สอบโครงร่าง 1.1

ผลของระยะเวลาการเตรียมน้าไมโครนาโน-บบั เบ้ิล ตอ่ การฟอกฆา่ เช้ือช้ินสว่ นกหุ ลาบ

โดย นางสาวอรทยั แสงมณีจรสั รหสั นกั ศึกษา 62652181006-1 วิทยาศาสตรม์ หาบณั ฑิต สาขาพืชศาสตร์ คณะวิทยาศาสตรแ์ ละเทคโนโลยีการเกษตร มหาวิทยาลยั เทคโนโลยีราชมงคลลา้ นนา

หลกั การ และเหตผุ ล กหุ ลาบ มชี ่อื วทิ ยาศาสตรว์ ่า Rosa hybrids ช่อื สามญั คอื กุหลาบ หรอื rose อยู่ในวงศ์ Rosaceae มถี น่ิ กาํ เนิดในทวปี เอเชยี เป็นไมต้ ดั ดอกทม่ี กี ารปลูกเป็นการคา้ กนั แพร่หลายทวั่ โลก และปจั จบุ นั มกี ารจดั จาํ แนกประเภทของกุหลาบท่มี มี ูลค่าทางเศรษฐกิจ ไดแ้ ก่ กุหลาบตดั ดอก (Hybrid Tea) กหุ ลาบพวง (Floribunda) กหุ ลาบแกรนดฟิ ลอร่า (Grandiflora) กหุ ลาบหนู (Miniature) และกุหลาบเล้อื ย (Climber) (สุปรานี, 2541 ; โสระยา, 2544 ; สุธานิธ์,ิ 2539) โดยกุหลาบพนั ธุ์ Royal Baccara สแี ดง เป็นลูกผสมระหว่างพนั ธุ์ Meibuito x Ambassador จดั อยู่ในกลุ่มกุหลาบตดั ดอก เป็นพนั ธุท์ ่ีมคี วามแขง็ แรง และทนทานต่อโรค (วารสารสถานี เกษตรหลวงอ่างขาง, 2555)

ข้ อ มู ล ท า ง เ ศ ร ษ ฐ กิ จ ข อ ง กุ ห ล า บ ตั ด ด อ ก ตลาดของกุหลาบคุณภาพปานกลางถงึ ตาํ่ (ตลาดล่าง) ในปจั จุบนั ถงึ ขนั้ อ่มิ ตวั เกษตรกรขายไดร้ าคาตาํ่ มาก โดยมรี าคาเฉลย่ี ดอกละ 1 –2 บาท และเมอ่ื ผลผลติ ลน้ ตลาด ราคาจะเหลอื เพยี งดอกละ 0.50 – 0.75 บาทเท่านน้ั ซง่ึ เกษตรกรจะไมม่ อี าํ นาจ ในการต่อรองราคาไดเ้ ลย ดงั นนั้ การผลติ ชนิดน้ีตอ้ งอาศยั การผลติ ในปริมาณมาก เพอ่ื ใหเ้ กษตรกรอยู่ได้ ส่วนตลาดของกุหลาบท่มี คี ุณภาพสูง (ตลาดบน) ผลผลติ ใน ประเทศยงั ไม่เพียงพอ และขาดความต่อเน่ืองทาํ ใหย้ งั ตอ้ งนาํ เขา้ ดอกกุหลาบจาก ต่างประเทศ เช่น เนเธอรแ์ ลนด์ มาเลเซยี และจนี ทม่ี า : มลู นธิ ิโครงการหลวงและสถาบนั วจิ ยั และพฒั นาพ้นื ทส่ี ูง(องคก์ ารมหาชน). 2549. คู่มอื การผลติ ไม้ ตดั ดอกและไมต้ ดั ใบ. มลู นธิ ิโครงการหลวง. เชยี งใหม.่ 375 หนา้ .

