana H.R. et al.: Leishmaniosis canina en Argentina. Rev. Vet. 30: 1, 68-69, 2019 69 En relación con el agente etiológico de las diversas ticaron 56 pacientes positivos (35,8%). En la Figura 1 formas clínicas que ocurren en América del Sur, existe se resaltan las cifras de caninos positivos y negativos un creciente interés entre los investigadores para lograr registrados en cada uno de los tres años mencionados. un diagnóstico eficaz y sensible de estos parásitos. El Servicio de Diagnóstico de Leishmaniosis Vis- Actualmente los métodos de rutina más utilizados ceral Canina considera caso confirmado a todo pacien- como diagnóstico son: el método parasitológico direc- te sospechoso que haya revelado un diagnóstico con- to (observación del parásito en frotis de médula ósea o firmatorio de la afección por serología y parasitología, linfonódulos) y el método serológico indirecto (prueba esta última considerada de mayor sensibilidad. inmunocromatográfica, Kalazar detect canine rK39), prueba cualitativa que permite en pocos minutos la de- En conclusión, surge que en el periodo de tres años, tección de anticuerpos anti-LVC en sueros caninos, con luego de examinar un total de 409 pacientes ingresados una sensibilidad de 80-97% 6 . al Hospital de Clínica, 117 caninos acusaron resultado positivo, lo cual constituye una prevalencia del 28,6%, MATERIAL Y MÉTODOS tornando ostensible la necesidad de profundizar los diagnósticos parasitológicos y serológicos, así como El trabajo se efectuó investigando a los pacientes encarar acciones que preserven la salud de caninos y caninos ingresados al Hospital de Clínica de Pequeños seres humanos. Animales de la Facultad de Ciencias Veterinarias de Corrientes (Argentina). Ante la presencia de síntomas Agradecimientos. A Ricardo Ledesma y Ariel sospechosos de LVC fueron derivados al Servicio de Mouchard, por su aporte en el trabajo del Servicio de Diagnóstico de Leishmaniosis Visceral Canina. Diagnóstico de Leishmaniosis Visceral. La investigación se desarrolló durante los meses de REFERENCIAS febrero a octubre de los años 2014, 2015 y 2016. Con- sistió en la extracción de sangre de la vena cefálica del 1. Baneth G, Koutinas AF, Solano L. 2008. Canine leish- antebrazo, separación del suero mediante centrifuga- maniosis, news concepts and insights on an expanding ción y confrontación del mismo con los anticuerpos de zoonosis. Trends in Parasit. 24: 324-330. la tira reactiva inmunocromatográfica rápida (Kalazar Detec Canine, rK39) y por otro lado, la toma de mues- 2. Ciarantella P, Oliva T, Deluna R. 1997. A retrospective tra de médula ósea mediante punción-aspiración con clinical study of canine leishmaniasis in 150 dogs natu- aguja fina, de la parte distal de las tres últimas costillas rally infected by Leishmanía infantum. Vet. Record 141: de los caninos en cuestión, efectuándose frotis que pre- 539-543. vio fijado con alcohol etílico 96º fueron coloreados con Giensa y posteriormente examinados en microscopio 3. Ferrer L, Aisa MJ, Roura X, Porras M. 1995. Serologi- óptico. cal diagnosis and treatment of canine leishmaniasis. Vet. Record 136: 514-516. RESULTADOS 4. Llanos CA. 2004. Report of the Scientific Working Group De un total de 409 pacientes estudiados por ambos on Leishmaniasis, TDR/SWG/04. http://www.who.int/tdr/ métodos diagnósticos durante los 3 años, se observó publications/documents/swg _ leish.pdf. que en 2014 (89 pacientes) hubo 22 positivos (24,7%); en el año 2015 (164 pacientes) se registraron 39 positi- 5. Newton A, Steurer F, Schantz P, Giger U. 2001. Trans- vos (23,7%) y durante 2016 (156 pacientes) se diagnos- mission of visceral leishmaniasis through blood transfu- sions from infected English foxhounds to anemic dogs. J Am Vet Med Assoc 219: 1076-1083. 6. Romero MH, Sánchez JA. 2007. El diagnóstico de la leishmaniasis visceral canina (Leishmania infantum). Vet Zootec 1: 51-59. Figura 1. Porcentajes de animales positivos y negativos (ambos métodos), según el año.
