eBook-SARS-CoV-2

MÓDULO III Testes para detecção da SARS-CoV-2 PROFA. ALESSANDRA FERREIRA RIBAS

Sumário Apresentação................................3 Introdução.....................................4 Testes para detecção....................8 Testes Sorológicos.......................9 Testes Moleculares....................12 Fatores que influenciam..............18 Referências..................................20

Apresentação O objetivo desse ebook é apresentar de maneira simplificada os testes utilizados para a detecção do Sars-Cov-2, o vírus causador da Covid 19. Bons estudos!

Introdução Os coronavírus são uma grande família de vírus comuns em muitas espécies diferentes de animais, incluindo camelos, gado, gatos e morcegos. Raramente, os coronavírus que infectam animais podem infectar pessoas, como exemplo do MERS-CoV e SARS-CoV. Em dezembro de 2019, houve a transmissão de um novo coronavírus (SARS- CoV-2), o qual foi identificado em Wuhan na China e causou a COVID-19, sendo em seguida disseminada e transmitida pessoa a pessoa. A COVID-19 causada pelo coronavírus SARS-CoV-2, apresenta um espectro clínico variando de infecções assintomáticas a quadros graves.

Estrutura do Sars Cov-2 O SARS-CoV-2 é um vírus de ácido ribonucleico (RNA), cujo material genético é representado por uma única molécula de RNA positivo (RNA+). Todo o seu genoma contém menos de 30.000 nucleotídeos, cada um deles formado por uma molécula de açúcar (ribose), um ácido fosfórico e uma base nitrogenada. O nucleocapsídeo é em forma helicoidal. Seu nome se deve a espículas presentes na superfície do vírus, Aparência de uma coroa solar (corona em latim).

Processo de infecção do SarsCov-2 Para que ocorra o processo de infecção pelo SARS-CoV-2 a proteína S (spike) da superfície viral precisa ser ativada para ligar-se ao receptor celular de entrada. O processo de iniciação e ativação da proteína S é mediado por proteases da célula hospedeira, destacando-se a Transmembrane Protease Serine 2 (TMPRSS2)15. https://www.youtube.com/watch? v=wC3r4Lcm1Sw Saiba mais sobre o processo de infecção assistindo ao vídeo!

De acordo com a Organização Mundial da Saúde: Cerca de 80% dos pacientes com COVID-19 são assintomáticos ou oligossintomáticos (poucos sintomas) Aproximadamente 20% dos atendimentos hospitalares são por dificuldade respiratória Desses, aproximadamente 5% podem necessitar de suporte ventilatório

Testes para Detecção Os testes para a detecção da SarsCov-2 podem ser divididos em: Sorológicos X Moleculares

Testes Sorológicos Os testes sorológicos procuram detectar os anticorpos produzidos pelo paciente infectado Utilizam o sangue para a coleta das amostras do paciente Os testes são chamados de: Imunoensaio enzimático (teste Elisa) Quimioluminescente (teste Clia)

Testes Sorológicos Detectam a a presença de anticorpos na fase aguda (IgM) e na fase convalescente da doença (IgG) presentes no sangue e que reconheçam apenas proteínas do Sars-Cov-2. O anticorpo reagente que reconhece IgM ou IgG mudará a coloração do ensaio indicando a presença deles. A intensidade dessa coloração, é proporcional aos anticorpos presentes. Figura a esquerda mostra a ligação do antígeno ao anticorpo; A direita um placa com mostra reações positivas pela coloração azul

Testes Sorológicos Os testes sorológicos podem ser feitos em laboratório assim como de forma rápida no chamado sistema \"drive thru\". O resultado é revelado em poucos minutos Figura mostra a realização de umteste sorológico rápido

Testes Moleculares Os testes moleculares procuram detectar o material genético do vírus (ácido ribonucleico - RNA) O teste é chamado de RT-PCR - Reação em cadeia da polimerase Utilizam secreções nasais ou da gaganta como amostra

Testes Moleculares Detectam o material genético do vírus A enzima transcriptase reversa (RT) converte o RNA do vírus em cDNA Um \"pedaço\" dessa sequência do vírus é multiplicada em laboratório. Através da técnica reação em cadeia da polimerase (PCR) Figura a esquerda: Coleta de amostras nasal ou garganta do paciente. Figura a direita: Operador de máquinas de PCR as quais fazem a detecção

Testes Moleculares O número de cópias do material genético é detectado por um sinal luminoso gerado a cada cópia Equipamentos específicos fazem a detecção Quando essa luz gerada ultrapassa um valor mínimo o teste é considerado positivo. Máquina de PCR utilizada para detecção do SarsCov2

Como e Quando fazer os testes? Teste sorológico É realizado através de coleta de sangue Após sete dias de sintomas para detecção de anticorpos na fase aguda da doença (IgM). Após 11 dias de sintomas para detecção de anticorpos associados à fase convalescente da doença (IgG)

Como e Quando fazer os testes? Teste molecular A coleta das amostras de secreção nasal ou da garganta do paciente é feita usando um cotonete (swab) A partir do terceiro até o sétimo dia de sintomas Demora cerca de 2 horas o resultado

Fatores que influenciam os resultados dos testes Coleta inadequada da amostra, Tipo de amostra biológica: sangue ou secreções Tempo decorrido entre a coleta e o início dos sintomas, Oscilação da carga viral O exame de RT-PCR deve ser repetido em outra amostra do trato respiratório quando houve dúvidas

Medidas de Prevenção Use máscara Lave bem as mãos Use álcool em gel Mantenha o distanciamento social Lembrem-se! Ainda não existe tratamento ou vacina disponível para a Covid-19 portanto é fundamental manter as medição de prevenção

Testes para a detecção do SArs-Cov2 Teste rápido: https://www.youtube.com/watch?v=lfTA9B0riFk Interpretação de resultados: https://www.youtube.com/watch? v=VEx_RvsbL7M Coleta de amostras para teste de PCR https://www.youtube.com/watch?v=r5H2xf877rg Qual é a diferença entre teste rápido e o PCR? https://www.youtube.com/watch? v=PLMsyGnGYRk Para saber mais sobre os testes para a detecção da SarsCov-2 assista aos vídeos nos links acima.

Referências Fiocruz: https://portal.fiocruz.br/noticia/testes-para- covid-19-como-sao-e-quando-devem-ser- feitos Anvisa: https://www.gov.br/anvisa/pt-br Sociedade Brasileira de Análises Clínicas: https://www.sbac.org.br/blog/2020/03/25/tes tes-para-sars-ncov-2/ Organização Mundial da Saúde: https://www.who.int/eportuguese/countries/ bra/pt/ (site do Brasil) Ministério da Saúde: https://www.gov.br/saude/pt-br