ขนั้ ตอนการเพาะเล้ยี งเน้อื เย้อื 1.เลือกแม่พนั ธ์ทุ ่ีดีทนต่อโรค 6.ย้ายออกปลกู 5.เพม่ิ จานวนยอดและ ชกั นาให้เกิดราก 2.เลือกชนิ ้ ส่วนพืชท่ีสามารถเจริญได้ 4.เลีย้ งบนอาหาร 3.ฟอกฆ่าเชือ้ ชนิ ้ ส่วนพืช

ขนั้ ตอนการฟอกฆ่าเช้อื โซเดียมไฮโปคลอไรด์ การใช้สารละลายโชเดียมคลอไรด์ในการฟอกฆ่าเชือ้ ชิน้ สว่ นของแผ่นใบ ที่ค้อนข้างบอบบางสง่ ผลให้เนือ้ เยือ้ มีโอกาสตายหรือได้รับอนั ตรายได้

Technology Micro-Nano bubble รูปลกั ษณะการเกดิ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ (Takahashi, 2005)

นาโนบบั เบ้ิล (Nanobubble) เป็นเทคโนโลยีฟองอาศท่ีมี อนุภาคขนาดเล็กมากระดบั นาโนเมตรโดยฟองอากาศระดบั นาโน (Nanobubble) มเี สน้ ผา่ ศูนยก์ ลางนอ้ ยกวา่ 200 นาโนเมตร มขี นาด เลก็ มากไม่สามารถมองเหน็ ไดด้ ว้ ยตาเปลา่ และคงอยู่ในนาํ้ ไดน้ านกว่า ฟองอากาศทวั่ ไปเป็นเวลานานหลายเท่า เน่ืองจากนาโนบบั เบ้ลิ มพี ้นื ผวิ ของอากาศจาํ นวนมาก ไมร่ วมตวั กนั เป็นฟองขนาดใหญ่ ทาํ ใหส้ ามารถ ละลายหรือแทรกตวั ในตวั กลางท่ีเป็นของเหลว เช่น นํา้ ไดม้ ากว่า สภาวะปกติหลายเท่าตวั และทาํ ใหม้ แี รงลอยตวั ตาํ่ จึงทาํ ใหก้ ารลอย ข้นึ สูผ่ วิ นาํ้ ชา้ กวา่ ฟองอากาศทวั่ ไป ทม่ี า: ศูนยค์ วามเป็นเลศิ ทางวชิ าการดา้ นการประยุกตใ์ ชไ้ ฟฟ้าแรงสูงพลาสมาและไมโครนา โนบบั เบ้ลิ เพอ่ื การเกษตร และประมงขน้ั สูง มทร.ลา้ นนา เชยี งใหม่

ประโยชนข์ องเทคโนโลยไี มโครนาโนบบั เบ้ลิ 1. ใชใ้ นการเพาะเล้ยี งสตั วน์ าํ้ ทกุ ชนดิ 2. ใชใ้ นการบาํ บดั นาํ้ เสยี 3. ใชใ้ นการทาํ ความสะอาดพ้นื ผวิ ฆ่าเช้อื จุลนิ ทรยี ์ 4. ใชใ้ นการลา้ งเพอ่ื ลดสารเคมที ต่ี กคา้ งในผกั 5. ใชท้ างการเกษตรในระบบไฮโดรโปนิกส์ 6. ใชใ้ นการกระตนุ้ ใหเ้มลด็ หรอื ตน้ กลา้ พชื งอกเร็ว 7. ใชใ้ นการถนอมอาหาร ทม่ี า: ศูนยค์ วามเป็นเลศิ ทางวชิ าการดา้ นการประยุกตใ์ ชไ้ ฟฟ้าแรงสูงพลาสมาและไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ เพอ่ื การเกษตร และประมงขนั้ สูง มทร.ลา้ นนา เชยี งใหม่

สาํ หรบั การประยุกตใ์ ชเ้ทคโนโลยไี มโครนาโนบบั เบ้ลิ ในการเพาะปลูกพชื แบบไมใ่ ช่ดนิ (Hydroponics) มรี ายงานว่าการนาํ MNB technology เขา้ ไป ช่วยในการปลูกพชื แบบไม่ใช่ดนิ สามารถเพม่ิ ปริมาณค่าการละลายของกา๊ ซ ในนํ้าไดท้ ําใหน้ ํ้าท่ีใชเ้ พาะปลูกมีคุณสมบัติดีส่งผลให้ผลผลิตมีการ เจรญิ เตบิ โตหรอื มคี ณุ ภาพทด่ี ตี ามมาดว้ ย ทม่ี า : Takahashi, 2005