Revista Veterinaria REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA Rev vet 30 (1): 70-75, 2019 ISSN (papel): 1668-4834 www.vet.unne.edu.ar ISSN (on line) 1669-6840 vet.unne.edu.ar/uploads/revista….pdf Dermatosis autoinmunes en caninos. Estudio retrospectivo Sieben, C.1, 2; Massone, A.R.3; Machuca, M.A.3 1Hospital Escuela, Departamento Clínicas, Facultad Ciencias Veterinarias (FCV), Universidad Nac. La Plata (UNLP), Buenos Aires, Argentina. 2Becario UNLP. 3Laborat. Patología Dr. B. Epstein (FCV-UNLP). E-mail: [email protected] Resumen Sieben, C.; Massone, A.R.; Machuca, M.A.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Estu- dio retrospectivo. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019. Se investigaron muestras de piel de caninos con diagnóstico de enfermedad autoinmune ingresadas entre los años 2004 y 2016 al Labo- ratorio de Patología Especial Veterinaria (FCV, La Plata, Argentina). Los objetivos fueron identificar casos de caninos con lesiones cutáneas y seleccionar aquéllos con diagnóstico de enfermedad autoinmune. También se propuso relacionar las dermatosis autoinmunes con la raza, edad, sexo, el tipo y la ubicación anatómica de las lesiones clínicas y, por ultimo, describir las diferentes lesiones histopatológicas que caracterizaron cada afección. Las en- fermedades autoinmunes representaron el 2,07% del total de casos ingresados en el período de estudio, siendo las más frecuentes el pénfigo foliáceo y el lupus eritematoso discoide. Los caninos de raza pura fueron más afectados que los mestizos, siendo la región dorsal de la nariz la ubicación anatómica de mayor presentación (35,3%). Entre los hallazgos histopatoló- gicos más reiterados se observaron pústulas (54,1%), áreas de separación dermoepidérmica (45,9%) y espongiosis (44,7%). Si bien el porcentaje de caninos con dermatosis autoinmunes es bajo, es importante incluirlas dentro de los diagnósticos diferenciales de las enfermedades que cursan con pústulas, pápulas, vesículas e infiltrado inflamatorio en la unión dermoe- pidérmica. La histopatología es una herramienta útil y relativamente accesible en nuestro medio, que permite arribar al diagnóstico de tales enfermedades. Palabras clave: canino, dermatosis autoinmunes, histopatología, estudio retrospectivo. Abstract Sieben, C.; Massone, A.R.; Machuca, M.A.: Autoimmune skin disease in dogs. Retro- spective study. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019. A retrospective study of canine skin samples di- agnosed with autoimmune disease, admitted by the Veterinary Special Pathology Laboratory, was conducted between 2004 and 2016. Purposes of the study were to identify canine cases of skin lesions and to select those with a diagnosis of autoimmune disease. Autoimmune skin diseases were related to race, age, sex, type and anatomical location of the clinical lesions and, finally, different histopathological lesions characterizing each disease. Autoimmune diseases accounted for 2.07% of the total number of cases admitted in the study period, the most frequent being pemphigus foliaceus and discoid lupus erythematosus. The purebred dogs were more affected than the mixed animals, being the anatomical location of greater presentation the dorsal region of the nose (35.3%). Among the most frequent histopathologi- cal findings were pustules (54.1%), areas of dermo-epidermal separation (45.9%) and spon- giosis (44.7%). Although the percentage of canines with autoimmune dermatosis is low, it is important to include differential diagnoses of the diseases that occur with pustules, papules, vesicles and inflammatory infiltrate in the dermoepidermal junction. Histopathology is a use- ful and accessible tool in that allows to diagnose these diseases. Key words: canine, autoimmune dermatosis, histopathology, retrospective study. INTRODUCCIÓN la pigmentación, daños fisicoquímicos, deficiencias nu- tricionales, enfermedades endocrinas, dermatosis in- Las diferentes enfermedades que afectan a la piel munomediadas, enfermedades infecciosas (virus, bac- de los caninos pueden clasificarse de acuerdo a su me- terias, hongos, protozoarios, ectoparásitos artrópodos y canismo patogénico en congénitas y hereditarias, des- helmintos), neoplásicas y misceláneas. órdenes de la diferenciación epidérmica, anomalías de Dentro de esta clasificación, las dermatosis inmu- Recibido: 27 febrero 2018 / Aceptado: 4 octubre 2018 nomediadas son aquéllas que incluyen mecanismos inmunológicos en la génesis de las lesiones. Se pue-
Sieben C. et al.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019 71 den incluir a las dermatosis por hipersensibilidad, las A partir de las historias clínicas se recopilaron dermatosis autoinmunes y otras condiciones inmuno- los siguientes datos de los pacientes: raza, edad, sexo, lógicas de etiología variada que incluyen sensibilidad a signos clínicos, lesiones cutáneas y sus ubicaciones drogas, vacunas y antígenos diversos 4, 6 . anatómicas. Del análisis de las historias clínicas se re- gistraron en planillas de cálculo las lesiones primarias En las dermatosis autoinmunes, los mecanismos y secundarias, las cuales fueron relacionadas con los patogénicos de lesión se establecen por la existencia de datos del paciente. anticuerpos o linfocitos activados contra constituyen- tes propios de la piel 7 . Las dermatosis autoinmunes en Se realizó la re-observación de los cortes histológi- caninos comprenden las enfermedades caracterizadas cos con el fin de caracterizar y registrar las lesiones mi- por pústulas, vesículas o bullas como lesión primaria croscópicas de la epidermis, la unión dermoepidérmica que incluye al complejo pénfigo (pénfigo foliáceo, pén- y la dermis. Por último, los datos obtenidos del análisis figo vulgar, pénfigo eritematoso, pénfigo paraneoplási- de las historias clínicas y los hallazgos histopatológi- co), penfigoide de las membranas mucosas, penfigoide cos fueron analizados mediante un estudio estadístico bulloso, epidermólisis bullosa adquirida y enfermedad descriptivo. lineal por inmunoglobulina A. RESULTADOS Asimismo, también se comprenden los diferentes tipos de lupus (lupus sistémico, lupus eritematoso dis- Enfermedades de la piel. Durante el periodo pro- coide, lupus eritematoso discoide diseminado, lupus puesto, ingresaron al laboratorio un total de 4.171 mues- eritematoso cutáneo exfoliativo, lupus eritematoso cu- tras de piel provenientes de caninos con historia clínica táneo vesicular y lupus paniculitis) que se caracterizan de enfermedad cutánea. Dentro del total de muestras por degeneración vacuolar del estrato basal e infiltra- ingresadas, el mayor porcentaje fue para las neoplasias ción inflamatoria en la unión dermoepidérmica 6, 7 . con el 74,22% (n=3096). Para las enfermedades autoin- munes de la piel, la proporción fue del 2,07% (n=85) de Los objetivos del presente trabajo fueron: 1) identi- los casos estudiados (Figura 1). ficar los casos de caninos con lesión cutánea ingresados al laboratorio; 2) seleccionar aquéllos con diagnóstico Enfermedades autoinmunes. En la Tabla 1 se pre- de enfermedad autoinmune; 3) relacionar las dermato- sentan las diferentes enfermedades autoinmunes diag- sis autoinmunes con la raza, edad, sexo, el tipo y la nosticadas mediante el estudio histopatológico. Los ubicación anatómica de las lesiones clínicas descriptas; casos en que solo se llegó a un diagnóstico de pénfigo y 4) describir diferentes lesiones histopatológicas que (n=12) se debieron a que los datos clínicos aportados no caracterizaron cada enfermedad. fueron los suficientes (descripción de las lesiones, ubi- cación anatómica de las mismas) y, en otras situaciones, MATERIAL Y MÉTODOS las lesiones microscópicas no se hallaron en un número considerable para poder clasificarlas. Se evaluaron los registros del Laboratorio de Pato- logía Especial Veterinaria Dr. B Epstein de la Facultad A partir del análisis de las historias clínicas se de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La evaluaron los datos de la reseña observándose que los Plata, y se seleccionaron las muestras de piel prove- perros afectados con dermatosis autoinmunes (n=85) nientes de caninos con historia clínica de enfermedad tenían entre 4 meses y 13 años de edad, con una media cutánea entre los años 2004 y 2016. Luego se realizó la de 5,14 años (el 50% de ellos entre 2,5 y 7 años (Figura revisión de los cortes histológicos de la piel con diag- 2). En el 29,4% de los casos (25/85) los pacientes eran nóstico de enfermedad autoinmune. mestizos y en el 70,6% (60/85) eran de raza pura. Figura 1. Total de diagnósticos de enfermedades cutáneas en caninos realizadas en el período 2004-2016.
72 Sieben C. et al.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019 Tabla 1. Dermatosis autoinmunes diagnosticadas de los registros del laboratorio al momento del ingreso (2004-2016). de las muestras. Entre las lesiones cutáneas primarias y secundarias halladas, las más frecuentes fueron costras tipos de dermatosis 17 (43,5%), úlceras (31,8%) y alopecia (27%), mientras que 12 las pústulas y vesículas representaron el 4,70% y 3,53% enfermedad autoinmune inespecífica 23 respectivamente. pénfigo 5 pénfigo foliáceo 1 También fue analizada la ubicación de las lesiones pénfigo eritematoso 2 en la piel, las cuales tuvieron una frecuencia de presen- pénfigo paraneoplásico 5 tación variable, con una tendencia a afectar la región pénfigo vulgar 18 dorsal de la nariz, denominada comúnmente plano na- penfigoide bulloso 1 sal (35,3%), la zona periocular (29,4%) y la región de lupus eritematoso discoide 85 la nariz (21,2%). Las lesiones ubicadas en las uniones lupus eritematoso exfoliativo mucocutáneas y en áreas de mucosa se observaron en total el 27% y 16,5% respectivamente (Tabla 2). Hubo predisposición racial para el collie (10/60), En los caninos con pénfigo foliáceo (PF) las áreas pastor alemán (10/60), cocker spaniel (6/60) y labra- más afectadas fueron la zona periorbital, la región dor- dor retriever (6/60). En 80 perros con dermatosis au- sal de la nariz y los pabellones auriculares; en los ca- toinmunes fue registrado el sexo, resultando similar sos de lupus eritematoso discoide (LED) las zonas más la frecuencia de presentación entre machos (43/80) y afectadas fueron la región dorsal de la nariz, la nariz y hembras (37/80). El resultado estadístico fue no signifi- la mucosa nasal (Figura 3). cativo (diferencia de proporciones p=0,47). En el estudio histopatológico se observó que las dos Se consignaron los datos del aspecto macroscópico enfermedades autoinmunes más diagnosticadas (Tabla de la piel suministrados por el clínico y los obtenidos 1) fueron PF (23/85) y LED (18/85). Los hallazgos mi- croscópicos en epidermis, dermis y unión dermoepi- Tabla 2. Frecuencia de presentación del tipo y la ubicación de las lesiones macroscópicas en las diferentes der- matosis autoinmunes. tipo EA PO PF PE PV PN PB LE LC TO costras 7 5 11 3 1 1 1 8 - 37 úlceras 10 3 6 1 2 - - 5 - 27 alopecía 4 3 11 1 - 1 - 3 - 23 pústulas 211- - - - - - 4 vesículas 12- - - - - - - 3 pápulas - - -1- - - - - 1 erosiones - -1-1- -3- 5 eritema - -51- -13- 10 hiperpigmentación 422- - - - - - 8 hiperqueratosis 422- - - -1- 9 descamación 1-31- - -1- 6 ubicación EA PO PF PE PV PN PB LE LC TO región dorsal nariz - 2 14 5 - - - 9 - 30 región de la nariz 614 - - - - 7- 18 región periorbital 3 3 13 1 - 1 - 5 - 26 pabellón auricular 2-81- - - - - 11 región de la cabeza 22- -1-1- - 6 almohadillas - -1- - - - - - 1 reg. tronco/cuello 152 - 1 - 11 - 11 región axilar 241- - - 1- - 8 Reg. de miembros 334- - 1111 14 región del vientre 7-3- - - - - - 10 uniones “mc” 436 - 2116 - 23 “mucosas” 5521- - -1- 14 región inguinal 15- - - -1- - 7 región perineal -2- - - - - - - 2 EA: enfermedad autoinmune. PO: pénfigo. PF: pénfigo foliáceo. PE: pénfigo eritematoso. PV: pénfigo vulgar. PN: pénfigo paraneoplásico. PB: pénfigo bulloso. LE: lupus eritematoso discoide. LC: lupus eritematoso cutáneo exfoliativo. TO: total. “mc”: uniones mucocutáneas (incluyen uniones labial, anal, vulvar y nasal). Las “mucosas” incluídas son: anal, oral, nasal, vulvar y prepucial.