จากรายงานวจิ ยั ของ ชิติ ศรีตนทพิ ย์ และคณะ (2561) พบว่านาํ้ ไม โคร/ นาโนบบั เบ้ลิ 5 นาที สามารถทาํ ใหเ้มลด็ คะนา้ งอกไดเ้ พม่ิ ข้นึ หลงั จาก เพาะ 4 และ 5 วนั การเจริญเติบโตของตน้ กลา้ พบว่านํา้ ไมโคร/นา โนบบั เบิลส์ 3 และ 5 นาที มคี วามสูงของตน้ มากท่สี ุด และการใหน้ าํ้ ไม โคร/นาโนบบั เบลิ สม์ ผี ลทาํ ใหต้ น้ กลา้ มคี วามยาวรากมากกว่าการรดดว้ ย นาํ้ เปลา่ นอกจากน้ีมรี ายงานของ Jiang et all. (2016) พบวา่ ผลของการ เติมออกซเิ จนดว้ ยเทคโนโลยไี มโคร นาโนบบั เบ้ลิ ในนาํ้ สามารถปรบั ปรุงค่า ปรมิ าณออกซเิ จนทล่ี ะลายในนาํ้ ดขี ้นึ

วตั ถปุ ระสงค์ เพอ่ื ศึกษาผลของระยะเวลาในการเตรยี มนาํ้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ ต่อการฟอกฆ่าเช้อื ช้นิ ส่วนกุหลาบ

ขอบเขตของการวจิ ยั ➢ศึกษาผลระยะเวลาในการเตรียมนํา้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ิล ใน ระยะเวลา 10 , 15 , และ 20 นาที ➢นาํ นาํ้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ ไปใชใ้ นการฟอกฆ่าเช้อื ช้ินส่วนตายอด ของกหุ ลาบ ➢นาํ ไปเขยา่ บนเคร่อื งเขยา่ (shaker) เป็นระยะเวลา 15 นาที ➢นาํ ไปเล้ยี งในอาหารวุน้ เป็นระยะเวลา 14 วนั ➢วเิ คราะหข์ อ้ มลู เปอรเ์ ซนตก์ ารรอด และการปนเป้ือนของจุลนิ ทรีย์

งานวจิ ยั ทเ่ี ก่ยี วขอ้ ง (อสมา และวราภา, 2560) ไดศ้ ึกษาการลดจาํ นวนจุลนิ ทรียใ์ นผกั สดดว้ ยการลา้ งในนาํ้ ฟองอากาศขนาดละเอยี ดร่วมกบั โซเดยี มไฮโปคลอไรท์ ทค่ี วามเขม้ ขน้ แตกต่างกนั ใชล้ า้ งผกั บงุ้ ผกั กาดหอมและขิง ซ้ึงเป็นตวั แทนของผกั ใบเรียบ ใบหยิก และแบบแง่ง พบว่าวิธีท่ีมี ประสทิ ธิภาพดีท่สี ดุในลดจุลนิ ทรียใ์ นผกั ทงั้ 3 ชนิด คือการลา้ งดว้ ยนาํ้ ไมโครนาโนบบั เบ้ลิ ร่วมกบั NaOCl ความเขม้ ขน้ 80 mg/L เป็นเวลา 5 นาที สามารถลดจาํ นวน จลุ นิ ทรยี ท์ ง้ั หมด ในผกั บงุ้ ผกั กาดหอม และขงิ ไดส้ ูงสดุ ถงึ 97.5%, 99.6% และ 97.0% ตามลาํ ดบั ในขณะท่ี การลา้ งดว้ ยนาํ้ ไมโครนาโนบบั เบ้ลิ เพยี งอย่างเดยี ว สามารถลดจาํ นวนเช้อื ทง้ั หมดในผกั ทงั้ สาม ชนิดไดน้ อ้ ยกว่าคือประมาณ 70% สรุปไดว้ ่าการใชน้ าํ้ ทม่ี ฟี องละเอยี ดลา้ งผกั ทาํ ใหผ้ กั มคี วาม สด ส่วนการลา้ งร่วมกบั สารฆ่าเช้อื ช่วยเพม่ิ ประสทิ ธภิ าพในการทาํ ลายจลุ นิ ทรีย์ สามารถยดื อาย ผกั ทง้ั สามไดด้ กี วา่ การลา้ งดว้ ยนาํ้ ปกติ