Sieben C. et al.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019 73 Tabla 3. Frecuencia de presentación de las lesiones microscópicas en las diferentes dermatosis autoinmunes. tipo EA PO PF PE PV PN PB LE LC TO costras 316211 - 3 - 17 hiperqueratosis 24 pústulas 53822 - 211 35 pústulas foliculares 11 queratinocitos acantolíticos 5 3 20 4 2 1 - - - 15 ulceras 13 acantosis - - 10 1 - - - - - 35 espongiosis 38 acantólisis 1 2 12 - - - - - - 6 vesículas 7 bullas 6-311- -2- 4 atrofia epidérmica 9 EPIDERMIS degen.vacuolar EG y/o EB 86922- 161 18 sateliosis linfocítica 5 separación suprabasal 8 7 13 2 2 - 1 5 - 4 exocitosis neutrofílica 9 queratinocitos apoptóticos 1-4- -1- - - 16 separación en unión DE 39 infiltrado liquenoide en ZI 34- - - - - - - 16 pérdida demarcación DE 9 infiltrado en dermis leve - - - - - -4- - 18 infiltrado dermis moderado 24 infiltrado dermis abundante 411- - - -3- 20 infiltrado PL / PA / PS 14 edema en dermis 11-3- 1291 16 dilat.folic.gland. sudoríparas 6 dilatación vasos linfát./sang. - - -1- - -4- 4 hemorragia 2 incontinencia pigmentaria -1- -21- - - 30 212- 11-2- - - 2 1 1 1 - 10 1 DERMIS D-E 5975- -49- 3 1 - - - - 1 11 - - - -1- - -8- 2541114 - - 3 4 12 1 1 - - 2 1 9-43- - -4- - -311126- 1 2 10 2 - - - 1 - 113-1- - - - 1- -1- - -2- 2- - - - - - - - 6 1 7 2 1 - 1 12 - D-E: dermo-epidérmica. EA: enfermedad autoinmune. PO: pénfigo. PF: pénfigo foliáceo. PE: pénfigo eritematoso. PV: pén- figo vulgar. PN: pénfigo paraneoplásico. PB: pénfigo bulloso. LE: lupus eritematoso discoide. LC: lupus eritematoso cutáneo exfoliativo. TO: total. EG: estrato granuloso. EB: estrato basal. ZI: zona de interfase. PL: perifolicular. PA: perianexal. PS: perivascular. Figura 2. Frecuencia de presentación de las dermatosis autoinmunes según edad (n=85, media=61,69; media- na=60; desvío estándar=39,25; mínimo=4 (4 meses); máximo=156 (13 años); suma=5244; percentiles=25-30 (2,5 años), 50-60 (5 años), 75-84 (7 años). Numeración vertical: casos registrados. Numeración horizontal: edad (meses). dérmica se describen en la Tabla 3. En la epidermis, A nivel de la unión dermoepidérmica el hallazgo los hallazgos más frecuentes fueron: pústulas (54,1%, más constante fue la separación entre epidermis y der- de ubicaciones subcorneales, intragranulares, supra- mis (45,9%). En la dermis el infiltrado inflamatorio basales y foliculares), espongiosis (44,7%), acantosis predominante fue mononuclear (células plasmáticas, (41,2%) e hiperqueratosis (28,2%). macrófagos y linfocitos) aunque -en ocasiones- se pre-
74 Sieben C. et al.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019 Figura 3. Ubicaciones anatómicas de las lesiones más frecuentes en PF Y LED. Números indican casos regis- trados. Barras negras: pénfigo foliáceo; grises: lupus eritematoso discoide; blancas: total. sentó un infiltrado inflamatorio de tipo mixto (con pre- Durante el examen clínico, la observación de pús- sencia de neutrófilos). tulas y vesículas constituye un hallazgo característico de las enfermedades autoinmunes. Sin embargo, en Dado que se observó una gran variación en la canti- nuestro estudio solo se observaron estas lesiones en un dad de células que infiltraban la dermis, se realizó una porcentaje menor al 5%. Ello podría explicarse debido clasificación subjetiva en leve, moderado, abundante y a que las mismas tienen un carácter transitorio produc- un tipo especial denominado liquenoide. Este último to de su fragilidad y rápida evolución a lesiones secun- consistió en una severa infiltración inflamatoria mix- darias como úlceras y costras 9, 10 . ta que oscureció la unión dermoepidérmica. En este sentido, el infiltrado inflamatorio moderado fue el más En nuestro estudio pudo observarse que las costras observado (28,2%). (43,5%) y úlceras (31,8%) fueron las lesiones más re- gistradas en el examen clínico. Cabe resaltar que en la El infiltrado inflamatorio de tipo liquenoide, que clínica éstas son lesiones muy inespecíficas. caracteriza a enfermedades como el lupus, se observó en el 18,8% de los casos. La incontinencia pigmentaria, Los hallazgos microscópicos de acantosis, espon- otro hallazgo también citado con frecuencia, se encon- giosis y acantólisis con formación de pústulas que tró en el 35,3% de los cortes y el 40% correspondió a contienen queratinocitos acantolíticos en su interior, pacientes con LED (Tabla 3). permiten identificar a las enfermedades del complejo pénfigo. Estos hallazgos se deben a la falta de adhesión DISCUSIÓN entre los queratinocitos. A diferencia de lo que sucede con las pústulas macroscópicas, las pústulas micros- Las dermatosis autoinmunes en caninos son in- cópicas se observaron en más del 50% de los casos, frecuentes y de muy baja presentación clínica dentro variando su ubicación en los diferentes estratos de la del total de enfermedades que afectan a la piel 6 . En la epidermis, según el tipo de pénfigo. bibliografía se estima que las dermatosis autoinmunes representan solo el 1,4% de las dermatosis caninas 5, La identificación y ubicación de las pústulas, así 7 . En el presente trabajo las dermatosis autoinmunes como su asociación con la acantólisis, son hallazgos representaron el 2,07% del total de casos, siendo este de importancia relevante en el diagnóstico histopato- valor cercano a los descriptos por diferentes autores. lógico de las enfermedades que componen el complejo pénfigo. Las afecciones cutáneas autoinmunes con mayor frecuencia diagnóstica en perros son el PF (0,6%) y el En los casos de LED los datos más frecuentes de LED (0,5%) 1 . Los resultados aquí obtenidos se corres- carácter diagnóstico son la presencia de queratinocitos ponden con la bibliografía, ya que observamos un por- apoptóticos, infiltrado inflamatorio de tipo liquenoide, centaje similar para PF (0,5%) y LED (0,4%). incontinencia pigmentaria, degeneración vacuolar de los estratos granuloso y basal, como así también áreas Al igual que lo observado por otros autores, no he- de separación dermoepidérmica. Estos hallazgos están mos encontrado diferencias significativas entre la pre- relacionados con la formación de autoanticuerpos que, sentación de la enfermedad en machos y hembras 8, 9 . cuando se unen a antígenos, liberan inmunocomplejos En el mismo sentido, constatamos que el cocker spaniel que se depositan en la zona de membrana basal. y el labrador retriever fueron dos de las razas que más frecuentemente fueron afectadas por PF 7 . También En nuestro estudio, entre los hallazgos más fre- coincidimos en que la raza collie fue la que registró la cuentes, pudimos observar la separación dermoepidér- mayor frecuencia de LED 2 . En relación a la edad, la mica (45,9%), la incontinencia pigmentaria (35,3%), el bibliografía consultada establece el inicio de las lesio- infiltrado de tipo liquenoide (18,8%) y los queratinoci- nes antes de los 5 años, dato que se corresponde con tos apoptóticos (18,8%), siendo estos resultados coinci- nuestro análisis estadístico (media: 5,14 años) 3, 6 . dentes con los descriptos por otros autores 3, 10 .