มรี ายงานของ ธีรภทั ร และคณะ (2560) หาประสิทธิภาพของการใช้ สารละลายพลาสมา และไมโครบบั เบ้ลิ ต่อการเจริญของเช้ือ Penicillium digitatum พบวา่ การใชน้ าํ้ พลาสมาร่วมกบั ไมโครบบั เบ้ลิ เป็นเวลา 15 นาที และ 30 นาที ใหผ้ ลดกี ว่าในการยบั ยงั้ การเจรญิ ของเช้อื P. digitatum เมอ่ื เปรียบเทียบกับการใชพ้ ลาสมา หรือ ไมโครบับเบ้ิลอย่างเดียวซ่ึง ประสิทธิภาพการยบั ยง้ั เช้ือของนาํ้ พลาสมาร่วมกบั ไมโครบบั เบ้ลิ จะเพ่มิ ข้นึ โดยสมั พนั ธก์ บั ค่า pH ทล่ี ดลง และ ORP ทเ่ี พม่ิ ข้นึ นอกจากนนั้ สงั เกตการ เปล่ยี นแปลงโครงสรา้ งของเซลล์ โดยตรวจสอบภายใตก้ ลอ้ งจุลทรรศน์ พบว่าเสน้ ใย และสปอร์ของเช้ือราไดร้ บั ความเสียหายจากการไดร้ บั นํา้ พลาสมาร่วมกบั นาํ้ ไมโครบบั เบ้ลิ



วธิ ดี าํ เนินการวจิ ยั

วธิ ีการเตรยี มอาหารเล้ยี งเน้ือเย่อื ทาํ การเตรียมอาหารวุน้ ปริมาณ 8 กรมั และนาํ้ ตาล ปริมาณ 30 กรมั ต่อนํา้ 1 ลิตร นําไปตม้ ใหอ้ าหารวุน้ ละลายแลว้ เทใส่ขวดแกว้ ใน ปรมิ าณ 20 ml. จาํ นวน 70 ขวด นาํ ไปทาํ การน่ึงฆ่าเช้อื ดว้ ยหมอ้ น่ึงไอ นาํ้ ความดนั สูง (autoclave) ท่ีอุณหภูมิ 121 ℃ ความดนั 15 ปอนดต์ ่อตารางเมตร เป็นเวลา 15 นาที

วธิ กี ารทดลอง ทาํ การศึกษาผลระยะเวลาในการเตรยี มนาํ้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ ต่อการฟอก ฆ่าเช้อื ช้นิ สว่ นเน้ือเยอ่ื กุหลาบพนั ธุ์ Royal Baccara สแี ดง โดยเลอื กใชว้ ธิ กี าร วางแผนการทดลองวจิ ยั แบบสุ่มอย่างสมบูรณ์ (Completely Randomized Design :CRD)แบ่งออกเป็นจาํ นวนการทดลอง 4 กรรมวธิ ี ๆ ละ 10 ซาํ้



การเกบ็ บนั ทกึ ขอ้ มลู 1. เก็บขอ้ มลู นาํ้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ ก่อนนาํ ไปใช้ - วดั ค่าปรมิ าณออกซเิ จนทล่ี ะลายอยู่ในนาํ้ (DO: Dissolved Oxygen) ทง้ั 7 กรรมวธิ ี ดว้ ยเคร่อื งวดั ออกซเิ จนในนาํ้ DO Meter - วดั ค่าความเป็นกรด-ด่าง (pH) ) ในนาํ้ ทงั้ 7 กรรมวธิ ี ดว้ ยเคร่อื ง pH Meter 2. เร่มิ เก็บขอ้ มลู ทกุ วนั ตง้ั แต่วนั ทเ่ี ร่มิ การทดลองเป็นระยะเวลา 2 สปั ดาห์ 2.1 รอ้ ยละของการเกดิ การปนเป้ือนของเช้อื รา 2.2 รอ้ ยละของการเกดิ การปนเป้ือนของแบคทเี รยี 2.3 รอ้ ยละอตั รารอดของช้นิ ส่วนเน้ือเยอ่ื ทป่ี ลอดเช้อื

การวเิ คราะหข์ อ้ มลู ทาํ การวิเคราะหข์ อ้ มูลประสิทธิภาพการใชน้ ํา้ ไมโครนาโน- บบั เบลิ ต่อการฟอกฆ่าเช้อื ช้นิ ส่วนกุหลาบ เมอ่ื อายุครบ 2 สปั ดาห์ ดว้ ยการใชโ้ ปรแกรม SPSS Statistic รุ่น 16.0 ทาํ การวเิ คราะห์ ความแปรปรวนทาง สถติ ิ (ANOVA) และเปรียบเทยี บความ แตกต่างของค่าเฉล่ยี โดยวิธี LSD (Least Significant Difference) ท่ี ระดบั นยั สาํ คญั 0.05