Sieben C. et al.: Dermatosis autoinmunes en caninos. Rev. Vet. 30: 1, 70-75, 2019 75 Se concluye que las dermatosis autoinmunes son de REFERENCIAS muy baja presentación dentro del total de enfermeda- des que afectan a la piel de caninos. No obstante, estas 1. Bedolla MA, Salas GG, Constantino CF. 2009. Diag- afecciones deben ser tenidas en cuenta e incluidas en nóstico inmunohistoquímico de dermatosis inmunome- los diagnósticos diferenciales de aquellos pacientes que diadas en perros domésticos. Vet Mex 40: 181-189. se presentan a consulta clínica/dermatológica con le- siones cutáneas como pústulas, vesículas, bullas y -más 2. Goo MJ et al. 2009. Discoid lupus erythematosus (DLE) frecuentemente- costras, erosiones y úlceras. in a spitz dog. J Vet Med Sci 70: 633-635. Asimismo, es importante resaltar la existencia de 3. Gross TL, Ihrke PJ, Walder EJ, Affolter VK. 2005. una mayor predisposición en animales de raza pura, Inflammatory, dysplastic, and degenerative diseases. In: siendo collie, pastor alemán, cocker spaniel y labrador Skin diseases of the dog and cat (Gross TL et al. Edit.), 2º retriever las más predispuestas. Las lesiones son más ed., Blackweel Publishing, New Jersey, p. 555. comúnmente observadas en la piel y mucosas de la cara y secundariamente en el resto del cuerpo. 4. Hargis AM, Myers S. 2017. The integument. In: Patholog- ic basis of veterinary disease (Zachary JF, McGavin MD, La histopatología resulta un método útil para el Edit.), 6º ed., Elsevier, St. Louis, Missouri, p. 1009-1146. diagnóstico de estas enfermedades y, en nuestro me- dio, sigue siendo la herramienta más utilizada por los 5. Larsson C. 2005. Wandering through the autoimmune clínicos y dermatólogos para arribar a un diagnostico dermatoses: pemhpigus complex. In: Proceedings of the definitivo en tales afecciones. No obstante, nuevas es- World Small Animal Veterinary Ass., Mexico City,: http:// trategias diagnósticas están siendo aplicadas en la ac- www.vin.com/apputil/content/defaultadv1.aspx?pId=1119 tualidad como las técnicas de inmunohistoquímica y de 6&meta=Generic&id=3854248 inmunofluorescencia directa e indirecta, que permiten evidenciar los diferentes autoanticuerpos y antígenos 6. Mauldin EA, Peters KJ. 2016. Integumentary system. In: presentes en cada enfermedad y su ubicación sobre la Pathology of domestic animals (Jubb KV, Kennedy PC, piel, permitiendo diferenciarlas unas de otras. Palmer NC, Edit.), 6º ed., Elsevier, St.Louis, Missouri, vol. 1, p. 509-736. Agradecimientos. A la MV MSc Laura Alarcón por su colaboración en el análisis de datos estadísticos 7. Miller WH, Griffin CE, Campbell KL. 2014. Dermato- y a las histotecnólogas Carolina Aralda y Lorena Díaz sis autoinmunes e inmunomediadas. En: Dermatología en (FCV-UNLP), por su ayuda en el procesamiento pato- pequeños animales (Muller & Kirk Edit.), 3º ed., Intermé- lógico. dica, Buenos Aires, p. 478-552. 8. Olivry T, Chan LS. 2001. Autoimmune blistering derma- toses in domestic animals. Clin Dermatol 19: 750-760. 9. Olivry T. 2006. A review of autoimmune skin diseases in domestic animals: I-superficial pemphigus. Vet Dermatol 17: 291-305. 10. Olivry T, Linder KE. 2009. Dermatoses affecting des- mosomes in animals: a mechanistic review of acantholytic blistering skin diseases. Vet Dermatol 20: 313-326.
76 Instrucciones a los autores El siguiente es un compendio de las normas de publicación. Se recomienda examinar la versión completa en la página web http://www.vet.unne.edu.ar 1. Los artículos, originales e inéditos, deben estar rela- significación estadística si correspondiere). A ren- cionados a las ciencias veterinarias y estar escritos glón seguido, separadas por comas, irán hasta seis en español o inglés. Se aceptan trabajos que hayan palabras clave (key words) o grupos de palabras, sido expuestos como comunicaciones libres en con- para su indexación. Pueden repetirse palabras con- gresos, jornadas y reuniones científicas. Los manus- signadas en el título del trabajo. critos no deberán ser presentados simultáneamente 8. La Introducción será breve y detallará los antece- a otra/s revista/s. dentes, el origen del problema investigado y su im- portancia, reservando el último párrafo para descri- 2. Se presentarán escritos (dactilografiados) de un solo bir el objetivo del trabajo. Cada párrafo se iniciará lado en hojas A4 numeradas, utilizando letras Ti- con sangría (espacio en blanco). Para resaltar algún mes New Roman 12, texto justificado, interlineado párrafo o palabra se utilizarán letras cursivas. Las doble y márgenes de 3 cm. Se recomienda examinar citas bibliográficas se indicarán con superíndices, algún ejemplar reciente de Revista Veterinaria con sin paréntesis. Varios superíndices juntos se ordena- el fin de adecuarse a su estilo y formato. rán por número creciente y se separarán con comas (1, 3, 5, 7) excepto cuando se trate de citas correlativas, 3. El manuscrito impreso podrá enviarse por E-mail en cuyo caso se usará un guión (1-3, 5-7). ([email protected]) o bien remitirse por co- 9. En Material y Métodos se detallarán los sujetos u rreo postal a Revista Veterinaria, Facultad de Cien- objetos estudiados, así como los procedimientos cias Veterinarias de la UNNE, Sargento Cabral efectuados. Las técnicas utilizadas pueden descri- 2139, Corrientes (3400), Argentina. birse mediante citas bibliográficas. Es importante indicar el diseño experimental y las estadísticas 4. Los TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN no supe- realizadas, con el correspondiente nivel de signifi- rarán 15 páginas dactilografiadas y comprenderán cación. las siguientes secciones: título, autores, institución 10. Los Resultados serán expresados en forma concreta, (con dirección), resumen, introducción, material y clara y secuencial, acompañados por tablas, figuras métodos, resultados, discusión (o resultados y dis- y/o fotografías. No deben repetirse en el texto los cusión), agradecimientos, resumen en el otro idio- datos consignados en tablas y figuras. Los decima- ma (con su correspondiente título), palabras claves les se separarán con coma (español) o con punto (in- (en ambos idiomas) y referencias. glés). Podrá optarse por la presentación conjunta de “Resultados y Discusión”. 5. El título debe ser conciso e informativo, no debien- 11. Tablas, figuras y fotos (separadas entre sí, no en do superar 120 caracteres (con espacios). Se escri- “bloques”), de tamaño compatible con la caja de la birá en minúsculas y negrita, sin abreviaturas, sin Revista, se numerarán correlativamente en arábigos, subrayar, centrado en el medio de la hoja. Al pie de con leyendas superior (tablas) o inferior (figuras, página se indicará si pertenece a algún proyecto, en- fotos) respectivamente, insertadas en el lugar don- tidad y subsidio, así como la circunstancia de haber de se desea que aparezcan. Se confeccionarán con sido presentado en congresos o jornadas. el mismo tipo de letra usado en el texto, en blanco y negro, sin sombreado, sin marco. Todas deberán 6. El apellido de los autores se consignará en minús- estar citadas en el texto y sus leyendas deberán ser culas excepto la primer letra, seguido luego de una explicativas del contenido. Las tablas se estructu- coma por las iniciales del nombre (con punto). Evi- rarán sin líneas verticales ni horizontales interiores, tar el doble apellido. Cada autor se separará con remarcando las diferencias significativas y evitan- punto y coma, en texto centrado. Se admitirán hasta do que el exceso de datos las torne confusas. Las cinco (5) autores por trabajo. En el renglón siguien- figuras serán gráficos, dibujos o mapas (elaborados te se escribirá la institución de origen, incluyendo electrónicamente), así como fotos con buen contras- dirección postal, teléfono y E-mail. En caso nece- te y en foco, que serán impresas en blanco y negro sario se indicarán con números (superíndices, expo- (en color tendrán un costo extra a cargo de los au- nentes) los lugares de trabajo de cada autor. tores). En la edición on line aparecerán en colores, sin cargo. Se recomienda no exceder la cantidad de 7. Los artículos en español e inglés deberán incluir re- tablas, figuras y fotos (hasta 5 en total). súmenes en ambos idiomas (Resumen y Abstract). Se escribirán en forma corrida, sin puntos y aparte. Cada uno irá encabezado por los autores y el título del trabajo en sendos idiomas. No deben exceder 300 palabras y contendrán una sinopsis de los obje- tivos, metodología, resultados y conclusiones (con
77 12. La Discusión debe girar en torno a la interpretación o bien investigaciones e informes de avance de de los hallazgos, sin repetir datos consignados en proyectos, descripción de nuevas técnicas y datos Resultados. El último párrafo deberá contener la de casuística. Responderán en lo posible a la estruc- pertinente conclusión (omitir este título), donde se tura del trabajo de investigación, con resúmenes en resaltarán los aportes más importantes de la investi- ambos idiomas y referencias, pudiendo contener gación, los cuales deberán guardar estrecha relación hasta una tabla y una figura. Deberán ceñirse a una con los objetivos planteados. extensión no mayor de 4 páginas dactilografiadas a doble espacio y no contener más de 10 citas. 13. En Agradecimientos se mencionarán a las personas 16. Las REVISIONES BIBLIOGRÁFICAS son compi- o entidades que colaboraron en el desarrollo del tra- laciones usualmente encargadas por el Comité Edi- bajo, con expresa mención del tipo de ayuda pro- torial a un autor invitado, con amplia experiencia porcionada. en el tema, donde se contemplan distintas opinio- nes sobre un tópico determinado, implicando un ex- 14. Las Referencias se listarán con números arábi- haustivo examen de los conocimientos actuales y la gos por orden alfabético de autores y no deberán elaboración de conclusiones propias a partir de una exceder las 30 citas bibliográficas. Todas las refe- discusión crítica. Contendrán resúmenes en ambos rencias del cuerpo del trabajo deben estar citadas idiomas y se dividirán en secciones que incluyan: en la bibliografía, y ésta no deberá contener más objetivos, subtítulos por temas, conclusiones y referencias que las consignadas en el texto. Evitar referencias (hasta 50 citas). Podrán incluir hasta 5 las autocitas (referencias que contengan nombres tablas y 5 figuras/fotos (propias o con permiso de coincidentes con los autores del trabajo). Las pu- reproducción de los autores o editorial), sin exceder blicaciones periódicas se abreviarán según normas 30 páginas dactilografiadas. del Index Medicus. Ejemplos para citar revistas, 17. Los trabajos serán examinados por el Comité Edito- boletines, libros, capítulos, tesis, comunicaciones y rial, tras lo cual podrán ser rechazados o enviados publicaciones electrónicas: a árbitros especialistas en el tema para su evalu- ación definitiva (sistema ciego-simple, en línea), 1. Braun HI, Davis JC, Murphy RB. 2018. Effects of con decisión final a cargo del Director. Los árbitros intense exercise training on equine growth. J Physiol juzgarán el valor científico del trabajo, el respeto de Biochem 25: 110-117. las normas éticas, la coherencia lógica entre objeti- vos, metodología y resultados, la calidad y cantidad 2. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria de tablas y figuras, la pertinencia de las conclusio- (INTA). 2017. Informe anual de planes de trabajo. Bo- nes, así como la sintaxis y semántica empleadas. letín Documentos Institucionales (Buenos Aires), Nº Como resultado de este referato, los trabajos podrán 55, p. 4. ser aceptados, rechazados o devueltos para su cor- rección y/o adecuación. 