แผนการดาํ เนินการทดลอง กิจกรรม ปี 2563 1.สืบค้นข้อมูล และวางแผนการทดลอง มิ.ย ก.ค. ส.ค. ก.ย. ต.ค. พ.ย. ธ.ค. 2.สอบโครงร่ าง *** * 3.เตรียมวัสดอุ ุปกรณ์ *** * 4.ทาการทดลอง *** * 5.บันทึกข้ อมูลอัตรารอดของชิน้ ส่ วน *** กุหลาบ * 6.วิเคราะห์ข้อมูล *** *** ** 7.สรุปผลรายงานฉบับสมบูรณ์ และสอบ *** *** ปกป้องการ ค้นคว้าอสิ ระ **

ผลทค่ี าดวา่ จะไดร้ บั 1. ไดข้ อ้ มลู การใชป้ ระโยชนน์ าํ้ ไมโคร นาโนบบั เบ้ลิ ทส่ี ามารถนาํ มาใชใ้ นการ เพม่ิ ประสทิ ธิภาพการฟอกฆ่าเช้อื ช้นิ ส่วนเน้ือเย้อื และลดการใชส้ ารเคมี 2. ไดร้ ูถ้ งึ ผลของระยะเวลาทเ่ี หมาะสมจากการใชเ้คร่อื งปมั๊ ฟองอากาศขนาด เลก็ ในการการฟอกฆ่าเช้อื ช้นิ ส่วนกหุ ลาบ ระยะเวลาทาํ การวจิ ยั ระหวา่ ง เดอื น มถิ นุ ายน พ.ศ. 2563 ถงึ เดอื น ธนั วาคม พ.ศ. 2563

สถานทท่ี าํ การวจิ ยั อาคารปฏบิ ตั กิ ารเพาะเล้ยี งเน้อื เยอ่ื พชื สถาบนั วจิ ยั เทคโนโลยี เกษตร มหาวทิ ยาลยั เทคโนโลยรี าชมงคลลา้ นนาลาํ ปาง 202 ม.17 ต.พชิ ยั อ.เมอื ง จ.ลาํ ปาง 52000 งบประมาณทใ่ี ช้ รายการค่าใชจ้ ่าย ดงั น้ี 1. สารเคมใี นการทดลอง 1,000 บาท 2. อปุ กรณแ์ ละวสั ดุอน่ื ๆ 10,000 บาท รวมงบประมาณทใ่ี ชท้ ง้ั ส้นิ 11,000 บาท

เอกสารอา้ งองิ กนกวรรณ เกดิ กูล.2557. ผลของอาหารเพาะเล้ยี งเน้ือเยอ่ื พชื จากสารละลายสาํ หรบั ปลูก พชื ไมใ่ ชด้ นิ ต่อการงอกและการพฒั นาของเมลด็ กลว้ ยไมเ้อ้อื งกหุ ลาบกระเป๋า เปิด.[On-line]. Available : www.thapra .lib.su.ac.th. 25 กมุ ภาพนั ธ์ 2562 กาญจนรี พงษฉ์ ว.ี 2558. การเพาะเล้ยี งเน้อื เยอ่ื พรรณไมน้ าํ้ . [On-line]. Available :http://inlandfisheries.go.th/files/pdf.20 เมษายน 2562.เขา้ ถงึ ได้ จาก http://th.wikipedia.or ชติ ิ และคณะ. 2561. การประยุกตใ์ ชไ้ มโคร/นาโนบบั เบลิ สต์ ่อการงอกและการ เจรญิ เตบิ โตของตน้ กลา้ คะนา้ .สถาบนั วจิ ยั เทคโนโลยเี กษตรและคณะ วศิ วกรรมศาสตร์ มหาวทิ ยาลยั เทคโนโลยรี าชมงคล ลา้ นนา จงั หวดั ลาํ ปาง 5200 นิดาพร และคณะ.2016. การเพาะเล้ยี งเน้อื เยอ่ื และการวเิ คราะหค์ วามคงตวั ของระดบั พลอยดด์ ขี องกลว้ ยนาํ้ วา้ มะลอิ ่อง. คณะวทิ ยาศาสตร์ มหาวทิ ยาลยั ราชภฏั อบุ ลราชธานี

THANK YOU