3. Bolton GR. 2016. Handbook of canine cardiology, 2nd 18. Los autores locales tendrán oportunidad de corregir ed., Saunders, Philadelphia, p.129-133. las pruebas finales (pruebas de galera). Los autores externos lo harán on line. Se recomienda incluir 4. King ME. 2015. Determinación de colinesterasa. En: separadamente los archivos originales de tablas y Química clínica (Pesce AJ Ed), 3º ed., Panamericana, figuras (XLS, JPEG, GIF). En la página web http:// Buenos Aires, p. 722-725. www.vet.unne.edu.arlos autores podrán consultar los requerimientos del Código de Ética de esta Fac- 5. Gutiérrez JE. 2014. Acciones de la leptina sobre la ultad (Resolución 141 CD 2013). absorción de galactosa en el intestino del ternero. Tesis 19. Los manuscritos podrán enviarse por E-mail (re- doctoral (o PhD o MSci), Univ. Nac. de Buenos Aires, [email protected]), preferentemente en ver- Argentina, p. 80-91. sión .doc incluyendo texto, tablas, figuras y fotos. Deberá acompañarse una solicitud de publicación 6. Gómez HF, Candia RJ. 2013. Efectos del ácido meta- firmada en conformidad por todos los coautores del cresol sulfónico en las úlceras granulomatosas del ca- trabajo (implica cesión de derechos de autor - copy- ballo. Anales (o Memorias o Proceedings) XIII Sesión right) cuyo modelo puede imprimirse a partir de la de Comunicaciones Científicas, Facultad de Ciencias página web ya mencionada. Veterinarias UNNE, Corrientes, Argentina, p.72-73. 7. McCarthy S. 2012. Extracellular pH affects inflam- matory cell production of nitric oxide in cattle. Live- stock Research 25: 2. On line: http://cipav.org.co/lrrd. 15. Las COMUNICACIONES BREVES son reportes que requieren rápida publicación (primer hallazgo),
78 Instruction to authors (brief version) 1. Revista Veterinaria accepts original contributions in 7. Results can include tables, figures and/or photog- English. Manuscripts will be typed on one side of raphies. Tables will be prepared without vertical or A4 sheet (210 x 297 mm) using Times New Roman horizontal inner lines. Data will contain statistical 12 p font, justified, one column, double-line spacing significance (p<0.05). Figures (pictures, graph- and 3 cm margins (original and one copy without ics, drawings or maps electronically made) will names of authors). Authors outside Argentina may be printed in black and white (images in color will send the manuscript by e-mail. have an extra charge). For the on line version imag- es will be in color. A “Results and Discussion” joint 2. RESEARCH ARTICLES: total length of the article submission is possible. will not exceed 15 pages. Manuscripts should be divided as follows: title, authors, institution (in- 8. References will be listed alphabetically according cluding postal address), abstract, key words, intro- to author names (up to 30). Self citations should be duction, materials and methods, results, discussion avoided. Periodic publications, books and scientific (or results and discussion together), acknowledg- communications will be cited according to the In- ments, references and abstract in Spanish (includ- dex Medicus. Examples: ing title). a. Braun HI, Davis JC, Murphy RB. 2018. Effects of 3. Title has to be concise but informative enough, with- intense exercise training on equine growth. J Physiol out exceeding 120 characters - including spaces. It Biochem 25: 110-117. should be written centered, in lowercase bold letters without abbreviations or underlying. Project, insti- b. Di Matteo L. 2017. Handbook of canine cardiology, tution, financial support and information regarding 2nd ed., Saunders, Philadelphia, p. 129-133. previous presentation to scientific events will be in- dicated in a foot note. c. McCarthy S. 2016. Quality control in blood cell analysis. Proceedings of European Society for study of 4. Author last names will be written centered, in low- Drug Toxicity, Amsterdam, p. 39-54. ercase except for the first letter and followed by the initials. The maximum number of authors is five (5), 9. SHORT COMMUNICATIONS are brief reports that which cannot be in the References to avoid self ci- need prompt publication, short investigations, prog- tation. In the next line, the name of the institution, ress reports, description of new techniques, and casu- including address, phone/fax and E-mail. istic data. They will have the same structure as that of research articles with abstracts in both languages, 5. Abstract and “Resumen” will be written in a con- as well as references. They will not exceed 4 pages tinuous fashion and headed by author names. They or have more than 10 references. LITERATURE RE- should not exceed 300 words and should have a VIEWS are compilations entrusted to a guest author brief description of the objectives, methodology, re- who has a wide knowledge on a particular topic. sults and conclusions, with statistical significance when needed. The abstract may include up to six 10. Manuscripts will be submitted to peer-review. They key words. may be accepted, rejected or sent back for correc- tions. After acceptance authors will send a publica- 6. Introduction will be brief, including the background tion form which can be downloaded from http:// of the investigation with the objectives in the last www.vet.unne.edu.ar/default/publicaciones. On the paragraph. References will be indicated using su- Journal website (www.vet.unne.edu.ar) authors will perscripts, without parenthesis. Material and Meth- find the requirements of the Code of Ethics. Cor- ods should describe subjects and objects of study as respondence will be sent to: Revista Veterinaria, well as the procedures performed. Methodologies Facultad de Ciencias Veterinarias UNNE, Sargento may be described indicating references. It is impor- Cabral 2139, Corrientes (3400), Argentina (E-mail: tant to specify the experimental design and the sta- [email protected]). tistical analysis.
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